一种在玻片上检测基因突变的方法

    公开(公告)号:CN1293255A

    公开(公告)日:2001-05-02

    申请号:CN00116095.8

    申请日:2000-10-25

    Abstract: 本发明公开了一种在玻片上检测基因突变的方法,其特征在于将杂交生成的完整异源DNA双链固定在玻片上,异源DNA双链中一条链的5′端与巯基硅烷化的玻片相交联,双链的5′端携带生物素,用羟胺溶液修饰错配碱基中的胞嘧啶,用高锰酸钾和氯化四乙胺混合液修饰错配碱基中的胞嘧啶,用哌啶剪切点突变中的被修饰嘧啶类碱基,加入2到5个单位的S1酸酶消化处理异源DNA双链,连人大肠杆菌碱性磷酸酶进行突变检测。本发明不仅能够在玻片上准确、灵敏、快速的检测结核杆菌耐药性基因点突变,而且检测DNA序列长度范围大,成本低廉,操作简便。

    一种控制固定化酶空间取向的方法

    公开(公告)号:CN1292417A

    公开(公告)日:2001-04-25

    申请号:CN00115952.6

    申请日:2000-08-11

    Abstract: 本发明公开了一种控制固定化酶空间取向的方法。其步骤是通过基因操纵构建和表达酶—连接肽—链霉结合肽融合蛋白,制备融合蛋白纯品,超滤浓缩,测定酶动力学;通过链霉结合肽与链霉亲和素的专一性结合,使酶分子定向固定在经链霉亲和素包被的固相载体上,其活性中心朝向反应溶液。融合蛋白为“锚—链”分子系统,其中链霉结合肽为“锚”,控制酶分子固定的方向,连接肽为“链”,能增加酶与链霉结合肽之间的分子距离,既保持两者各自空间活动的灵活性,又减小了链霉结合肽与链霉亲和素的结合反应的空间位阻,从而大大提高定向固定效率。该方法剩余酶活高,均一性好,是定向固定酶分子的一种模式方法,适合于制作高质量生物传感器、生物芯片等生物器件。

    蛋白或肽与核酸共价连接的方法

    公开(公告)号:CN112851765B

    公开(公告)日:2023-02-28

    申请号:CN202110186446.8

    申请日:2021-02-09

    Abstract: 本发明提供了一种蛋白或肽与核酸共价连接的方法,涉及生物交联的技术领域。上述蛋白或肽与核酸共价连接的方法,包括以下步骤:(1)目标蛋白或肽与Trwc酶形成融合蛋白;(2)融合蛋白中Trwc酶催化目标蛋白或肽与目标核酸共价连接。本发明利用Trwc酶能够识别、剪切和连接特定的目标核酸序列且能与目标核酸共价连接的性质,实现了稳定、高效、定点、定向共价连接目标蛋白或肽与目标核酸的目的,反应条件温和,反应步骤简单,耗时短,无需引入任何化学试剂,只需加入金属离子,适合产业化推广。

    一种基于FRET的融合蛋白、荧光纳米颗粒及其应用

    公开(公告)号:CN111018997B

    公开(公告)日:2022-02-18

    申请号:CN201911187599.3

    申请日:2019-11-28

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于FRET的融合蛋白、荧光纳米颗粒及其应用。该融合蛋白包括病毒结构蛋白,所述病毒结构蛋白能自组装成病毒样颗粒;和能实现荧光共振能量转移的供体‑受体对。本发明还提供一种病毒样荧光纳米颗粒由该融合蛋白组装得到,所述荧光纳米颗粒在提高FRET效率的同时,还极大提高了其作为荧光探针功能过程中的荧光信号输出量,在提高检测的灵敏度和稳定性的同时降低背景值提高信噪比;在应用时可直接与靶向性配体相连,可以保证荧光蛋白对的FRET效果,稳定性好,灵敏度高,使得实验结果误差减小,实验结果更贴近真实。

    一种纳米流感疫苗及构建方法和应用

    公开(公告)号:CN107344969B

    公开(公告)日:2021-03-05

    申请号:CN201610292382.9

    申请日:2016-05-05

    Abstract: 本发明公开了一种纳米流感疫苗及构建方法和应用,所述的纳米流感疫苗为3M2e‑rHF重组蛋白,其序列为SEQ ID NO.2所示。本发明的重组蛋白将3M2e展示在铁蛋白笼形结构表面,显著提高了M2e免疫原性,从而构建了一种新型流感疫苗:3M2e‑rHF纳米颗粒。本发明利用原核表达系统大肠杆菌表达重组蛋白疫苗,疫苗制备过程不涉及到活病毒,相比传统的鸡胚制备流感疫苗方法操作更加安全、简便,适合进行快速大规模生产;利用M2e在不同亚型流感病毒中序列的高度保守性,实验证实,3M2e‑rHF保护小鼠抵抗了同型和异型流感病毒的感染,有望发展成为具有交叉保护效力的通用流感疫苗。

    一种跨膜的饥饿诱导的DNA结合蛋白及应用

    公开(公告)号:CN110283251A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910312436.7

    申请日:2019-04-18

    Abstract: 本发明属于生物科学领域,具体涉及一种跨膜的饥饿诱导的DNA结合蛋白及应用,本发明通过对来源于原核生物的蛋白纳米笼的理性设计使其成为能够应用于哺乳动物细胞的抗氧化蛋白纳米材料,其特征在于:通过在Dps(Starvation-induced DNA binding protein,Dps)的N端融合表达His-tag和Avitag(LNDIFEAQKIEWHE)实现Dps的跨哺乳动物细胞膜运输;并能够保护细胞免受活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的损伤;同时该蛋白纳米材料生物相容性好,设计简单,容易制备,产率高,适合大规模生产。

    一种基于荧光蛋白iRFP的双分子荧光片段互补系统及应用

    公开(公告)号:CN105624178A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201410605792.5

    申请日:2014-10-31

    Abstract: 本发明为一种基于荧光蛋白iRFP的双分子荧光片段互补系统及应用,以光敏色素荧光蛋白iRFP为模板,在氨基酸97-98位将其拆分为不发荧光的氮端和碳端片段iRN97和iRC98,当这两个片段分别与相互作用的蛋白对相融合表达时,不发荧光的两个片段就可以被拉近而产生iRFP的荧光;iRN97和iRC98分别与艾滋病毒整合酶IN及细胞蛋白P75相融合表达,通过iRN97和iRC98的荧光互补,在活细胞内对IN与p75的相互作用进行研究,当药物能够抑制该蛋白-蛋白之间的相互作用时,iRN97和iRC98则不能被拉近,从而抑制荧光的恢复。该新系统为一种简单、有效、方便的抑制蛋白相互作用的药物的评价系统。

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