一种I型普鲁兰酶的编码基因及其重组表达和应用

    公开(公告)号:CN102676557A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201210145521.7

    申请日:2012-05-11

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于基因工程和蛋白质工程技术领域,具体为一种I型普鲁兰酶的编码基因,及其重组表达和应用。本发明提供了来源于气单胞菌属的普鲁兰酶新基因,其核苷酸序列如SEQIDNO1所示,记为pluAs。该普鲁兰酶为I型普鲁兰酶,能够降解普鲁兰多糖或淀粉中的α-1,6葡萄糖糖苷键。重组表达该基因的三种具有I型普鲁兰酶活性的DNA片段,该重组普鲁兰酶片段最适pH均为8.0,最适反应温度为60℃;在55℃处理1h,该普鲁兰酶的残余活性达90%左右;在pH7~10的条件下非常稳定。使用重组普鲁兰酶与淀粉糖化酶协同糖化淀粉,能够制备具有更高葡萄糖含量的产物。本发明提供的重组普鲁兰酶可应用于淀粉加工、环保、食品、医疗保健等行业。

    一种法氏囊亚病毒颗粒疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN114058524A

    公开(公告)日:2022-02-18

    申请号:CN202111261154.2

    申请日:2021-10-28

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体为一种法氏囊亚病毒颗粒疫苗及其制备方法。本发明针对鸡传染性法氏囊病毒变异株,采用马克斯克鲁维酵母重组表达法氏囊亚病毒样颗粒的工程菌株,制备得到有效的法氏囊亚病毒样颗粒疫苗。本发明首先提供重组表达病毒亚病毒样颗粒的马克斯克鲁维酵母工程菌株;该重组菌株是将重组表达法氏囊病毒衣壳蛋白载体转化马克斯克鲁维酵母KM‑YDQ1所获得;法氏囊病毒亚病毒样颗粒疫苗以马克斯克鲁维酵母重组工程菌株经培养发酵、分离纯化获得的法氏囊亚病毒样颗粒作为活性成分。雏鸡免疫法氏囊亚病毒颗粒疫苗,对法氏囊病毒变异株FJ‑18株及经典强毒株BC6/85的保护效力均达到100%。

    一种利用马克斯克鲁维酵母酿造水果西打的方法

    公开(公告)号:CN112251311A

    公开(公告)日:2021-01-22

    申请号:CN202010979266.0

    申请日:2020-09-17

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于酿酒技术领域,具体为一种利用马克斯克鲁维酵母酿造水果西打的方法。本发明采用马克斯克鲁维酵母Fim‑1作为发酵菌种;具体步骤包括:取果汁,调节果汁糖度为13‑16°Bx;加入20‑100ppm的焦亚硫酸钾,搅拌溶解;接入马克斯克鲁维酵母Fim‑1菌种,进行果汁的液态发酵;发酵液过滤澄清,然后充二氧化碳,罐装;巴氏杀菌,得到果西打酒产品。所述水果包括苹果、梨、桃子、李子、木瓜、西瓜等。本发明方法发酵时间较短,绿色天然,无添加剂;产品色泽透亮,澄清度高,口感清爽,经发酵后果汁中果酸和柠檬酸被转化为更柔和的乳酸,氨基酸的含量更高,高级醇的含量更低;是一种营养丰富、果香味浓、入口绵软的水果西打。

    阿魏酸酯酶的重组表达菌株、制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN111592990A

    公开(公告)日:2020-08-28

    申请号:CN202010212115.2

    申请日:2020-03-24

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 吕红 周峻岗 余垚

    Abstract: 本发明提供了一株可用于制备阿魏酸酯酶AnfaeA的马克斯克鲁维酵母重组菌株,其通过将序列优化后的黑曲霉阿魏酸酯酶AnfaeA基因克隆到表达载体上并转化马克斯克鲁维酵母宿主菌株构建所得,该重组菌株经高密度发酵阿魏酸酯酶的产量达12,0000U/ml。本发明还提供了一种利用阿魏酸酯酶水解玉米芯粉制备阿魏酸的方法,利用前述重组菌株制得的阿魏酸酯酶AnfaeA和木聚糖酶的协同作用,可高效水解玉米芯粉获得阿魏酸。本发明提供的阿魏酸酯酶可应用农业副产物玉米芯、米糠和玉米皮等生物降解制备阿魏酸、p-香豆酸等酚类物质,因此在食品、造纸、饲料、医药等领域都具有广泛的应用价值,同时,制备方法工艺简单、产量高,十分适合于大规模生产。

    马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株及无痕基因组改造方法

    公开(公告)号:CN105112313B

    公开(公告)日:2019-04-05

    申请号:CN201510540029.3

    申请日:2015-08-28

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明提供了一种基因改造的马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株以及用于菌株改造的无痕基因改造方法,所述马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株是马克思克鲁维酵母菌株CGMCC No.10621敲除全部或部分营养基因之后的菌株;所述无痕基因改造方法包括:敲除马克思克鲁维酵母菌CGMCC No.10621至少部分营养缺陷型基因,使其形成营养缺陷型菌株。CGMCC No.10621具有高的分泌蛋白的能力和高的生物量、以及发酵时间短等特征;本发明方法所构建的营养缺陷型马克思克鲁维酵母菌株,可以用于马克思克鲁维酵母表达系统的宿主菌,用于重组制备外源蛋白(酶)。另外,本发明提供的优选的第二基因敲除方法,标签基因序列能够回收利用。

    一种完全降解赤霉烯酮的微杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN104946555A

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201510220300.5

    申请日:2015-05-04

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于微生物技术领域,具体为一种完全降解赤霉烯酮的微杆菌及其应用。本发明发现一株微杆菌可以降解赤霉烯酮,命名为Microbacteriumsp. FY1538。该微杆菌属于微杆菌属(Microbacterium sp.),分离自青藏高原青海湖边的草皮(N36.34.243E100.32.285)。Microbacteriumsp. FY1538在LB培养基中培养,添加终浓度10ul/ml的甲醇,培养基pH7.4,培养温度30℃,摇瓶震荡培养48h,转速220rpm,发酵上清液具有完全降解赤霉烯酮的能力。本发明提供的微杆菌可应用于玉米等发霉农作物的脱毒。

    一种利用鹰嘴豆胞克鲁维酵母表达系统大规模制备外源蛋白的发酵工艺

    公开(公告)号:CN101781670B

    公开(公告)日:2012-09-05

    申请号:CN200910045395.6

    申请日:2009-01-15

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域,是利用含有外源蛋白编码序列的鹰嘴豆孢克鲁维酵母基因工程菌高效制备外源蛋白的发酵工艺。发酵时,取上述基因工程菌株发酵2-6天,然后去除菌体,即得;发酵液初始菌浓度OD值为0.4-0.6,在发酵过程中维持葡萄糖浓度为0.5-1%;在发酵过程的12h-18h连续补加12%酵母粉,补加酵母粉的总量为发酵体积的3-5%(质量体积比);发酵过程中调节发酵液pH值为5.0-5.5。用本发明方法可以大规模制备外源蛋白,蛋白活性高,发酵产量高,发酵周期短,发酵成本低,适用于推广至大规模工业化生产。

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