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公开(公告)号:CN106754724A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611128683.4
申请日:2016-12-09
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: C12N5/061 , C12N15/86 , C12N2502/99 , C12N2740/15041 , C12N2800/107
Abstract: 本发明提供一种永生化的牛精原干细胞系及其构建方法,是以牛精原干细胞作为宿主细胞,通过将pLOX‑Ttag‑iresTK慢病毒表达载体转染牛精原干细胞,该细胞系在体外传代35代以上仍有较好的活力,保持分裂增殖,不发生衰老和凋亡,是一种永生化的细胞系。将其经过诱导后能够具有三胚层分化的潜能及其向精子细胞分化潜能。
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公开(公告)号:CN104404083A
公开(公告)日:2015-03-11
申请号:CN201410706339.3
申请日:2014-11-27
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种促进奶山羊精原干细胞的自我更新和增殖的载体及其应用。所述的载体是包含奶山羊gSirt1基因的真核表达载体,所述的奶山羊gSirt1基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。本发明所构建的真核表达载体实现了在奶山羊精原干细胞中的过表达或超表达,经过RT-PCR、Western blot及细胞周期检测证实,gSirt1基因有助于精原干细胞的自我更新、干性(多能性)维持和细胞增殖。
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公开(公告)号:CN102533777B
公开(公告)日:2014-11-26
申请号:CN201210015005.2
申请日:2012-01-18
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种奶山羊Boule基因及其促雄性生殖细胞减数分裂的应用,该基因(SEQ.ID.NO.1)的CDS序列如SEQ.ID.NO.2所示。基于奶山羊Boule基因序列构建的表达载体,包含SEQ.ID.NO.1所示的Boule基因序列,在Boule基因序列的下游连接荧光标记基因GFP,在GFP的下游连接抗生素筛选基因kanr/neor。奶山羊Boule基因序列转染到雄性生殖细胞中以促进雄性生殖细胞减数分裂的应用。
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公开(公告)号:CN102533778A
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN201210015998.3
申请日:2012-01-18
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种基于Figla基因的超标达促细胞向雌性生殖细胞分化的方法,Figla基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。Figla基因被标记后转染多能性干细胞以促进多能性干细胞向雌性生殖细胞分化或转分化的应用。pDsRed1-N1-Figla转染mESCs后,RFP表达于细胞克隆边缘的分化细胞,而在克隆边缘光滑处未见表达;转染mESCs在传代后成片状生长,大部分不再形成克隆。说明Figla基因促进了mESCs的分化。
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公开(公告)号:CN117327645B
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202311084934.3
申请日:2023-08-25
Applicant: 西安九州医学中心有限公司 , 西北农林科技大学
IPC: C12N5/077 , C12N5/0735
Abstract: 本发明涉及干细胞生物技术领域,公开了一种利用小分子诱导多能性干细胞(PSC)获取心肌细胞的试剂和技术体系。本发明的诱导体系涉及bFGF、RA、XAV939、Activin A、Chir99021、BMP4、FGF 10等小分子以及细胞因子,并以固定比例在不同时期添加,用以诱导扩展多能干细胞(EPSC)和胚胎干细胞(ESC)等向心肌细胞分化。本发明实现多能干细胞向心肌细胞的2D分化,可在20天内获得心肌细胞,为心脏疾病模型构建以及药物筛选提供稳定的研究平台。
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公开(公告)号:CN119391841A
公开(公告)日:2025-02-07
申请号:CN202411530605.1
申请日:2024-10-30
Applicant: 百欧派(天津)生物技术有限公司 , 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6883 , G01N15/14 , G01N15/10 , A61K45/00 , A61K39/395 , A61P39/06 , A61K8/64 , A61Q19/08
Abstract: 本发明涉及生物医学领域,具体涉及一种生物标志物在制备检测个体衰老程度的产品中的用途。生物标志物为DDX24、EML4、IQGAP2、MT‑ATP6、MT‑CYB、MT‑ND1、MT‑ND4、MT‑ND5、PRDX6中任一种或几种的组合。本发明通过对不同年龄动物的单细胞测序、流式细胞术分选和QPCR鉴定获取了9个用于衰老评价的细胞标志物和9个分子标志物,利用上述标志物可快速评估个体衰老水平,填补了衰老检测领域的空白。
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公开(公告)号:CN118166039A
公开(公告)日:2024-06-11
申请号:CN202410490390.9
申请日:2024-04-23
IPC: C12N15/867 , C12N15/12 , A01K67/0275 , C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于转基因山羊制备技术领域,公开了一种慢病毒载体介导生产表达BLOC1S1转基因山羊方法,其特征在于:(1)构建含有BLOC1S1基因的慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞后超速离心,PBS重悬后获得慢病毒浓缩液;(2)对山羊超数排卵后配种,于最后一次配种后12 h冲胚获得受精卵,利用显微操作系统将慢病毒浓缩液注射于受精卵透明带下,胚胎培养液继续培养24 h待发育至2细胞进行输卵管移植;(3)利用设计的跨载体引物PCR和qPCR技术检测转基因效率检测鉴定。采用本发明的方法,成功获得过表达BLOC1S1转基因山羊,转基因效率为63.6%。
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公开(公告)号:CN117165630A
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202311156286.8
申请日:2023-09-08
Applicant: 百欧派(天津)生物技术有限公司 , 西北农林科技大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/12 , C12N5/10 , A61K35/28 , A61P27/02
Abstract: 本发明公开了一种SPARC基因修饰间充质干细胞的设计方法和制备方法及其应用。以人脐带间充质干细胞cDNA为模板,设计扩增引物,通过PCR扩增人SPARC基因CDS区片段,再利用T4连接酶与pCDH‑CMV‑EF1‑copGFP‑T2A‑Puro载体相连,与PAX2、VSVG质粒包装慢病毒,利用慢病毒载体构建间充质干细胞的SPARC稳定过表达细胞株,经验证其表达水平相比对照组上调700倍。进而,本发明将SPARC基因修饰间充质干细胞用于干眼症的治疗。与对照组相比,SPARC基因修饰间充质干细胞具备体外活力强,促增殖愈合能力强,细胞质量高等优势,并在干眼症中具有更强治疗效果。本发明提供了一种稳定的SPARC基因修饰间充质干细胞,为间充质干细胞的临床应用提供了更高效的治疗用细胞株。
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公开(公告)号:CN116836935A
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202310573792.0
申请日:2023-05-19
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/12 , C12Q1/6881 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种获得过表达山羊Nramp1基因细胞株的方法及该种细胞株在抗菌研究中的应用。通过慢病毒表达系统等手段,获得了过表达山羊Nramp1的山羊精原干细胞株(oeNramp1‑mGSCs)和小鼠巨噬细胞株(oeNramp1‑Raw264.7)。检测了过表达效率,经验证oeNramp1‑mGSCs相较于对照组,其Nramp1 mRNA上调120倍,其群体倍增时间显著缩短。除此之外,利用沙门氏菌LPS刺激oeNramp1‑Raw264.7,发现oeNramp1‑Raw264.7能够减少沙门氏菌LPS引起的细胞凋亡率。本发明具有创新性强、安全性好等特点,为后续抗菌研究提供了可靠的技术平台。
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公开(公告)号:CN115820771A
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202211570583.2
申请日:2022-12-08
Applicant: 百欧派(天津)生物技术有限公司 , 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及干细胞活性因子药物制备技术领域,具体为一种犬成体干细胞活性因子及眼膏的制备方法和应用。其开发犬成体干细胞活性因子的应用,延长有效保存时间,提高角膜损伤愈合的速度。本发明方法包括以下操作:1)用α‑MEM完全培养液培养传代从组织中分离的犬脂肪间充质干细胞;2)当细胞生长密度到80~90%度时,收集低传代犬脂肪间充质干细胞培养上清液,将收集的上清液无菌离心,弃沉淀取上清液,上清液超低温‑80℃冻存备用;3)将‑80℃冻存的凝固体通过冷冻干燥机蒸发水分获取干粉,真空压力0.030 mbar、‑88℃、48 h制得的犬成体干细胞活性因子,称重,锡纸包裹。
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