一种单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法

    公开(公告)号:CN103911432B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410076295.0

    申请日:2014-03-04

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法。涉及一种核酸适体筛选技术,建立快速、高效的单克隆表面展示核酸适体筛选新方法。所述方法包括如下步骤:(1)将氨基修饰的正向引物通过NHS-氨基反应偶联到NHS修饰的微球表面;(2)将寡核苷酸文库通过液滴单分子微乳PCR以单克隆的形式扩增到偶联有正向引物的微球表面,每个微球上仅展示一种核酸序列;(3)通过单克隆微球库与靶标相关作用,可视化地考察表面展示序列与靶标的结合程度;(4)直接挑选获得能和靶标分子结合的单克隆微球,获取微球上的DNA序列,即可获得高质量核酸适体。该方法快速、高效、经济,实现了分子识别可视化监测,并可在无需克隆、测序、合成的条件下实现了富集库中核酸适体的快速筛选,获得选择性好、亲和力强的核酸适体。

    聚甲基丙烯酸缩水甘油微球的合成及表面改性方法

    公开(公告)号:CN105294899A

    公开(公告)日:2016-02-03

    申请号:CN201510831446.3

    申请日:2015-11-25

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 聚甲基丙烯酸缩水甘油微球的合成及表面改性方法,涉及一种固相载体表面改性方法。1)将聚乙烯吡咯烷酮、偶氮二异丁腈、单体GMA加入装有乙醇和水混合溶剂的容器中,抽真空,充氮气,回流反应后,得乳白色液体;2)将步骤1)所得乳白色液体离心洗涤,干燥后,得呈白色固体粉末的PGMA微球;3)将步骤2)所得PGMA微球加入乙二胺和去离子水中回流反应,离心洗涤,干燥,得呈白色固体粉末的PGMA-NH2微球;4)将步骤3)所得PGMA-NH2微球加入两性离子羧基甜菜碱的甲醇溶剂中反应,离心洗涤,干燥,即得呈固体粉末的聚甲基丙烯酸缩水甘油微球。分散性好,反应条件温和,对微球的形貌影响较小,操作简便,反应成本低廉。

    上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAMB及其制备方法

    公开(公告)号:CN103387990B

    公开(公告)日:2016-01-06

    申请号:CN201310328301.2

    申请日:2012-09-24

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAM B及其制备方法,涉及一种核酸。提供具有高特异性和高亲和力的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法与应用。所述上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体具有G四聚体结构或者茎环结构,制备方法包括:设计并合成单链DNA随机寡核苷酸库,筛选目的寡核苷酸序列,并通过流式分析法鉴定其与靶蛋白结合的特异性和亲和力。筛选获得的核酸适体无毒性,分子量小,渗透性好,易于合成与标记,只特异性识别EpCAM蛋白,并且特异性识别表达EpCAM蛋白的细胞系,对不表达此蛋白的细胞系不具有识别功能。

    上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAMCcut及其制备方法

    公开(公告)号:CN103387988B

    公开(公告)日:2016-01-06

    申请号:CN201310328256.0

    申请日:2012-09-24

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 上皮细胞粘附分子的核酸适体EpCAM Ccut及其制备方法,涉及一种核酸。提供具有高特异性和高亲和力的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法与应用。所述上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体具有G四聚体结构或者茎环结构,制备方法包括:设计并合成单链DNA随机寡核苷酸库,筛选目的寡核苷酸序列,并通过流式分析法鉴定其与靶蛋白结合的特异性和亲和力。筛选获得的核酸适体无毒性,分子量小,渗透性好,易于合成与标记,只特异性识别EpCAM蛋白,并且特异性识别表达EpCAM蛋白的细胞系,对不表达此蛋白的细胞系不具有识别功能。

    一种金纳米棒上快速修饰HS-DNA的方法

    公开(公告)号:CN104759620A

    公开(公告)日:2015-07-08

    申请号:CN201510193295.3

    申请日:2015-04-22

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种在金纳米棒上快速修饰HS-DNA的方法。所述方法包括如下步骤:(1)在CTAB存在下,通过种子生长的方法合成CTAB双分子层稳定的金纳米棒;(2)通过离心再用mPEG-SH和Tween20混合液重悬的方法取代金纳米棒表面的CTAB分子,在金纳米棒上修饰上mPEG-SH和Tween20;(3)向修饰有mPEG-SH和Tween20的金纳米棒溶液中加入HS-DNA和高浓度的酸或盐,20-40℃老化1小时;(4)通过离心再用缓冲液重悬去除游离的HS-DNA就能够获得修饰有HS-DNA的金纳米棒。该方法快速、高效、经济,使金纳米棒具有很高的稳定性,避免了缓慢增加盐浓度的老化过程,使金纳米棒上修饰HS-DNA的修饰步骤简化、修饰时间缩短。

    上皮细胞粘附分子的核酸适体及其制备方法

    公开(公告)号:CN102827845A

    公开(公告)日:2012-12-19

    申请号:CN201210362899.2

    申请日:2012-09-24

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 上皮细胞粘附分子的核酸适体及其制备方法,涉及一种核酸。提供具有高特异性和高亲和力的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法与应用。所述上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体具有G四聚体结构或者茎环结构,制备方法包括:设计并合成单链DNA随机寡核苷酸库,筛选目的寡核苷酸序列,并通过流式分析法鉴定其与靶蛋白结合的特异性和亲和力。筛选获得的核酸适体无毒性,分子量小,渗透性好,易于合成与标记,只特异性识别EpCAM蛋白,并且特异性识别表达EpCAM蛋白的细胞系,对不表达此蛋白的细胞系不具有识别功能。

    一种单克隆抗体的筛选方法

    公开(公告)号:CN115109149B

    公开(公告)日:2024-08-09

    申请号:CN202210703885.6

    申请日:2022-06-21

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种单克隆抗体的筛选方法。该方法包括:采用各个不同的第一核酸分子标识符和各个不同的第二核酸分子标识符并基于交叉定位标识法,对微孔芯片中的各个微孔进行编码,从而得到所述微孔芯片中的各个微孔的位置编码信息;基于所述微孔芯片中的各个微孔的位置编码信息对单克隆抗体进行筛选。该筛选方法可以降低操作难度和筛选成本,还可以大大提高实验通量。

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