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公开(公告)号：CN116338037A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202310164268.8
申请日：2023-02-24
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开一种基于质谱技术对食物中多种过敏原同步定量确证的方法及其应用，可同时对12种过敏原定性和绝对定量；利用同位素标记特征肽段(重标肽段)和目标特征肽段(轻标肽段)具有相同理化性质的特点，以同位素标记肽段为内标，建立轻标肽段与重标肽段面积比与过敏原含量的线性关系，内标法定量。检测时试样加入同量的重标肽段，根据是否测得目标肽段确定是否含有过敏原，根据测得轻重标肽段面积比计算得到样本中过敏原的绝对质量。本发明从实际应用场景“加工的食品制品”出发，筛选质谱响应性强的过敏原特征肽段，可以有效过滤掉受基质效应和加工过程影响的肽段，且适合多过敏原同时检测的肽段，检测方法特异性强、灵敏度高、稳定性强。
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公开(公告)号：CN112481397B
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202011317060.8
申请日：2020-11-23
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6837 , C12Q1/10 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及一种用于小肠结肠耶尔森菌4个主要致病型O抗原血清型的液相芯片检测方法及应用。本发明以小肠结肠耶尔森菌O3型的wbbU基因、O5型的wzt基因，O8型的wzy基因、以及O9型的per基因为靶基因，设计了并筛选了针对每一个血清型的特异性引物及探针，并建立了相应的液相芯片检测方法。利用本发明提供的方法可以准确、高通量速、灵敏地对小肠结肠耶尔森菌4个主要致病型O抗原血清型菌株进行分子生物学检测。
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公开(公告)号：CN112458034B
公开(公告)日：2023-01-24
申请号：CN202011420749.3
申请日：2020-12-08
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种基因构建的重组大肠杆菌及生物合成6’‑唾液乳糖的方法，属于代谢工程领域。所述重组大肠杆菌是通过代谢工程的方法(包括删除竞争途径基因和表达关键途径基因)对大肠杆菌中6’‑唾液乳糖合成相关基因进行对应改造后得到的。利用该菌株进行摇瓶发酵24 h，可以得到4~5 g/L的6’‑唾液乳糖。该菌株能够协同利用葡萄糖和甘油碳源高效合成6’‑唾液乳糖。本发明构建的重组大肠杆菌具有广阔的应用前景，为生物法生成6’‑唾液乳糖提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN114854887A
公开(公告)日：2022-08-05
申请号：CN202210755835.2
申请日：2022-06-30
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及一种对4种血清型迟缓爱德华菌的环介导等温扩增（LAMP）检测方法及应用。本发明以迟缓爱德华菌G6053，G6057，G6058，G6059的O抗原基因簇内的特异基因，即wzx基因为靶基因，设计并筛选了对上述4种血清型迟缓爱德华菌的各自四条引物，并建立了一种环介导等温扩增（LAMP）反应体系，为迟缓爱德华菌的检测和血清学分型提供了相应技术。利用本发明的LAMP体系检测迟缓爱德华菌，并且对其进行血清学分型，具有操作简便和快速高效的优点。
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公开(公告)号：CN112592986B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202011082556.1
申请日：2020-10-12
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6837 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供了用于检测6种嗜麦芽糖寡养单胞菌的DNA序列，连接在标记有不同荧光染料磁性微球上的DNA探针，包括：从嗜麦芽糖寡养单胞菌G6227、G6229、G6145、G6141、G6149、G6144的wzm基因中分别选取的一种DNA片段。本发明结合Bio‑Rad公司的Bio‑Plex 200悬液芯片系统，建立了一套用于检测6种嗜麦芽糖寡养单胞菌的悬液芯片检测系统及其检测方法，填补了利用分子生物学方法对6种嗜麦芽糖寡养单胞菌检测的技术空白，对于这一重要致病菌的临床鉴定和流行病学监测具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112592985A
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN202011082339.2
申请日：2020-10-12
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及基于MGB探针的实时荧光PCR反应快速检测体系对8种蜡样芽孢杆菌进行检测。本发明以8种蜡样芽孢杆菌的wzm基因为靶基因，设计并筛选了针对每一个血清型的Taqman特异性引物及MGB探针，并建立了实时荧光PCR检测方法。具有对食品中常见致病菌‑蜡样芽孢杆菌全部菌株进行检测的技术手段。利用本发明提供的方法可以准确、快速、灵敏地对8种蜡样芽孢杆菌菌株进行分子生物学检测。
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公开(公告)号：CN112575097A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011082335.4
申请日：2020-10-12
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6837 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/085
Abstract: 本发明提供了用于检测8种蜡样芽孢杆菌的DNA序列，连接在标记有不同荧光染料磁性微球上的DNA探针，包括：从蜡样芽孢杆菌G6235、G6206、G6239、G2724、G6211、G6217、G6207、G6214中分别选取的一种DNA片段。本发明结合Bio‑Rad公司的Bio‑Plex 200悬液芯片系统，建立了一套用于检测8种蜡样芽孢杆菌的悬液芯片检测系统及其检测方法，填补了利用分子生物学方法对蜡样芽孢杆菌检测的技术空白，对于这一重要致病菌的临床鉴定和流行病学监测具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112501096A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011421568.2
申请日：2020-12-08
Applicant: 南开大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C07K14/245 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一组肠道外致病大肠杆菌糖蛋白结合疫苗的基因工程大肠杆菌的构建及应用。基于CRISPR‑cas9删除E.coli K‑12 MG1655菌株中zwf、pfkB、lacZ、manA和pykA基因，构建能够协同利用葡萄糖和甘油的菌株，分别用于合成O抗原多糖和维持细菌生理代谢；进一步删除waaL、肠杆科共有抗原（ECA）和O16基因簇，构建底盘细胞为OSLA。分别导入O5和O7抗原合成基因簇，同时导入表达糖基转移酶以及载体蛋白，合成各血清型糖蛋白结合疫苗。纯化的糖蛋白经过动物免疫实验证实能够刺激小鼠产生具有保护性作用的抗体，保护率可以达到90%以上。本发明构建的重组大肠杆菌糖蛋白结合疫苗为抗肠道外致病大肠杆菌感染的免疫治疗提供了新的选择。
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公开(公告)号：CN112458034A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011420749.3
申请日：2020-12-08
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种基因构建的重组大肠杆菌及生物合成6’‑唾液乳糖的方法，属于代谢工程领域。所述重组大肠杆菌是通过代谢工程的方法(包括删除竞争途径基因和表达关键途径基因)对大肠杆菌中6’‑唾液乳糖合成相关基因进行对应改造后得到的。利用该菌株进行摇瓶发酵24 h，可以得到4~5 g/L的6’‑唾液乳糖。该菌株能够协同利用葡萄糖和甘油碳源高效合成6’‑唾液乳糖。本发明构建的重组大肠杆菌具有广阔的应用前景，为生物法生成6’‑唾液乳糖提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN112375834A
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN202011317071.6
申请日：2020-11-23
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种用于小肠结肠耶尔森菌4个主要致病型O抗原血清型的实时荧光PCR检测方法及应用。主要是采用MGB探针的实时荧光PCR反应快速检测体系对小肠结肠耶尔森菌O3，O5，O8和O9共4个O抗原血清型进行检测。本发明以小肠结肠耶尔森菌O3型的wbbU基因、O5型的wzt基因，O8型的wzy基因、以及O9型的per基因为靶基因，设计了并筛选了针对每一个血清型的Taqman特异性引物及MGB探针，并建立了实时荧光PCR检测方法。利用本发明提供的方法可以准确、快速、灵敏地对小肠结肠耶尔森菌4个主要致病型O抗原血清型菌株进行分子生物学检测。
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