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公开(公告)号:CN111793718A
公开(公告)日:2020-10-20
申请号:CN202010632449.5
申请日:2020-07-02
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种鉴别鸭腺病毒1型、鸭腺病毒2型和鸭腺病毒3型的PCR-HRM引物和方法。本发明首次建立了一种可快速区分鸭腺病毒1型、鸭腺病毒2型和鸭腺病毒3型的PCR-HRM检测方法,操作简单,高通量,显著缩短了鸭腺病毒1型、鸭腺病毒2型和鸭腺病毒3型鉴别与检测所需时间;同时本发明的检测方法准确度高、特异性好、灵敏度高,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN108949619A
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201810710104.X
申请日:2018-07-02
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12N1/20
Abstract: 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌的发酵工艺,包括以下步骤:首先制备合格的鸭疫里默氏杆菌生产种子,然后接种在培养基中用发酵罐培养,控制溶解氧值为10~40%,发酵罐培养转速100~200 r/min,发酵7~8小时。本发酵工艺在发酵8小时活菌数达到高峰,收获时每ml菌液含活菌数≥1.0×1010CFU,4℃放置2天菌液的存活率较高,均≥75%。本发酵工艺发酵培养密度高、效率高、重复性好、可操作性好、有很大的推广价值,可有效提高抗原产量和培养基的利用率,缩短生产周期,降低生产成本,减少劳动强度,提高生产效率,为鸭疫里默杆菌弱毒疫苗生产提供了一种有效可行的抗原制备工艺,为研制高效疫苗打好基础。
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公开(公告)号:CN105907890A
公开(公告)日:2016-08-31
申请号:CN201610296854.8
申请日:2016-05-05
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗GDr180株与野毒株的引物、探针及方法。该方法结合了实时荧光定量PCR技术及熔解曲线分析技术,根据熔解曲线Tm值差异鉴定GDr180株与野毒株;操作简单:只需在PCR反应之前加探针即可;检测速度快且高通量:全部操作过程只需3小时,极大缩短了分型所需时间;费用相对较低:只需要一条普通探针即可达到鉴别检测的目地;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN105838826A
公开(公告)日:2016-08-10
申请号:CN201610296557.3
申请日:2016-05-05
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒疫苗株与野毒株的双色荧光PCR引物、探针及方法。该方法结合了实时荧光PCR技术及熔解曲线分析技术,根据熔解曲线峰型及Tm值差异鉴定犬细小病毒疫苗与野毒株;操作简单:只需一个反应即可实现三种基因型野毒株及两种疫苗与的鉴别检测;检测速度快且高通量:全部操作过程不需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了病毒三种不同基因型及两种疫苗与野毒株的鉴别检测所需时间;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN104195265B
公开(公告)日:2016-04-20
申请号:CN201410419410.X
申请日:2014-08-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒野毒株与疫苗株的PCR-HRM引物和方法。该方法为先从样品中提取病毒DNA作为模板,利用所设计的2对特异性引物和荧光饱和染料进行PCR扩增,并分别以野毒株和疫苗株标准品作为对照对检测样品进行HRM分析,确定犬细小病毒的类型。本发明操作简单,只需PCR反应前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量,全部操作过程只需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了区分检测所需时间;费用低,不需要特异性探针,荧光饱和染料廉价易得;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN104894292A
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201510124338.2
申请日:2015-03-19
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒和H9亚型禽流感病毒的三重荧光定量PCR检测引物、试剂盒及方法。所述针对鸭坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒、H9亚型禽流感病毒的检测引物分别如SEQ?ID?NO.1-6所示。本发明的检测引物及试剂盒可以同时检测EDSV、H9?AIV和DTMUV,且不与鸭瘟病毒、鹅细小病毒、番鸭细小病毒和大肠杆菌基因组DNA以及鸭甲肝病毒1型、鸭甲肝病毒3型、番鸭呼肠孤病毒和新城疫病毒的RNA发生交叉反应,对EDSV、H9?AIV和DTMUV核酸的检测下限分别为8.0、4.8和1.3个拷贝,可以用于EDSV、H9?AIV和DTMUV的定性和定量检测。
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公开(公告)号:CN103866048A
公开(公告)日:2014-06-18
申请号:CN201410069519.5
申请日:2014-02-27
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2531/113 , C12Q2527/107
Abstract: 本发明公开了一种番鸭细小病毒和鹅细小病毒的HRM鉴别方法、试剂盒和引物组,所述检测方法包括如下步骤:(1)设计一组可同时扩增番鸭细小病毒和鹅细小病毒的通用PCR引物;(2)从待测样品中提取病毒基因组DNA作为模板DNA;(3)利用步骤(1)的引物组对模板DNA进行PCR扩增;(4)对扩增产物进行HRM分析,鉴别MDPV和GPV。本发明方法:可快速、有效鉴别MDPV和GPV;检测速度快且高通量:5~10分钟即可完成96/384孔板的PCR产物检测,极大缩短了检测时间;对PCR产物无损害,检测后还可以进行后续分析,如测序和凝胶电泳等。
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公开(公告)号:CN119320444A
公开(公告)日:2025-01-17
申请号:CN202411531537.0
申请日:2024-10-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C07K14/54 , C12N15/70 , C12N1/06 , C12N1/21 , C12N15/24 , C07K1/14 , C07K1/30 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , A61P37/04 , A61K38/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及生物医药领域,具体而言,涉及一种鸡IL‑17A重组蛋白的制备方法及其在激活细胞炎症反应中的应用。本发明通过构建重组质粒,以热应激法将该载体转化至大肠杆菌BL21感受态细胞内,利用IPTG诱导表达,将包涵体洗涤、溶解、变性、复性后,通过纯化得到重组蛋白IL‑17A蛋白。本发明制备的重组IL‑17A蛋白能够刺激鸡骨源单个核细胞,导致炎症因子IL‑1β、IL‑6、TNF‑α的上调。本发明纯化的重组蛋白IL‑17A具备生物学活性,可以作为免疫增强剂,为禽类提供免疫保护。
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公开(公告)号:CN118480512B
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410928778.2
申请日:2024-07-11
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种A3Z2基因敲除的ST细胞株的构建方法,采用慢病毒感染ST细胞株,经筛选得到A3Z2基因敲除的ST细胞株;所述ST细胞株为能表达Cas9蛋白的ST细胞株;所述慢病毒为用于敲除ST细胞株的A3Z2基因的慢病毒。流式细胞术分析发现,与ST细胞株(ST‑WT)相比,敲除A3Z2基因的ST细胞株(ST‑A3Z2‑KO),处于G1期的细胞数量明显增多;当PDCoV感染ST‑A3Z2‑KO细胞后,该细胞株中处于G1期的细胞数量明显减少;由此可见,PDCoV可以利用细胞G1期的有利条件进行高效增殖。因此,该发现不仅仅可以应用于PDCoV的增殖,对于其他病毒的增殖也是有着积极意义的。同时,本发明还提供细胞系的构建方法以及用途。
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公开(公告)号:CN115786175B
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202211210167.1
申请日:2022-09-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一株粘膜乳杆菌(Limosilactobacillus mucosae),其特征在于,保藏编号为:GDMCC NO:62541;保藏日期:2022年06月13日,保藏单位:广东省微生物菌种保藏中心,地址:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。该菌株可以提高猪对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的抵抗效果,该菌株在I型干扰素IFN‑α,IFN‑β等因子的调节方面以及在III型干扰素IFN‑λ1,IFN‑λ3基因的调节方面具有较好的功能,特定浓度的菌株针对抗病毒蛋白基因MX1、MX2、OAS1和ZAP的调节具有差异化和特异性。同时,本发明还提供了该菌的用途。(56)对比文件S Roos, F Karner et al.Lactobacillusmucosae sp. nov., a new species with invitro mucus-binding activity isolatedfrom pig intestine《.Int J Syst EvolMicrobiol》.2000,第251-258页.Repally Ayyanna et al.Anti-inflammatory and Antioxidant Propertiesof Probiotic Bacterium Lactobacillusmucosae AN1 and Lactobacillus fermentumSNR1 in Wistar Albino Rats《.FrontMicrobiol》.2018,第1-13页.姜绍通 等.粘膜乳杆菌发酵乳清生产L-乳酸的研究《.食品科学》.2007,第162-165页.
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