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公开(公告)号:CN103757041A
公开(公告)日:2014-04-30
申请号:CN201310750013.6
申请日:2013-12-31
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种制备猪源干扰素-λ3(IFN-λ3)蛋白的方法和应用,属于基因工程产品制备领域。包括编码猪源干扰素-λ3基因的克隆,含不包括信号肽序列的猪源干扰素-λ3基因的原核表达载体的构建,用所述含猪源干扰素-λ3基因的重组原核表达载体转化大肠杆菌和诱导表达,最佳诱导温度、时间和IPTG浓度分别为诱导温度20℃,时间16h,IPTG浓度0.4mM。通过本方法制备的产品为研究猪源干扰素-λ3生物活性及其作用机理提供了基础,也可在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中应用。
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公开(公告)号:CN103320535B
公开(公告)日:2014-11-26
申请号:CN201310265390.0
申请日:2013-06-27
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种鉴别猪瘟病毒野毒株与疫苗株的方法。本发明在两者共同的保守区域设计了用于鉴别猪瘟野毒株与疫苗弱毒株的专用引物,其特异性好,能够很好的扩增出野毒株与疫苗弱毒株,结合RT-PCR与HRM技术,能够明显的区分野毒株与疫苗毒株。本发明方法是一种简便、快捷、实用的鉴别猪瘟病毒野毒株与疫苗株的新型技术。
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公开(公告)号:CN104195265B
公开(公告)日:2016-04-20
申请号:CN201410419410.X
申请日:2014-08-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒野毒株与疫苗株的PCR-HRM引物和方法。该方法为先从样品中提取病毒DNA作为模板,利用所设计的2对特异性引物和荧光饱和染料进行PCR扩增,并分别以野毒株和疫苗株标准品作为对照对检测样品进行HRM分析,确定犬细小病毒的类型。本发明操作简单,只需PCR反应前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量,全部操作过程只需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了区分检测所需时间;费用低,不需要特异性探针,荧光饱和染料廉价易得;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN103757041B
公开(公告)日:2015-08-12
申请号:CN201310750013.6
申请日:2013-12-31
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种制备猪源干扰素-λ3(IFN-λ3)蛋白的方法和应用,属于基因工程产品制备领域。包括编码猪源干扰素-λ3基因的克隆,含不包括信号肽序列的猪源干扰素-λ3基因的原核表达载体的构建,用所述含猪源干扰素-λ3基因的重组原核表达载体转化大肠杆菌和诱导表达,最佳诱导温度、时间和IPTG浓度分别为诱导温度20℃,时间16h,IPTG浓度0.4mM。通过本方法制备的产品为研究猪源干扰素-λ3生物活性及其作用机理提供了基础,也可在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中应用。
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公开(公告)号:CN104195265A
公开(公告)日:2014-12-10
申请号:CN201410419410.X
申请日:2014-08-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒野毒株与疫苗株的PCR-HRM引物和方法。该方法为先从样品中提取病毒DNA作为模板,利用所设计的2对特异性引物和荧光饱和染料进行PCR扩增,并分别以野毒株和疫苗株标准品作为对照对检测样品进行HRM分析,确定犬细小病毒的类型。本发明操作简单,只需PCR反应前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量,全部操作过程只需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了区分检测所需时间;费用低,不需要特异性探针,荧光饱和染料廉价易得;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN104004857A
公开(公告)日:2014-08-27
申请号:CN201410229142.5
申请日:2014-05-27
Applicant: 广州博至生物科技有限公司 , 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2531/113 , C12Q2527/107 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种快速区分不同基因型犬细小病毒的PCR-HRM引物和方法,该方法为先从样品中提取病毒DNA;以病毒DNA为模板,利用所设计的特异性引物对和荧光饱和染料进行扩增反应获得扩增产物;最后对扩增产物进行HRM分析,确定犬细小病毒的基因型。本发明操作简单,只需PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量:全部操作过程只需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了分型所需时间;费用低,不需要特异性探针,每个样品的饱和染料成本为1.6RMB;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN103320535A
公开(公告)日:2013-09-25
申请号:CN201310265390.0
申请日:2013-06-27
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种鉴别猪瘟病毒野毒株与疫苗株的方法。本发明在两者共同的保守区域设计了用于鉴别猪瘟野毒株与疫苗弱毒株的专用引物,其特异性好,能够很好的扩增出野毒株与疫苗弱毒株,结合RT-PCR与HRM技术,能够明显的区分野毒株与疫苗毒株。本发明方法是一种简便、快捷、实用的鉴别猪瘟病毒野毒株与疫苗株的新型技术。
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公开(公告)号:CN104004857B
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201410229142.5
申请日:2014-05-27
Applicant: 广州博至生物科技有限公司 , 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分不同基因型犬细小病毒的PCR-HRM引物和方法,该方法为先从样品中提取病毒DNA;以病毒DNA为模板,利用所设计的特异性引物对和荧光饱和染料进行扩增反应获得扩增产物;最后对扩增产物进行HRM分析,确定犬细小病毒的基因型。本发明操作简单,只需PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量:全部操作过程只需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了分型所需时间;费用低,不需要特异性探针,每个样品的饱和染料成本为1.6RMB;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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