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公开(公告)号：CN103421742A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310211887.4
申请日：2013-05-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/14 , C12N15/13 , G01N33/92 , G01N33/577
Abstract: 本发明属于植物免疫检测技术领域。具体涉及一种分泌抗伏马菌素B1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单克隆重组抗体的制备与应用。将伏马菌素B1分别与载体蛋白KLH和BSA偶联得到抗原，用所得FB1-KLH抗原免疫小鼠，细胞融合后进行选择性培养，利用FB1-BSA偶联物对杂交瘤细胞进行筛选，经亚克隆获得稳定分泌抗伏马菌素B1单克隆抗体的杂交瘤细胞株1(11。通过抗体基因库技术和噬菌体展示技术筛选杂交瘤细胞株1(11的单克隆重组抗体H2。本发明对单克隆抗体和重组抗体进行了大量生产和纯化，所得的1(11单克隆抗体和H2重组抗体可用于伏马菌素的免疫学检测。
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公开(公告)号：CN102443589B
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201010506091.8
申请日：2010-10-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物检验检疫技术领域，具体涉及一种镰刀菌B类毒素的分子检测方法及应用。其特征是，针对单端孢霉烯B类毒素，同过Tri11基因信息设计的一组多重PCR引物，从产3-AcDON、15-AcDON和NIV毒素的禾谷镰刀菌中分离得到334bp、279bp、497bp的特异片段，采用PCR反应，利用琼脂糖凝胶电泳检测产物，直接根据产物片段的大小，即可检测出禾谷镰刀菌产生毒素的类型。本发明可用于谷物、饲料和食品安全中镰刀菌B类毒素的检测。
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公开(公告)号：CN102304544B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201110257189.9
申请日：2011-09-01
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明公开了一种根癌农杆菌介导的大麦茎尖转化方法，其步骤：A．大麦茎尖培养及载体构建：1）选取大麦颖果，去除稃片，剥取成熟胚，盾片向下放置在萌发培养基上萌发；2）从中间载体pMBL-3及和绿色荧光蛋白基因GFP用酶切和PCR方法获得玉米泛素启动子及相关序列；B、利用农杆菌介导大麦茎尖遗传转化，步骤：1）大麦茎尖的获取；2）茎尖的浸染；3）茎尖和农杆菌GV3101共培养培养基：取出经农杆菌浸染的茎尖，在无菌滤纸上吸干表层菌液；4）茎尖的恢复培养基；5）茎尖的筛选培养基；6）再生植株的春化和栽培，得到候选的转化植株。方法易行，操作简便，周期短、效率高，程序简单，操作方便，结果可靠。
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公开(公告)号：CN102051376B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201010103458.1
申请日：2010-01-27
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物转基因技术领域。具体涉及一种甘蓝型油菜转基因的方法。本发明建立了适合以油菜子叶为外植体的叶绿体转化组织培养体系，通过基因枪转化法获得油菜叶绿体转基因植株。本发明还公开了利用油菜叶绿体片段为同源重组片段，构建油菜叶绿体特异性表达载体，对油菜叶绿体进行转化并获得转基因植株的方法。本发明为甘蓝型油菜的转基因提供了一种新途径。
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公开(公告)号：CN102443590A
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201010506095.6
申请日：2010-10-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物检验检疫技术领域，具体地涉及一种镰刀菌单端孢霉烯族A类毒素的分子鉴定方法。其特征是，针对单端孢霉烯A类毒素，通过Tri13基因信息设计一对特异性引物，从产镰刀菌A类毒素的镰刀菌中分离得到T-2毒素的特异性片段(其长度为470bp)，而不产镰刀菌A类毒素的镰刀菌中不能扩增到该特异片段，采用PCR反应，利用琼脂糖凝胶电泳检测产物，直接根据产物片段的有无及大小，即可确定某一镰刀菌是否产T-2毒素。本发明可用于谷物、饲料和食品安全中镰刀菌单端孢霉烯族A类毒素的检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101812517A
公开(公告)日：2010-08-25
申请号：CN201010028986.5
申请日：2010-01-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物抗病育种领域，具体涉及一种小麦赤霉病穗腐和苗腐抗性的分子标记的制备及应用。本发明的特征是，通过自行设计的一对引物，从小麦基因组扩增出CYP709C1基因的特异片段，以该基因的特异性片段制备小麦赤霉病穗腐和苗腐抗性的分子标记。检测分析表明，该基因的相对表达量与植物的抗赤霉病和苗腐病抗性紧密相关。本发明仅仅采用一个分子标记，即可鉴定不同小麦品种的在苗期和花期的小麦赤霉病穗腐和苗腐的抗性水平。本发明的分子标记可应用于小麦抗赤霉病苗腐和穗腐材料的筛选及分子育种上。
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公开(公告)号：CN101096703A
公开(公告)日：2008-01-02
申请号：CN200610019482.0
申请日：2006-06-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，与小麦转基因技术有关。公开了一种非抗生素筛选农杆菌介导的转基因小麦的方法，其步骤包括引物设计、PCR扩增、载体构建、遗传转化、筛选鉴定转基因植物等，本发明的特征在于，通过农杆菌将manA基因导入受体小麦，利用甘露糖替代抗生素作为选择剂，对转化后的受体细胞进行筛选，通过PCR检测和酶活鉴定，筛选获得转基因植株。本发明在植物转化及筛选程序中不需要添加抗生素或除草剂，转基因植物也不含抗生素或除草剂基因，本发明对环境安全，是一种绿色转基因植物的新方法。
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公开(公告)号：CN109251933B
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN201710569950.X
申请日：2017-07-13
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种与镰刀菌毒素及有毒醛类化合物脱毒相关基因AKR18A1及其应用，所述基因AKR18A1的序列为SEQ ID NO.1所示，编码的氨基酸包含醛酮还原酶的保守的特征结构元件，氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。通过原核表达基因AKR18A1获得纯化的蛋白，体外实验证实该纯化的蛋白可以氧化脱氧雪腐镰刀菌烯醇，形成3‑酮基‑脱氧雪腐镰刀菌烯醇；同时，该蛋白还可作用于玉米赤霉烯酮及其衍生物α‑玉米赤霉烯醇和β‑玉米赤霉烯醇，并能有效降解有毒醛类化合物乙二醛和甲基乙二醛。
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公开(公告)号：CN107916266A
公开(公告)日：2018-04-17
申请号：CN201711272601.8
申请日：2017-12-05
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了镰刀菌毒素脱毒路径的相关基因ADH、AKR6D1、AKR13B2及其应用，通过原核表达基因ADH、AKR6D1、AKR13B2获得纯化的蛋白，体外实验证实纯化的三个蛋白一起可以催化脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON），形成3-异构体-脱氧雪腐镰刀菌烯醇（3-eip-DON），其中ADH蛋白可氧化DON，形成3-酮基-脱氧雪腐镰刀菌烯醇（3-oxo-DON）；而AKR6D1、AKR13B2蛋白可进一步还原3-oxo-DON，形成目前已知毒性最低的物质3-epi-DON。
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