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公开(公告)号：CN109706091B
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN201811564910.7
申请日：2018-12-20
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明“一种工业生产甘草次酸的工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix及方法”，属于酶工程及微生物技术领域。所述工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix的保藏号为CGMCC No.16731。同时基于所述工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix本发明还提供一种工业化生产甘草次酸的方法，其包括：采用工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix对底物进行催化反应。本发明的工程菌GA108/PGAPZαA‑Atgusmix性能优良、可用于工业生产GA且GA得率高达94.9％，为甘草次酸大规模工业化生产奠定基础。
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公开(公告)号：CN108410839B
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN201810071464.X
申请日：2018-01-24
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明公开了一株热稳定性提高的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体，属于生物工程领域。将来源于嗜松篮状菌Talaromyces pinophilum Li‑93(保藏号:CGMCC No.11765)的β‑葡萄糖醛酸苷酶进行定点突变，将其编码的第212位缬氨酸、220位苏氨酸、238位半胱氨酸及348位缬氨酸均突变为精氨酸，并对该酶N端23个氨基酸进行截除，将突变基因的重组质粒转入毕赤酵母GS115中进行表达，得到热稳定性提高的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体。本发明所述的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体在55℃和70℃条件下的半衰期较野生型延长81min和25min，为野生型的3倍和2.3倍。并利用该突变体建立了高温转化GL的工艺。本发明所得到的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体具有广阔的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN109735518A
公开(公告)日：2019-05-10
申请号：CN201910148077.6
申请日：2019-02-28
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种最适反应pH提高的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体及其转化甘草酸工艺，属于生物工程领域。将来源于米曲霉Aspergillus oryzae Li-3的β-葡萄糖醛酸苷酶进行定点突变，将其编码的第79位谷氨酸、124位谷氨酸、135位谷氨酸及150位谷氨酸和200位天冬氨酸均突变为精氨酸，将突变基因的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达，得到最适反应pH提高的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体。本发明所述的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体的最适反应pH从4.5提高到6.5，调高2个pH单位，使得底物甘草酸的溶解度提高3倍。本发明所得到的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体具有广阔的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN104694543A
公开(公告)日：2015-06-10
申请号：CN201510060877.4
申请日：2015-02-05
Applicant: 北京理工大学
IPC: C12N15/115 , C12N9/24 , C12N11/14
Abstract: 本发明提供了一组β-葡萄糖醛酸苷酶核酸适配体及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明采用SELEX技术结合Ni2+修饰的磁珠的筛选方法，以β-葡萄糖醛酸苷酶PGUS-E为筛选靶标，筛选获得能够特异性结合PGUS-E的核酸适配体SEQ ID No.1和SEQ ID No.2。在核酸适配体与β-葡萄糖醛酸苷酶PGUS-E特异性结合的基础上，可用于检测、分离、纯化及固定化β-葡萄糖醛酸苷酶。
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公开(公告)号：CN119614405A
公开(公告)日：2025-03-14
申请号：CN202311172355.4
申请日：2023-09-12
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明“高效合成人参皂苷Ro的工程酵母菌、酶、基因及方法”属于合成生物学及代谢工程领域。工程酵母菌分别包括：保藏号为CGMCC No.23734的一株可高效合成人参皂苷Ro的工程酵母菌Ro‑P1，保藏号为CGMCC No.23732的一株可高效合成竹节参皂苷Ⅳa的工程酵母菌IVA‑P1，保藏号为CGMCC No.23733的一株可高效合成姜状三七苷R1的工程酵母菌R1‑P1。上述工程酵母菌稳定，生长周期短，培养条件温和，培养成本低，目标产物产量高，实现了目标化合物的高效从头合成。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116334057B
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202210982067.4
申请日：2022-08-16
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种利用聚乙二醇马来酰亚胺衍生物构建的酶组装体及其制备方法和应用，本发明方法包括：将聚乙二醇马来酰亚胺衍生物与酶交联，获得酶组装体；其中：所述酶由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列单一突变所得，所述单一突变是用半胱氨酸残基的置换。本发明还涉及了由该方法构建得到的酶组装体及其应用。本发明通过简单高效的方法实现了蛋白质在特定位点的组装，成功制备了相对空间定位可控的酶组装体。采用本发明方法形成的酶组装体能够在基本不影响酶活性的基础上，进一步提高酶的热稳定性。
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公开(公告)号：CN114134060B
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202111498550.7
申请日：2021-12-09
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明“4株可高效合成人参皂苷Ro合成途径中间产物或终产物的工程酵母菌及方法”属于合成生物学及代谢工程领域。4株工程酵母菌分别是：保藏号为CGMCC No.23731的一株可高效合成金盏花苷E的工程酵母菌CE‑P1，保藏号为CGMCC No.23732的一株可高效合成竹节参皂苷Ⅳa的工程酵母菌IVA‑P1，保藏号为CGMCC No.23733的一株可高效合成姜状三七苷R1的工程酵母菌R1‑P1，保藏号为CGMCC No.23734的一株可高效合成人参皂苷Ro的工程酵母菌Ro‑P1。上述工程酵母菌稳定，生长周期短，培养条件温和，培养成本低，目标产物产量高，实现了目标化合物的高效从头合成。
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公开(公告)号：CN114350646B
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202111582565.1
申请日：2021-12-22
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明“一种UDP‑糖差向异构酶PsUGE2及其在合成阿拉伯糖苷中的应用”属于生物工程与技术领域。所述一种UDP‑糖差向异构酶PsUGE2的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。基于所述UDP‑糖差向异构酶PsUGE2，本发明还提供一种合成UDP‑阿拉伯糖的方法，其采用氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示或基因序列如SEQ ID NO.2所示的UDP‑糖差向异构酶PsUGE2对底物进行催化反应。本发明建立UDP‑阿拉伯糖循环体系及五环三萜阿拉伯糖苷的合成体系，实现五环三萜阿拉伯糖苷的合成，提高UDP的循环体系再生，提高反应速率，同时以蔗糖作为初始糖供体，将大大降低合成阿拉伯糖苷化合物成本。
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公开(公告)号：CN116445442A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310024443.3
申请日：2023-01-07
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明涉及一种人工计算的UDP‑糖基转移酶UGT91H_A1基因及其编码的蛋白。本发明通过对UDP‑糖基转移酶UGT91H亚家族进行祖先酶序列重构，计算获得一种新型UDP‑糖基转移酶的基因UGT91H_A1及其编码的蛋白，在大肠杆菌细胞中成功异源表达，并验证其催化合成常春藤苷元3‑O‑α‑L‑鼠李糖基(1‑2)‑α‑L‑鼠李糖基(1‑2)‑α‑L‑阿拉伯糖、常春藤苷元3‑O‑β‑D木糖基(1‑2)‑α‑L‑鼠李糖基(1‑2)‑α‑L‑阿拉伯糖、常春藤苷元3‑O‑β‑D‑葡萄糖基(1‑2)‑α‑L‑鼠李糖基(1‑2)‑α‑L‑阿拉伯糖的功能，同时偶联蔗糖合酶GuSUS1‑Δ9、UDP‑Rha合酶AtRHM2、双功能鼠李糖合酶AtNRS/ER和UDP‑糖基转移酶UGT91H_A1构建UDP‑Rha循环再生系统，该系统可催化α‑常春藤苷糖苷化合物合成。本发明填补了五环三萜α‑常春藤苷C‑3母核上2"‑OH糖基化研究方面的空白，为后续合成具有潜在临床价值的新型α‑常春藤苷糖苷化合物的相关研究提供了参考和依据，同时构建的UDP‑Rha循环再生体系也极大降低了常春藤苷元3‑O‑α‑L‑鼠李糖基(1‑2)‑α‑l‑鼠李糖基(1‑2)‑α‑l‑阿拉伯糖的制备成本。
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公开(公告)号：CN116334057A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202210982067.4
申请日：2022-08-16
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种利用聚乙二醇马来酰亚胺衍生物构建的酶组装体及其制备方法和应用，本发明方法包括：将聚乙二醇马来酰亚胺衍生物与酶交联，获得酶组装体；其中：所述酶由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列单一突变所得，所述单一突变是用半胱氨酸残基的置换。本发明还涉及了由该方法构建得到的酶组装体及其应用。本发明通过简单高效的方法实现了蛋白质在特定位点的组装，成功制备了相对空间定位可控的酶组装体。采用本发明方法形成的酶组装体能够在基本不影响酶活性的基础上，进一步提高酶的热稳定性。
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