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公开(公告)号：CN112575117B
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202110018658.5
申请日：2021-01-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组用于鉴定不结球白菜红菜薹“靓红玫瑰”和“十月红”的SSR分子标记引物及其应用，属于蔬菜品种鉴定与良种技术领域。所述SSR分子标记引物的序列为：BrcSSR60‑F:5’‑GAGCATCATCACCAAGCTCA‑3’，BrcSSR60‑R:5’‑ATGTAACCGTTTCCTGGCTG‑3’。利用本发明公开的SSR分子标记引物及其检测方法可以将不结球白菜红菜薹“靓红玫瑰”和“十月红”两个品种进行有效区分。该方法不受植株生长发育阶段和环境的影响，操作简单，检测准确迅速，当出现品种混淆或有争议时可进行有效地监督和仲裁。
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公开(公告)号：CN115747370A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211417240.2
申请日：2022-11-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组不结球白菜的KASP分子标记及其在种质资源鉴定中的应用。所述KASP分子标记基于不结球白菜基因组和重测序KASP技术，开发了一组不结球白菜的KASP引物，根据所开发的SNP位点以及设计的引物可以构建所选群体的DNA指纹图谱、品种鉴定、以及种子纯度鉴定等实验，实现对不结球白菜种质资源和种子纯度的快速、准确、有效地鉴定。
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公开(公告)号：CN109652455B
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN201910121665.0
申请日：2019-02-19
Applicant: 南京农业大学 , 南京市蔬菜科学研究所
IPC: C12N15/87
Abstract: 为解决不结球白菜再生率低，受基因型影响大，使得转化效率低的技术问题，本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法，包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1：1连接，得到基因—磁性纳米载体复合物；在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉，在0.1～0.5T的磁场介导下进行磁转化，直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞；然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合，能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率，建立简单高效的遗传转化体系。
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公开(公告)号：CN113564201A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202110886126.3
申请日：2021-08-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种十字花科作物花粉电击遗传转化方法，以不结球白菜的成熟花粉细胞作为受体材料，把质粒DNA在电场的作用下，导入花粉中，结合常规的人工授粉，得到转基因种子。通过对电转染花粉的培养观察，以及获得的后代植株进行转基因检测，证明电击转化法可以成功的在不结球白菜上应用。本发明首次在不结球白菜上应用电击转化技术作为基因编辑的方法，与目前农杆菌转化，基因枪法等转基因方法相比，操作相对简洁，成本较低，可以进一步研究建立遗传转化体系，为不结球白菜的遗传育种提供更好的工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111543307A
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN202010381924.6
申请日：2020-05-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种白菜或青花菜CRISPR-Cas9基因编辑体系基因编辑效率的鉴定方法。该方法包含以下步骤:(1)利用聚乙烯亚胺修饰的碳纳米管介导的叶片瞬时转化法将CRISPR-Cas9基因编辑载体转化白菜或青花菜叶片；(2)注射后的第三天观察叶片GFP荧光蛋白的表达情况,提取有GFP荧光表达的叶片部位的基因组DNA，扩增编辑位点附近的序列测序验证编辑位点附近是否发生基因编辑,从而鉴定CRISPR-Cas9基因编辑体系的基因编辑效率。本方法解决了白菜和青花菜难以通过农杆菌侵染实现瞬时转化的问题，本发明简单有效地实现了白菜和青花菜的基因编辑，具有实验周期短，转化效率高的优点。
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公开(公告)号：CN108034753A
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201810035647.6
申请日：2018-01-15
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种与不结球白菜开花时间紧密连锁的SNP分子标记，所述SNP分子标记位于如SEQ ID NO.1所示BrFLC1_A10基因的第58个碱基，所述碱基为A或C，SNP分子标记的基因型为A/A时，不结球白菜为早开花型；SNP分子标记的基因型为C/C时，不结球白菜为晚开花型。本发明还提供用于检测与不结球白菜开花时间紧密连锁的SNP分子标记的特异性引物对，同时提供不结球白菜开花时间紧密连锁的SNP分子标记在鉴定不结球白菜开花时间以及在不结球白菜辅助育种中的应用。还提供用于检测与不结球白菜开花时间紧密连锁的SNP分子标记的特异性引物对在鉴定不结球白菜开花时间中以及在不结球白菜辅助育种中的应用。
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公开(公告)号：CN103718965B
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201310726458.0
申请日：2013-12-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种快速高效获得芸薹属蔬菜游离小孢子培养再生植株的方法，该方法是待小孢子胚状体产生时，将其转到2000lx、25℃、60r/min摇床上振荡培养，3～7d后将转绿的子叶型胚转移到含蔗糖2.5%，琼脂粉1%的B5固体培养基上继续培养获得再生芽；15～20d后，转入含10%椰汁，3%蔗糖，0.78%琼脂粉的MS固体培养基中，20～30d后大多数植株长成健壮且生根的幼苗，可驯化移栽，培养条件都为90uE/m2/s、12hr/d、25℃。再生植株平均成苗率达83.5%。本发明有效解决小孢子胚易褐化、玻璃化的问题；有效缩短利用游离小孢子培养获得DH株系的时间；不需添加任何激素，更安全。
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公开(公告)号：CN206486526U
公开(公告)日：2017-09-12
申请号：CN201720063034.4
申请日：2017-01-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12M1/26
CPC classification number: C12M33/04
Abstract: 本实用新型针对酵母试验过程中的缺陷和不足，提供了一种用于酵母试验中进行菌液混匀和接种的酵母接种器，包括金属手把、不锈钢金属板和若干个不锈钢圆柱体，所述金属手把的一端与不锈钢金属板的上表面固定连接，所述若干个不锈钢圆柱体的上端与不锈钢金属板的下表面连接。而使用本实用新型可以有效解决酵母试验过程中存在的效率低下、菌斑不够整齐一致等问题。相对于使用移液枪每次只能对单个酵母克隆混匀和接种，本接种器进行转移接种时每次可完成48个，更加快速，高效，而且使用本实用新型对酵母进行转移接种后，在培养基上生长的菌斑更加整齐一致、美观漂亮。
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公开(公告)号：CN207340532U
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201721170082.X
申请日：2017-09-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01D45/30
Abstract: 本实用型提供了一种用于拟南芥自动收集种子与防止株间杂交的采收罩，包括透明塑料主体、种子收集器、出苗孔和插地针和挡板，透明塑料主体的一端与种子收集器的上端嵌合连接。透明塑料主体控制种子掉落到底部，种子收集器设计成一侧为轴的扣合结构，方便采收罩在任意时期使用，内部设计成倒锥形，促使掉落的种子滑向四周，以便收集。本实用新型采收罩适用于拟南芥的营养钵与穴盘栽培，可在植株生长的任意时期使用，即能自动收集拟南芥单株整个生命周期中成熟炸裂的种子，保证种子纯度，防止转基因种子散落到环境中，对生态造成不可控的影响，提高收种效率，又能防止在植株生长过程中，因植株间互相接触发生杂交，产生杂交污染。
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