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公开(公告)号：CN111499744B
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202010341697.4
申请日：2020-04-27
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种乳铁蛋白纳米抗体及制备方法，并提供一种利用乳铁蛋白纳米抗体纯化乳铁蛋白的方法。该乳铁蛋白纳米抗体为VHH抗体，具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列和SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，将所述乳铁蛋白纳米抗体与填料偶联得到可以用于乳铁蛋白纯化的填料，所述偶联乳铁蛋白单链抗体的填料，能成功结合乳铁蛋白，且载量较高，可以用于乳铁蛋白的分离纯化以及工业化生产。
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公开(公告)号：CN106868212B
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN201710159937.7
申请日：2017-03-17
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了一种Ⅰ亚群禽腺病毒通用型PCR检测引物及检测方法，属于禽类病毒检测技术领域。本发明Ⅰ亚群禽腺病毒通用型PCR检测引物由上游引物和下游引物组成；所述上游引物如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物如SEQ ID NO.2所示。Ⅰ亚群禽腺病毒检测方法，包括使用所述的Ⅰ亚群禽腺病毒通用型PCR检测引物进行PCR扩增反应。所述PCR扩增反应产物出现494bp片段时为阳性，否则为阴性。本发明方法为能够检测Ｉ亚群禽腺病毒A、B、C、D、E等5个种共12个血清型的通用方法，具有通用性好、特异性强、敏感性高、操作方便、快速准确等特点。
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公开(公告)号：CN112225781A
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN202010915134.1
申请日：2020-09-03
Applicant: 清源生物(深圳)有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 滨州医学院附属医院 , 清源之光(武汉)生物科技有限公司
IPC: C07K14/165 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P21/02 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于免疫技术领域，具体涉及一种高效表达新型冠状病毒N蛋白的方法。本发明按照2.0％‑3.0％的接种量将种子液接种至发酵培养基中，培养温度为35‑37℃，pH值维持在7.3‑7.5，维持溶氧水平在30％左右；当初始碳源耗尽后，根据溶氧反馈补料策略，溶氧水平升至50％‑60％时补加50％‑80％甘油溶液；溶氧水平降至20％‑30％时停止补加，如此反复；当细菌浓度达到1.0‑3.0时，加入0.3‑1mM IPTG进行诱导，且继续培养2h后，再次加入0.3mM IPTG进行二次诱导，总诱导为6‑8h。可以实现新冠病毒截短N蛋白的可溶性高效表达，能满足大规模生产可溶性新冠病毒N蛋白的需求。
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公开(公告)号：CN111499745A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010341773.1
申请日：2020-04-27
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C07K16/18 , C07K16/06 , G01N33/539
Abstract: 本发明提供了一种CRP单价及双价纳米抗体，所述纳米抗体具有较高的ELISA效价，可以用于CPR的实验室和临床检测，且经试验表明，CRP双价纳米抗体的亲和活性比单价纳米抗体增加了10倍，取得了预料不到的技术效果。所述CRP单价及双价纳米抗体容易利用微生物进行生产，并具有很高的产率，有利于工业化生产。
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公开(公告)号：CN107129934B
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN201710357560.6
申请日：2017-05-19
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明属于微生物领域，具体涉及快速筛选好氧微生物最适pH调节剂以及确定上述的好氧微生物最适生长pH值的方法。本发明的方法包括下述的步骤：（1）选择好氧微生物培养所适宜的碱性及酸性pH调节剂；（2）验证最适pH调节剂和确定好氧微生物的生长稳定期；（3）筛选最适生长pH值；（4）验证该微生物的最适生长pH值。通过本发明的方法筛选及确定，得到了好氧微生物最适pH调节剂和以及确定了好氧微生物生长最适的pH值，采用本发明的方法具有操作简单、快速，且准确度高的特点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109207397B
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN201811088534.9
申请日：2018-09-18
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明属于农业微生物技术领域，尤其涉及一种副猪嗜血杆菌培养基及高密度发酵培养方法。本发明得到利于副猪嗜血杆菌培养的培养基组分：葡萄糖2.5 g/L，蛋白胨10.0 g/L，酵母粉10.0 g/L，K2HPO4 2.5 g/L，NaCl 5.0 g/L，三甲基甘氨酸1.5 g/L，氯化胆碱1.0 mL/L，VB1 30.0 mg/L，VH 10.0 mg/L，NAD 50 mg/L，3.0%牛血清，余量是水；本发明还提供了基于上述培养基组分的副猪嗜血杆菌发酵培养方法，在不含辅酶培养基中以牛血清作为限制性生长因子，建立电容值与牛血清消耗的线性关系，则可实时调节牛血清补加速率并维持在一定浓度。采用该方法，副猪嗜血杆菌活菌数目均达到x1010 CFU/mL以上，实现了其高密度发酵，且该方法可应用于多种情形副猪嗜血杆菌的规模化生产。
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公开(公告)号：CN106754981B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201710049003.8
申请日：2017-01-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及一种利用大肠杆菌系统可溶性表达小鹅瘟VP2蛋白制备小鹅瘟病毒样颗粒方法，一种可溶性表达小鹅瘟病毒VP2蛋白的方法，对鹅细小病毒VP2基因进行密码子优化，定点突变包括将密码子AGA突变为CGC和GGA突变为GGT,并克隆到pET‑Sumo载体上，构建重组表达载体pET‑Sumo‑VP2，并将pET‑Sumo‑VP2转化至原核表达菌，通过IPTG在37℃下诱导，获得可溶性重组VP2重组蛋白；将重组蛋白用ULP酶酶切后通过Ni柱纯化得到纯化的VP2蛋白。电镜结果显示酶切后的VP2蛋白可形成小鹅瘟病毒样颗粒，并且纯化后的VP2蛋白具有良好的反应原性，可用于小鹅瘟病毒基因工程亚单位疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN111218528A
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN202010167385.6
申请日：2020-03-11
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及基于双基因检测非洲猪瘟病毒的PCR引物组、试剂盒及应用。本发明中的引物组及方法的检测特异性高、重复性好、灵敏度高，同时具有操作简便，检测时间短等优势，可有效地降低假阳性结果的出现，降低阳性对照对检测环境的影响，在非洲猪瘟病毒的快速检测中具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN109355221A
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201811313599.9
申请日：2018-11-06
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种用于高密度发酵制备霍乱弧菌菌影的培养基及方法。其培养基组分包括：葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、柠檬酸、KCl、MgSO4·7H2O、(NH4)2SO4、甜菜碱、VB1、VH、氨苄霉素和氯化胆碱，其pH值为7.30～7.50。其方法是在培养过程中，加入国产阿拉伯糖进行诱导；诱导阶段，以一定的补加速率补加一定营养物质与抗生素进行诱导，菌影形成率达到99％以上。本发明可以实现大量生产霍乱弧菌菌影，能满足大规模生产霍乱弧菌菌影佐剂的需求。
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公开(公告)号：CN109207397A
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201811088534.9
申请日：2018-09-18
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明属于农业微生物技术领域，尤其涉及一种副猪嗜血杆菌培养基及高密度发酵培养方法。本发明得到利于副猪嗜血杆菌培养的培养基组分：葡萄糖2.5 g/L，蛋白胨10.0 g/L，酵母粉10.0 g/L，K2HPO4 2.5 g/L，NaCl 5.0 g/L，三甲基甘氨酸1.5 g/L，氯化胆碱1.0 mL/L，VB1 30.0 mg/L，VH 10.0 mg/L，NAD 50 mg/L，3.0%牛血清，余量是水；本发明还提供了基于上述培养基组分的副猪嗜血杆菌发酵培养方法，在不含辅酶培养基中以牛血清作为限制性生长因子，建立电容值与牛血清消耗的线性关系，则可实时调节牛血清补加速率并维持在一定浓度。采用该方法，副猪嗜血杆菌活菌数目均达到x1010 CFU/mL以上，实现了其高密度发酵，且该方法可应用于多种情形副猪嗜血杆菌的规模化生产。
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