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公开(公告)号:CN118480512B
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410928778.2
申请日:2024-07-11
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种A3Z2基因敲除的ST细胞株的构建方法,采用慢病毒感染ST细胞株,经筛选得到A3Z2基因敲除的ST细胞株;所述ST细胞株为能表达Cas9蛋白的ST细胞株;所述慢病毒为用于敲除ST细胞株的A3Z2基因的慢病毒。流式细胞术分析发现,与ST细胞株(ST‑WT)相比,敲除A3Z2基因的ST细胞株(ST‑A3Z2‑KO),处于G1期的细胞数量明显增多;当PDCoV感染ST‑A3Z2‑KO细胞后,该细胞株中处于G1期的细胞数量明显减少;由此可见,PDCoV可以利用细胞G1期的有利条件进行高效增殖。因此,该发现不仅仅可以应用于PDCoV的增殖,对于其他病毒的增殖也是有着积极意义的。同时,本发明还提供细胞系的构建方法以及用途。
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公开(公告)号:CN118480512A
公开(公告)日:2024-08-13
申请号:CN202410928778.2
申请日:2024-07-11
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种A3Z2基因敲除的ST细胞株的构建方法,采用慢病毒感染ST细胞株,经筛选得到A3Z2基因敲除的ST细胞株;所述ST细胞株为能表达Cas9蛋白的ST细胞株;所述慢病毒为用于敲除ST细胞株的A3Z2基因的慢病毒。流式细胞术分析发现,与ST细胞株(ST‑WT)相比,敲除A3Z2基因的ST细胞株(ST‑A3Z2‑KO),处于G1期的细胞数量明显增多;当PDCoV感染ST‑A3Z2‑KO细胞后,该细胞株中处于G1期的细胞数量明显减少;由此可见,PDCoV可以利用细胞G1期的有利条件进行高效增殖。因此,该发现不仅仅可以应用于PDCoV的增殖,对于其他病毒的增殖也是有着积极意义的。同时,本发明还提供细胞系的构建方法以及用途。
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公开(公告)号:CN118112242A
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202410515065.3
申请日:2024-04-26
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 广东永顺生物制药股份有限公司
IPC: G01N33/569 , C07K14/165 , C12N15/70 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物领域,具体涉及一种采用如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的猪德尔塔冠状病毒重组N蛋白制备间接ELISA检测试剂盒的用途。通过选择该N蛋白用于间接ELISA检测方法检测母乳中猪德尔塔冠状病毒感染后诱导的IgA抗体,可以显著的提高灵敏度,经过实验验证,该蛋白同时具有优异的特异性。同时,本发明还提供了该基于该蛋白的间接ELISA检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN118006687A
公开(公告)日:2024-05-10
申请号:CN202311670565.6
申请日:2023-12-07
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒重组病毒的制备方法和应用,涉及生物技术领域,其技术方案要点是:以毒株G2型猪流行性腹泻病毒株PEDV HDDJ作为亲本病毒,G2型猪流行性腹泻病毒株PEDV HDDJ的核衣壳蛋白基因进行部分核苷酸缺失,获得一株安全性高的减毒猪流行性腹泻病毒候选疫苗株rHDDJ‑△N;所述的减毒猪流行性腹泻重组病毒株毒力显著致弱,高剂量不产生发病和致死现象,且保留了猪流行性腹泻病毒主要抗原表位,用此减毒猪流行性腹泻毒株免疫后,猪对亲本毒株PEDV HDDJ具有较好的保护作用,作为预防猪流行性腹泻的疫苗候选株,具有极大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN116042917A
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202211253507.9
申请日:2022-10-13
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 广东省农业科学院农业生物基因研究中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种检测猪流行性腹泻、传染性胃肠炎和丁型冠状病毒的三重RT‑PCR引物组及其应用,属于生化检测技术领域。本发明的检测试剂盒,能够实现一个PCR反应管中同时检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪丁型冠状病毒,并具有较好的特异性、敏感性和重复性,可直接应用于猪临床腹泻样品病原的实验室诊断,为猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪丁型冠状病毒的流行病学研究及临床鉴别诊断提供了一种快速、准确的检测方法,特别适用于科研及临床应用,具有很好的商业应用价值。
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公开(公告)号:CN110241259B
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN201910540545.4
申请日:2019-06-21
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分鹅1型星状病毒和鹅2型星状病毒的HRM检测方法及其引物,本发明操作简单,只需要一对通用引物,在PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量,缩短了分型所需时间;不需要特异性荧光标记探针;特异性强、准确性高,可以快速、准确、高通量地对样品进行分析,有利于在临床实践中推广应用,具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN113981149A
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202111395888.X
申请日:2021-11-23
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种猪δ冠状病毒检测引物组和探针、试剂盒及应用,属于生物技术领域。所述检测引物组和探针,包含核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1‑5所示的FIP、BIP、F3、B3和LoopF组成的引物组以及如SEQ ID NO:6所示的探针probe。本发明在该探针相应位点设计可与靶基因相结合的RNA碱基,当两者特异互补结合时,激活RNase H2酶发生切割,报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,产生荧光信号;当不发生特异结合时不产生荧光信号;在此反应机理上,所设计的引物组和探针可以实现高特异性、高敏感性的快速定量的检测猪δ冠状病毒。
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公开(公告)号:CN105838826B
公开(公告)日:2019-12-24
申请号:CN201610296557.3
申请日:2016-05-05
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒疫苗株与野毒株的双色荧光PCR引物、探针及方法。该方法结合了实时荧光PCR技术及熔解曲线分析技术,根据熔解曲线峰型及Tm值差异鉴定犬细小病毒疫苗与野毒株;操作简单:只需一个反应即可实现三种基因型野毒株及两种疫苗与的鉴别检测;检测速度快且高通量:全部操作过程不需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了病毒三种不同基因型及两种疫苗与野毒株的鉴别检测所需时间;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN105755174A
公开(公告)日:2016-07-13
申请号:CN201610218996.2
申请日:2016-04-08
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2563/107 , C12Q2527/107
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定H7N9禽流感病毒的HRM检测方法及其引物组,该方法同样适合于H7亚型禽流感病毒和N9亚型禽流感病毒的检测。该方法操作简单:只需在PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量:全部操作过程只需2?3小时,极大缩短了分型所需时间;费用低,不需要特异性荧光标记探针,每个样品的饱和染料成本为1.6 RMB;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床检测中推广应用。
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公开(公告)号:CN105331740A
公开(公告)日:2016-02-17
申请号:CN201510770565.2
申请日:2015-11-12
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/706 , C12Q1/686 , C12Q2527/107 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种快速区分鸭甲肝病毒1型和3型的PCR-HRM引物和方法,该方法首先构建了DHAV-1和DHAV-3相应目的片段的质粒样品作为阳性质粒,然后从样品中提取病毒RNA并反转录为cDNA,再以cDNA为模板,利用所设计的特异性引物对cDNA进行PCR-HRM扩增;对扩增产物进行HRM分析,确定病毒类型。本发明操作简单,只需在普通PCR反应之前加入荧光饱和染料;检测快速且高通量,整个操作过程需约3.5小时,即可完成96/384孔板的PCR产物检测,极大缩短了检测时间;费用低,不需要多条引物和特异性探针;敏感性高、特异性和重复性好,有利于在临床上的推广应用。
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