公开(公告)号：CN106754981B

公开(公告)日：2020-06-09

申请号：CN201710049003.8

申请日：2017-01-23

Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院

Inventor： 曲光刚 ,  沈志强 ,  金婷婷 ,  李书光 ,  武曰星 ,  王长江

IPC: C12N15/35 ,  C12N15/70 ,  C12N7/04 ,  C07K14/015 ,  C07K16/08 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明涉及一种利用大肠杆菌系统可溶性表达小鹅瘟VP2蛋白制备小鹅瘟病毒样颗粒方法，一种可溶性表达小鹅瘟病毒VP2蛋白的方法，对鹅细小病毒VP2基因进行密码子优化，定点突变包括将密码子AGA突变为CGC和GGA突变为GGT,并克隆到pET‑Sumo载体上，构建重组表达载体pET‑Sumo‑VP2，并将pET‑Sumo‑VP2转化至原核表达菌，通过IPTG在37℃下诱导，获得可溶性重组VP2重组蛋白；将重组蛋白用ULP酶酶切后通过Ni柱纯化得到纯化的VP2蛋白。电镜结果显示酶切后的VP2蛋白可形成小鹅瘟病毒样颗粒，并且纯化后的VP2蛋白具有良好的反应原性，可用于小鹅瘟病毒基因工程亚单位疫苗的制备。

公开(公告)号：CN106754981A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201710049003.8

申请日：2017-01-23

Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院

Inventor： 曲光刚 ,  沈志强 ,  金婷婷 ,  李书光 ,  武曰星 ,  王长江

IPC: C12N15/35 ,  C12N15/70 ,  C12N7/04 ,  C07K14/015 ,  C07K16/08 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明涉及一种利用大肠杆菌系统可溶性表达小鹅瘟VP2蛋白制备小鹅瘟病毒样颗粒方法，一种可溶性表达小鹅瘟病毒VP2蛋白的方法，对鹅细小病毒VP2基因进行密码子优化，定点突变包括将密码子AGA突变为CGC和GGA突变为GGT,并克隆到pET‑Sumo载体上，构建重组表达载体pET‑Sumo‑VP2，并将pET‑Sumo‑VP2转化至原核表达菌，通过IPTG在37℃下诱导，获得可溶性重组VP2重组蛋白；将重组蛋白用ULP酶酶切后通过Ni柱纯化得到纯化的VP2蛋白。电镜结果显示酶切后的VP2蛋白可形成小鹅瘟病毒样颗粒，并且纯化后的VP2蛋白具有良好的反应原性，可用于小鹅瘟病毒基因工程亚单位疫苗的制备。

公开(公告)号：CN206223600U

公开(公告)日：2017-06-06

申请号：CN201621345135.2

申请日：2016-12-08

Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院

Inventor： 曲光刚 ,  王长江 ,  金婷婷 ,  武曰星 ,  李茂峰

IPC: G01N13/00 ,  G05D27/02

Abstract: 本实用新型公开了一种可控温型琼脂扩散试验保湿盒，包括盒体，所述盒体内设置有多个琼脂板支架，所述盒体的内壁设置有多个与所述琼脂板支架配合的滑动支架，所述盒体内设置有温控装置，所述温控装置包括温度探头、控制面板和电加热装置，所述温度探头的输出端与所述控制面板的输入端连接，所述控制面板的输出端与所述电加热装置的输入端连接。本实用新型通过温控装置对盒体内进行恒温处理，在使用时盒体底部预留少量水，可以将盒体内维持相对的温度和湿度平衡，提高了对温度控制的准确性，此外琼脂板支架倾斜式底座的设计可以提高琼脂板放置的稳定性，防止晃动，从而减少对影响试验结果的判定。