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公开(公告)号：CN115747370A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211417240.2
申请日：2022-11-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组不结球白菜的KASP分子标记及其在种质资源鉴定中的应用。所述KASP分子标记基于不结球白菜基因组和重测序KASP技术，开发了一组不结球白菜的KASP引物，根据所开发的SNP位点以及设计的引物可以构建所选群体的DNA指纹图谱、品种鉴定、以及种子纯度鉴定等实验，实现对不结球白菜种质资源和种子纯度的快速、准确、有效地鉴定。
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公开(公告)号：CN115316260A
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202211022641.8
申请日：2022-08-25
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 一种用于快速评价不结球白菜耐热性的方法及应用，涉及植物耐热性评价技术领域，所采用的技术方案包括S1确定评价标准，S11催芽、培育、筛选多株植株，S12，热胁迫处理，S13检测叶片的Fv/Fm，S14得到以Fv/Fm数据表示的耐热性分级表，S2将待评价植株进行热胁迫处理并检测Fv/Fm，S3与耐热性分级表对比后确定耐热性等级。本发明首先根据植株经热胁迫处理后的热害症状强弱程度将植株分类为强耐热性、弱耐热性、热敏感性3个类别，再填入对应的最大光化学反应猝灭效率Fv/Fm，建立以Fv/Fm数据表示的耐热性分级表，再测定待评价植株经相同条件热胁迫处理后的Fv/Fm，并与耐热性分级表对比，即可评价出待评价植株的耐热程度。
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公开(公告)号：CN113564201A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202110886126.3
申请日：2021-08-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种十字花科作物花粉电击遗传转化方法，以不结球白菜的成熟花粉细胞作为受体材料，把质粒DNA在电场的作用下，导入花粉中，结合常规的人工授粉，得到转基因种子。通过对电转染花粉的培养观察，以及获得的后代植株进行转基因检测，证明电击转化法可以成功的在不结球白菜上应用。本发明首次在不结球白菜上应用电击转化技术作为基因编辑的方法，与目前农杆菌转化，基因枪法等转基因方法相比，操作相对简洁，成本较低，可以进一步研究建立遗传转化体系，为不结球白菜的遗传育种提供更好的工具。
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公开(公告)号：CN111543307A
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN202010381924.6
申请日：2020-05-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种白菜或青花菜CRISPR-Cas9基因编辑体系基因编辑效率的鉴定方法。该方法包含以下步骤:(1)利用聚乙烯亚胺修饰的碳纳米管介导的叶片瞬时转化法将CRISPR-Cas9基因编辑载体转化白菜或青花菜叶片；(2)注射后的第三天观察叶片GFP荧光蛋白的表达情况,提取有GFP荧光表达的叶片部位的基因组DNA，扩增编辑位点附近的序列测序验证编辑位点附近是否发生基因编辑,从而鉴定CRISPR-Cas9基因编辑体系的基因编辑效率。本方法解决了白菜和青花菜难以通过农杆菌侵染实现瞬时转化的问题，本发明简单有效地实现了白菜和青花菜的基因编辑，具有实验周期短，转化效率高的优点。
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公开(公告)号：CN108034753A
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201810035647.6
申请日：2018-01-15
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种与不结球白菜开花时间紧密连锁的SNP分子标记，所述SNP分子标记位于如SEQ ID NO.1所示BrFLC1_A10基因的第58个碱基，所述碱基为A或C，SNP分子标记的基因型为A/A时，不结球白菜为早开花型；SNP分子标记的基因型为C/C时，不结球白菜为晚开花型。本发明还提供用于检测与不结球白菜开花时间紧密连锁的SNP分子标记的特异性引物对，同时提供不结球白菜开花时间紧密连锁的SNP分子标记在鉴定不结球白菜开花时间以及在不结球白菜辅助育种中的应用。还提供用于检测与不结球白菜开花时间紧密连锁的SNP分子标记的特异性引物对在鉴定不结球白菜开花时间中以及在不结球白菜辅助育种中的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113564201B
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202110886126.3
申请日：2021-08-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种十字花科作物花粉电击遗传转化方法，以不结球白菜的成熟花粉细胞作为受体材料，把质粒DNA在电场的作用下，导入花粉中，结合常规的人工授粉，得到转基因种子。通过对电转染花粉的培养观察，以及获得的后代植株进行转基因检测，证明电击转化法可以成功的在不结球白菜上应用。本发明首次在不结球白菜上应用电击转化技术作为基因编辑的方法，与目前农杆菌转化，基因枪法等转基因方法相比，操作相对简洁，成本较低，可以进一步研究建立遗传转化体系，为不结球白菜的遗传育种提供更好的工具。
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公开(公告)号：CN110590729B
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN201910904189.X
申请日：2019-09-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D311/62 , A61K47/42 , A61K31/352
Abstract: 本发明属于提高白菜花色苷热稳定性领域，涉及一种采用核桃肽提高白菜花色苷热稳定性的方法。包括以下步骤：选择生长状况良好的白菜，洗净备用；选取酸化的乙醇作为提取剂，将提取液和白菜在超声条件下提取花色苷，获得提取液；提取液离心来，分离上清液得到花色苷的粗提取液；浓缩来，得到花色苷粗提取浓缩液；将花色苷粗提取浓缩液中浸泡2.5‑4小时，后再用蒸馏水冲洗大孔树脂，再用解吸液解吸大孔树脂，收集解吸液并浓缩，得到纯化的花色苷溶液；花色苷溶液中加入核桃肽溶液并加热来。本发明通过低浓度的核桃肽的作用来保存花色苷，并且能够较为显著的提高花色苷在一定温度的保存率，这对未来花色苷的保存和开发利用具有积极的作用。
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公开(公告)号：CN108504769B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201810592942.1
申请日：2018-06-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明选用早开花的油用型品种‘YS‑143’与晚开花的芜菁品种‘VT‑044’为试材，分别观察其在长日照和短日照两个条件下的开花时间。同时以两个材料为模板克隆这个基因的cDNA序列，并利用生物信息学技术对其氨基酸序列进行分析，发现早花型和晚花型白菜类作物CCA1基因上的差异位点，并通过生物信息学、测序比对等分析得到了初步确认，开发出一个InDel标记。所述InDel分子标记的核苷酸序列为ACCCTT，位于早花型白菜类作物CCA1基因的第六个外显子上，但不存在于晚花型白菜类作物CCA1基因编码区。最后通过验证，将其作为功能标记进行分子辅助育种工作。本发明的分子标记可简便、快速、高通量地应用于育种实践。
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公开(公告)号：CN110804675A
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201911148269.3
申请日：2019-11-21
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种不结球白菜微卫星DNA标记指纹图谱及其应用。本发明以9对SSR引物等位片段的组合为基础，以8个不结球白菜品种/系为标准材料，通过DNA的提取、PCR扩增、PCR产物的鉴定、数据分析，最终构建得到DNA指纹图谱。该指纹图谱可以区分开供试的不结球白菜品种/系，可用于不结球白菜品种/系的鉴定或纯度分析。本发明与传统的形态学和细胞学鉴定检测相比，具有检测时间短、准确性高、可重复性好的优点。
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