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公开(公告)号：CN107513505A
公开(公告)日：2017-12-26
申请号：CN201710962610.3
申请日：2017-10-17
Applicant: 北京理工大学
CPC classification number: C07K14/705 , G01N21/6486
Abstract: 本发明公开了一种融合了甜味受体蛋白T1R2/T1R3和检测基因线路，以酵母细胞为宿主的可对待测物的甜味强度进行高效检测的生物系统，其中包括进行过修饰和密码子优化的甜味受体蛋白T1R2/T1R3，改造后适配于T1R2/T1R3的Gpa1蛋白，排除了信号干扰、将信号放大的G蛋白偶联信号通路，以及诱导型、具有荧光蛋白或酶作为报告基因的检测基因线路。将待测物加入到培养环境中，甜味物质分子与甜味受体结合后，利用宿主自身G蛋白偶联信号通路将信号放大，激活下游检测线路，以报告基因的表达情况作为信号输出，通过信号输出强度来表征甜味物质的甜味强度。本发明的培养条件简单、成本低廉、周期短、检测范围广、可重复性高、稳定性高，可实现对不同甜味物质甜味强度的高效检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108410839A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810071464.X
申请日：2018-01-24
Applicant: 北京理工大学
CPC classification number: C12N9/2402 , C12P33/20 , C12Y302/01031
Abstract: 本发明公开了一株热稳定性提高的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体，属于生物工程领域。将来源于嗜松篮状菌Talaromyces pinophilum Li-93(保藏号:CGMCC No.11765)的β-葡萄糖醛酸苷酶进行定点突变，将其编码的第212位缬氨酸、220位苏氨酸、238位半胱氨酸及348位缬氨酸均突变为精氨酸，并对该酶N端23个氨基酸进行截除，将突变基因的重组质粒转入毕赤酵母GS115中进行表达，得到热稳定性提高的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体。本发明所述的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体在55℃和70℃条件下的半衰期较野生型延长81min和25min，为野生型的3倍和2.3倍。并利用该突变体建立了高温转化GL的工艺。本发明所得到的β-葡萄糖醛酸苷酶突变体具有广阔的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN106047713A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610245351.8
申请日：2016-04-19
Applicant: 北京理工大学 , 南京精微生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一株嗜松篮状菌(Talaromyces pinophilum)菌株Li‑93，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.11765。本发明还提供一种用于制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的制品，该制品的活性成分为嗜松篮状菌Li‑93。本发明还提供一种制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸的方法。利用上述制品和方法制备GAMG时，具有产物单一，无副产物生成的特点，在常规条件下制备GAMG得率为96％左右，高于现有水平，因此本发明为制备GAMG提供了一种简单有效的产品及方法。
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公开(公告)号：CN106047713B
公开(公告)日：2019-07-02
申请号：CN201610245351.8
申请日：2016-04-19
Applicant: 北京理工大学 , 南京精微生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一株嗜松篮状菌(Talaromyces pinophilum)菌株Li‑93，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.11765。本发明还提供一种用于制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的制品，该制品的活性成分为嗜松篮状菌Li‑93。本发明还提供一种制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸的方法。利用上述制品和方法制备GAMG时，具有产物单一，无副产物生成的特点，在常规条件下制备GAMG得率为96％左右，高于现有水平，因此本发明为制备GAMG提供了一种简单有效的产品及方法。
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公开(公告)号：CN106047839A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610245024.2
申请日：2016-04-19
Applicant: 北京理工大学 , 南京精微生物科技有限公司
CPC classification number: C12N9/2402 , C12Y302/01031
Abstract: 本发明提供一种用于提高真菌产β‑葡萄糖醛酸苷酶酶活的发酵培养基及方法。该发酵培养基为马铃薯和水的煮沸物过滤所得滤液中加入促进剂和水所得的溶液，所述促进剂为甘草酸或其盐。利用本发明提供的发酵培养基和方法分别将产紫青霉(Penicillium purpurogenum)Li‑3、嗜松篮状菌(Talaromyces pinophilum)Li‑93、土曲霉(Aspergillus terreus)Li‑20和焦曲霉(Aspergillus ustus)Li‑62进行发酵产β‑葡萄糖醛酸苷酶的培养，发现上述各真菌发酵酶活单位与现有发酵方法所得相比提高了100‑600％，发酵时间提前了36‑60小时。因此，本发明提供的真菌产β‑葡萄糖醛酸苷酶的发酵培养基及方法具有操作简单、成本廉价、发酵酶活单位高、产酶时间短的特点。
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公开(公告)号：CN108410839B
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN201810071464.X
申请日：2018-01-24
Applicant: 北京理工大学
Abstract: 本发明公开了一株热稳定性提高的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体，属于生物工程领域。将来源于嗜松篮状菌Talaromyces pinophilum Li‑93(保藏号:CGMCC No.11765)的β‑葡萄糖醛酸苷酶进行定点突变，将其编码的第212位缬氨酸、220位苏氨酸、238位半胱氨酸及348位缬氨酸均突变为精氨酸，并对该酶N端23个氨基酸进行截除，将突变基因的重组质粒转入毕赤酵母GS115中进行表达，得到热稳定性提高的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体。本发明所述的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体在55℃和70℃条件下的半衰期较野生型延长81min和25min，为野生型的3倍和2.3倍。并利用该突变体建立了高温转化GL的工艺。本发明所得到的β‑葡萄糖醛酸苷酶突变体具有广阔的工业化应用前景。
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