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公开(公告)号:CN106632621B
公开(公告)日:2019-11-22
申请号:CN201611139299.4
申请日:2016-12-12
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/01 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白及应用。该SRP截断重组蛋白能够与血清1型RA多克隆抗体产生特异性反应,可作为血清1型RA抗体检测的理想抗原。本发明的制备得到的RA血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白非全细菌,不存在散毒的危险,并且该蛋白原核表达时的可溶性增加,可有效降低下游大规模生产成本,适于工业化大规模生产,亦利于实验室疫苗研究。
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公开(公告)号:CN106632621A
公开(公告)日:2017-05-10
申请号:CN201611139299.4
申请日:2016-12-12
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/01 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白及应用。该SRP截断重组蛋白能够与血清1型RA多克隆抗体产生特异性反应,可作为血清1型RA抗体检测的理想抗原。本发明的制备得到的RA血清1型铁载体受体蛋白SRP的截断重组蛋白非全细菌,不存在散毒的危险,并且该蛋白原核表达时的可溶性增加,可有效降低下游大规模生产成本,适于工业化大规模生产,亦利于实验室疫苗研究。
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公开(公告)号:CN105132462A
公开(公告)日:2015-12-09
申请号:CN201510570155.3
申请日:2015-09-09
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N15/863
Abstract: 本发明公开了一种番鸭细小病毒VP3基因重组鸡痘病毒转移载体及其构建方法。以鸡痘病毒基因组为模板扩增TK基因的同源重组臂TKL、TKR,并将其连接成带有多克隆位点MCS的TK片段,再连入骨架质粒,得质粒pTK;合成反向串联表达盒S,并将其插入质粒pTK中,得质粒pTKS;在早期启动子P7.5后的MCS1处插入VP3基因,晚期启动子P11后的MCS2处插入EGFP BGH pA,即得目的转移载体pTKS-VP3-EGFP。将pTKS-VP3-EGFP转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞后,经RT-PCR和荧光蛋白检测VP3能够正常表达。本发明为进一步研制安全、高效的MDPV重组鸡痘病毒疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号:CN103614370A
公开(公告)日:2014-03-05
申请号:CN201310561323.3
申请日:2013-11-12
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速提取鸭疫里默氏杆菌基因组DNA的方法及试剂盒。该方法包括如下步骤:1)菌体裂解,2)沉淀菌体蛋白,3)去除菌体蛋白,4)沉淀基因组DNA,5)去离子,6)溶解DNA。其中步骤1)所用到的菌体裂解缓冲液含有:38~42mMTris-acetatepH7.8,18~22mMsodium-acetate,0.8~1.2mMEDTA,0.8~1.2%SDS。本发明方法提取获得的鸭疫里默氏杆菌基因组DNA,不仅提取效率高,而且基因组DNA的纯度高,为后续分子生物学的研究奠定了坚实基础,且操作简单可行,实用性强。
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公开(公告)号:CN105132462B
公开(公告)日:2019-03-26
申请号:CN201510570155.3
申请日:2015-09-09
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N15/863
Abstract: 本发明公开了一种番鸭细小病毒VP3基因重组鸡痘病毒转移载体及其构建方法。以鸡痘病毒基因组为模板扩增TK基因的同源重组臂TKL、TKR,并将其连接成带有多克隆位点MCS的TK片段,再连入骨架质粒,得质粒pTK;合成反向串联表达盒S,并将其插入质粒pTK中,得质粒pTKS;在早期启动子P7.5后的MCS1处插入VP3基因,晚期启动子P11后的MCS2处插入EGFP BGH pA,即得目的转移载体pTKS‑VP3‑EGFP。将pTKS‑VP3‑EGFP转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞后,经RT‑PCR和荧光蛋白检测VP3能够正常表达。本发明为进一步研制安全、高效的MDPV重组鸡痘病毒疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号:CN104894292B
公开(公告)日:2017-11-14
申请号:CN201510124338.2
申请日:2015-03-19
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒和H9亚型禽流感病毒的三重荧光定量PCR检测引物、试剂盒及方法。所述针对鸭坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒、H9亚型禽流感病毒的检测引物分别如SEQ ID NO.1‑6所示。本发明的检测引物及试剂盒可以同时检测EDSV、H9 AIV和DTMUV,且不与鸭瘟病毒、鹅细小病毒、番鸭细小病毒和大肠杆菌基因组DNA以及鸭甲肝病毒1型、鸭甲肝病毒3型、番鸭呼肠孤病毒和新城疫病毒的RNA发生交叉反应,对EDSV、H9 AIV和DTMUV核酸的检测下限分别为8.0、4.8和1.3个拷贝,可以用于EDSV、H9 AIV和DTMUV的定性和定量检测。
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公开(公告)号:CN106518991A
公开(公告)日:2017-03-22
申请号:CN201611140908.8
申请日:2016-12-12
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N1/21 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP及其编码基因,利用其SRP编码基因构建的缺失SRP基因的突变菌株在限铁环境中生长速度明显晚于野生型鸭疫里默氏杆菌,并且该缺失SRP基因的突变菌株具有降低RA毒力的作用,因此,有望通过对SRP蛋白或基因的进一步改造获得低毒株,在鸭疫里默氏杆菌的防控方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN106518991B
公开(公告)日:2019-12-24
申请号:CN201611140908.8
申请日:2016-12-12
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N1/21 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌血清1型铁载体受体蛋白SRP及其编码基因,利用其SRP编码基因构建的缺失SRP基因的突变菌株在限铁环境中生长速度明显晚于野生型鸭疫里默氏杆菌,并且该缺失SRP基因的突变菌株具有降低RA毒力的作用,因此,有望通过对SRP蛋白或基因的进一步改造获得低毒株,在鸭疫里默氏杆菌的防控方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN104894292A
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201510124338.2
申请日:2015-03-19
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒和H9亚型禽流感病毒的三重荧光定量PCR检测引物、试剂盒及方法。所述针对鸭坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒、H9亚型禽流感病毒的检测引物分别如SEQ?ID?NO.1-6所示。本发明的检测引物及试剂盒可以同时检测EDSV、H9?AIV和DTMUV,且不与鸭瘟病毒、鹅细小病毒、番鸭细小病毒和大肠杆菌基因组DNA以及鸭甲肝病毒1型、鸭甲肝病毒3型、番鸭呼肠孤病毒和新城疫病毒的RNA发生交叉反应,对EDSV、H9?AIV和DTMUV核酸的检测下限分别为8.0、4.8和1.3个拷贝,可以用于EDSV、H9?AIV和DTMUV的定性和定量检测。
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