公开(公告)号：CN109735518B

公开(公告)日：2020-08-25

申请号：CN201910148077.6

申请日：2019-02-28

Applicant: 北京理工大学

Inventor： 李春 ,  李巧峰 ,  冯旭东 ,  刘蕊

IPC: C12N9/24 ,  C12P33/00 ,  C12P33/20

Abstract: 本发明公开了一种最适反应pH提高的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体及其转化甘草酸工艺，属于生物工程领域。将来源于米曲霉Aspergillus oryzae Li‑3的β‑葡萄糖醛酸苷酶进行定点突变，将其编码的第79位谷氨酸、124位谷氨酸、135位谷氨酸及150位谷氨酸和200位天冬氨酸均突变为精氨酸，将突变基因的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达，得到最适反应pH提高的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体。本发明所述的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体的最适反应pH从4.5提高到6.5，调高2个pH单位，使得底物甘草酸的溶解度提高3倍。本发明所得到的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体具有广阔的工业化应用前景。

公开(公告)号：CN109735518A

公开(公告)日：2019-05-10

申请号：CN201910148077.6

申请日：2019-02-28

Applicant: 北京理工大学

Inventor： 李春 ,  李巧峰 ,  冯旭东 ,  刘蕊

IPC: C12N9/24 ,  C12P33/00 ,  C12P33/20

Abstract: 本发明公开了一种最适反应pH提高的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体及其转化甘草酸工艺，属于生物工程领域。将来源于米曲霉Aspergillus oryzae Li-3的β-葡萄糖醛酸苷酶进行定点突变，将其编码的第79位谷氨酸、124位谷氨酸、135位谷氨酸及150位谷氨酸和200位天冬氨酸均突变为精氨酸，将突变基因的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达，得到最适反应pH提高的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体。本发明所述的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体的最适反应pH从4.5提高到6.5，调高2个pH单位，使得底物甘草酸的溶解度提高3倍。本发明所得到的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体具有广阔的工业化应用前景。