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公开(公告)号：CN119530233A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202411725369.9
申请日：2024-11-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/569 , G01N33/68 , C07K14/01 , C12N7/02 , A61K31/7088 , A61K47/54 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种特异性结合非洲猪瘟病毒A104R蛋白的核酸适配体及其应用。本发明利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX)，以非洲猪瘟病毒A104R蛋白为靶标，从随机核酸文库中筛选获得能够结合A104R蛋白的6条核酸适配体，所述核酸适配体的序列如SEQ ID No.1‑6所示。本发明所述的核酸适配体与非洲猪瘟病毒蛋白A104R具有较好的亲和力和反应性，且与p30蛋白没有交叉反应，具有良好的特异性，可用于非洲猪瘟病毒或A104R蛋白的检测和分析。
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公开(公告)号：CN119432770A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202510003341.2
申请日：2025-01-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种特异性结合产气荚膜梭菌（C.p）β2毒素重组蛋白的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及应用。本发明提供了特异性结合β2毒素蛋白的单克隆抗体和分泌这种单克隆抗体的保藏编号为CCTCC NO:C2024312的杂交瘤细胞株CPB2‑2A4，单克隆抗体仅与C.p β2毒素蛋白发生反应，而不与其他感染牛羊的病原体发生交叉反应，具有极高的特异性；试剂盒利用竞争ELISA技术，以与C.p β2毒素重组蛋白特异性结合的鼠单克隆抗体作为竞争抗体，可检测多种动物来源血清中C.p β2毒素抗体，避免了样本来源的种属限制。另外，试剂盒重复性良好。试剂盒操作时技术要求比较宽松，可在生产中广泛推广使用，应用于C.p流行病学调查和疫苗免疫水平监测。
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公开(公告)号：CN117866910B
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202410231627.1
申请日：2024-03-01
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及一株用绿色荧光蛋白标记NS1蛋白的重组蓝舌病毒。本发明通过在野生型蓝舌病毒非结构蛋白NS1的156位和157位氨基酸之间插入增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein，eGFP)序列，构建获得了NS1重组突变蓝舌病毒BTV‑1S6‑156eGFP；所述重组蓝舌病毒与野生型蓝舌病毒相比，重组的NS1蛋白能够正确表达增强型绿色荧光蛋白，但不再形成病毒样微管结构，可用于BTV感染细胞后NS1蛋白未形成病毒样微管结构的相关研究，同时可用于BTV的病毒中和实验及病毒含量的可视化定量检测等。
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公开(公告)号：CN119410837A
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202411572510.6
申请日：2024-11-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12N15/113 , C12N15/867 , C12N9/22 , C12N5/10 , G01N33/569 , C12Q1/02 , A61K45/00 , A61P31/14 , A61K31/7105 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种TRIM3基因或蛋白为靶点在筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物中的应用。具体为：本发明首先利用CRISPR/Cas9系统构建了TRIM3敲除细胞系，所述细胞系显著抑制FMDV的复制；其次，本发明利用慢病毒包装系统构建了TRIM3稳定表达细胞系，所述细胞系促进FMDV的复制。因此，本发明发现抑制或沉默TRIM3基因/蛋白能够抑制口蹄疫病毒的复制，可作为靶点用于筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物，对未来预防或抑制FMDV感染提供一些理论依据，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN119345362A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202410406760.6
申请日：2024-04-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K45/00 , A61K31/7088 , A61P31/14 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/867 , C12N15/54 , C12N7/01 , C12N5/10
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种METTL3基因/蛋白为靶点在筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物中的应用。具体为：①本发明首先利用CRISPR/Cas9系统构建了METTL3敲除细胞系，所述细胞系显著抑制FMDV的复制；其次，本发明利用慢病毒包装系统构建了METTL3稳定表达细胞系，所述细胞系促进FMDV的复制。因此，本发明发现抑制或沉默METTL3基因/蛋白能够抑制口蹄疫病毒的复制，可作为靶点用于筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物，对未来预防或抑制FMDV感染提供一些理论依据，具有广阔的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119320436A
公开(公告)日：2025-01-17
申请号：CN202411474710.8
申请日：2024-10-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K19/00 , C12N15/40 , C12N15/62 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒NS2截短蛋白及在BVDV抗体检测中的应用。本发明首先提供了一种BVDV NS2蛋白的截短蛋白，所述截短蛋白分别与谷胱甘肽S移换酶(GST)和辣根过氧化物酶(HRP)融合后可溶性表达，且与BVDV抗体阳性血清具有较好的反应原性，与BVDV抗体阴性血清不发生反应，可用于BVDV抗体检测；其次，本发明以GST与所述截短蛋白的融合蛋白为包被抗原，以HRP与所述截短蛋白的融合蛋白为检测抗原，构建了BVDV抗体检测的双抗原夹心ELISA方法，所述方法具有敏感性高、特异性好、操作简便、易于推广、成本低等技术优点，可适用用于牛群中BVDV抗体的筛查。
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公开(公告)号：CN119269792A
公开(公告)日：2025-01-07
申请号：CN202411399260.0
申请日：2024-10-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N21/78 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明属于检测技术领域，具体涉及一种牛结节性皮肤病毒、绵羊痘病毒和山羊痘病毒的通用型试剂盒。本发明以表达的特定重组p122蛋白为基础，以待检血清为检测样本，建立了一种牛结节性皮肤病毒、绵羊痘病毒和山羊痘病毒的双抗原夹心ELISA方法，所述方法包括包被抗原、封闭、加入待检样品和酶标抗原、显色和结果判定等步骤；具有特异性好、敏感性高、重复性好、成本低及可批量检测的优点，可为预防和控制牛结节性皮肤病毒、绵羊痘病毒和山羊痘病毒奠定一定的检测技术基础。
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公开(公告)号：CN118581151B
公开(公告)日：2024-12-06
申请号：CN202410675517.4
申请日：2024-05-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种猪BECN1基因敲除细胞的构建方法及其应用。首先设计合成针对BECN1基因的带有酶切位点的向导RNA及其互补序列，利用碱基互补配对原则将sgRNA及其互补序列连接为双链sgRNA片段，通过分子克隆重组技术构建重组CRISPR/Cas9质粒，将重组质粒转染到猪肺上皮细胞中，设计sgRNA验证引物验证sgRNA活性，再通过嘌呤霉素药物筛选阳性单克隆细胞株，提取单克隆细胞株的DNA和蛋白质，进行BECN1基因测序及蛋白表达检测，最后获得BECN1基因敲除的PPE细胞。本方法简便高效，构建的敲除细胞系可广泛应用于BECN1基因功能和相关通路研究。
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公开(公告)号：CN119039428A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411156911.3
申请日：2024-08-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于体外诊断技术领域，具体涉及一种抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的鼠源重组抗体及其制备方法。本发明利用杂交瘤细胞技术筛选得到的针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的杂交瘤细胞株2B8，将所述杂交瘤细胞株2B8用Trizol裂解后提取总RNA，利用巢式PCR方法扩增得到重链及轻链可变区序列；并将所述重链及轻链可变区序列构建到含有鼠源恒定区的载体上，成功表达获得了抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的重组抗体；所述重组抗体能够识别大肠杆菌表达的重组VP7蛋白，且与在BHK21细胞内表达的重组VP7蛋白发生特异性反应；可利用该重组抗体建立非洲马瘟病毒竞争ELISA抗体检测方法，为有效防控非洲马瘟传入我国提供了技术基础。
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公开(公告)号：CN119039427A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411099375.8
申请日：2024-08-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一株绵羊抗蓝舌病毒的重组单个B细胞抗体。本发明利用流式单细胞分选技术在蓝舌病毒灭活疫苗免疫的绵羊外周血淋巴细胞中获得一株抗蓝舌病毒的单个B细胞抗体，通过RT‑PCR扩增获得该株抗体的轻重链可变区序列，与含有绵羊IgG抗体恒定区的表达载体构建出该抗体的两个重组轻重链表达质粒，转染293F细胞后成功表达出绵羊抗蓝舌病毒的重组单个B细胞抗体；所述单个B细胞抗体在ELISA、细胞免疫荧光实验中均能够与蓝舌病毒发生特异性反应。该发明避免了传统杂交瘤抗体制备技术中会遇到的抗体异源性、细胞凋亡和遗传不稳定的难题，为建立更加准确、灵敏的蓝舌病检测方法奠定了基础。
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