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公开(公告)号：CN118930644B
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202411181972.5
申请日：2024-08-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/68 , C12N15/85
Abstract: 本发明利用杂交瘤细胞技术筛选得到识别蓝舌病毒VP7蛋白的杂交瘤细胞株2B2，将所述杂交瘤细胞株2B2用Trizol裂解后提取细胞总RNA，反转录后利用巢式PCR方法扩增得到抗体分子重链及轻链可变区序列；并将所述重链及轻链可变区序列构建到含有鼠源IgG恒定区的表达载体上，成功表达获得了识别蓝舌病毒VP7蛋白的基因工程抗体；所述基因工程抗体能够与蓝舌病毒的重组VP7蛋白发生反应，且能识别蓝舌病毒感染BHK‑21细胞和KC细胞中的天然VP7蛋白；可利用该基因工程抗体建立蓝舌病毒竞争ELISA、夹心ELISA及胶体金试纸条等检测方法，为有效防控蓝舌病提供了技术基础。
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公开(公告)号：CN119371522A
公开(公告)日：2025-01-28
申请号：CN202411734157.7
申请日：2024-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/85 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577 , C12P21/08
Abstract: 本发明属于免疫学和体外诊断技术领域，具体涉及一株特异识别非洲马瘟病毒VP7蛋白的鼠源重组单克隆抗体。本发明利用杂交瘤细胞技术筛选得到的针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的杂交瘤细胞株2C12，提取总RNA反转录成cDNA，以其为模板利用巢式PCR方法扩增得到小鼠IgG抗体分子轻链及重链可变区序列，将轻链及重链可变区序列构建到含有鼠源恒定区的质粒载体上，共转染293F悬浮细胞进行表达纯化，获得了特异识别非洲马瘟病毒VP7蛋白的鼠源重组单克隆抗体。所述重组抗体能够特异性识别非洲马瘟病毒的重组VP7蛋白，但不识别蓝舌病毒以及流行性出血热病毒的重组VP7蛋白，这为进一步建立特异性非洲马瘟诊断技术提供支持。
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公开(公告)号：CN120058917A
公开(公告)日：2025-05-30
申请号：CN202510252913.0
申请日：2025-03-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明属于免疫学和体外诊断技术领域，具体涉及一株特异性识别流行性出血病病毒VP7蛋白的单克隆抗体及其用途。本发明通过杂交瘤技术制备了识别流行性出血病病毒(EHDV)VP7蛋白的单克隆抗体5E11；所述单克隆抗体5E11能够识别大肠杆菌表达的EHDV VP7蛋白，也能与BHK‑21细胞中表达的重组EHDV VP7蛋白特异结合，同时该单克隆抗体与重组蓝舌病毒VP7蛋白和重组非洲马瘟病毒VP7蛋白不发生反应；利用该单克隆抗体5E11作为竞争抗体，建立了流行性出血病病毒的竞争ELISA抗体检测方法，对于EHDV的诊断、预防和控制具有重要意义。
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公开(公告)号：CN119039427B
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202411099375.8
申请日：2024-08-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一株绵羊抗蓝舌病毒的重组单个B细胞抗体。本发明利用流式单细胞分选技术在蓝舌病毒灭活疫苗免疫的绵羊外周血淋巴细胞中获得一株抗蓝舌病毒的单个B细胞抗体，通过RT‑PCR扩增获得该株抗体的轻重链可变区序列，与含有绵羊IgG抗体恒定区的表达载体构建出该抗体的两个重组轻重链表达质粒，转染293F细胞后成功表达出绵羊抗蓝舌病毒的重组单个B细胞抗体；所述单个B细胞抗体在ELISA、细胞免疫荧光实验中均能够与蓝舌病毒发生特异性反应。该发明避免了传统杂交瘤抗体制备技术中会遇到的抗体异源性、细胞凋亡和遗传不稳定的难题，为建立更加准确、灵敏的蓝舌病检测方法奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119039428A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411156911.3
申请日：2024-08-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于体外诊断技术领域，具体涉及一种抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的鼠源重组抗体及其制备方法。本发明利用杂交瘤细胞技术筛选得到的针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的杂交瘤细胞株2B8，将所述杂交瘤细胞株2B8用Trizol裂解后提取总RNA，利用巢式PCR方法扩增得到重链及轻链可变区序列；并将所述重链及轻链可变区序列构建到含有鼠源恒定区的载体上，成功表达获得了抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的重组抗体；所述重组抗体能够识别大肠杆菌表达的重组VP7蛋白，且与在BHK21细胞内表达的重组VP7蛋白发生特异性反应；可利用该重组抗体建立非洲马瘟病毒竞争ELISA抗体检测方法，为有效防控非洲马瘟传入我国提供了技术基础。
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公开(公告)号：CN119039427A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411099375.8
申请日：2024-08-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一株绵羊抗蓝舌病毒的重组单个B细胞抗体。本发明利用流式单细胞分选技术在蓝舌病毒灭活疫苗免疫的绵羊外周血淋巴细胞中获得一株抗蓝舌病毒的单个B细胞抗体，通过RT‑PCR扩增获得该株抗体的轻重链可变区序列，与含有绵羊IgG抗体恒定区的表达载体构建出该抗体的两个重组轻重链表达质粒，转染293F细胞后成功表达出绵羊抗蓝舌病毒的重组单个B细胞抗体；所述单个B细胞抗体在ELISA、细胞免疫荧光实验中均能够与蓝舌病毒发生特异性反应。该发明避免了传统杂交瘤抗体制备技术中会遇到的抗体异源性、细胞凋亡和遗传不稳定的难题，为建立更加准确、灵敏的蓝舌病检测方法奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119912558A
公开(公告)日：2025-05-02
申请号：CN202510283617.7
申请日：2025-03-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于免疫学和体外诊断技术领域，涉及一株针对牛结节性皮肤病病毒(LSDV)L1R蛋白的单克隆抗体。本发明表达获得了缺失跨膜区(182‑204aa)的LSDV重组L1R蛋白；将所述蛋白免疫小鼠后筛选出了一株反应性和特异性良好的针对LSDV L1R蛋白的单克隆抗体8D5；并获得编码单克隆抗体8D5的重链及轻链可变区序列；所述单克隆抗体8D5能够与LSDV L1R蛋白发生特异性反应，且所述重组蛋白L1R能被牛LSDV阳性血清特异识别，同时单克隆抗体8D5可用于建立LSDV ELISA抗体检测方法，这为LSDV的诊断技术和疫苗研发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119039428B
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411156911.3
申请日：2024-08-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于体外诊断技术领域，具体涉及一种抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的鼠源重组抗体及其制备方法。本发明利用杂交瘤细胞技术筛选得到的针对非洲马瘟病毒VP7蛋白的杂交瘤细胞株2B8，将所述杂交瘤细胞株2B8用Trizol裂解后提取总RNA，利用巢式PCR方法扩增得到重链及轻链可变区序列；并将所述重链及轻链可变区序列构建到含有鼠源恒定区的载体上，成功表达获得了抗非洲马瘟病毒VP7蛋白的重组抗体；所述重组抗体能够识别大肠杆菌表达的重组VP7蛋白，且与在BHK21细胞内表达的重组VP7蛋白发生特异性反应；可利用该重组抗体建立非洲马瘟病毒竞争ELISA抗体检测方法，为有效防控非洲马瘟传入我国提供了技术基础。
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公开(公告)号：CN118930644A
公开(公告)日：2024-11-12
申请号：CN202411181972.5
申请日：2024-08-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/68 , C12N15/85
Abstract: 本发明利用杂交瘤细胞技术筛选得到识别蓝舌病毒VP7蛋白的杂交瘤细胞株2B2，将所述杂交瘤细胞株2B2用Trizol裂解后提取细胞总RNA，反转录后利用巢式PCR方法扩增得到抗体分子重链及轻链可变区序列；并将所述重链及轻链可变区序列构建到含有鼠源IgG恒定区的表达载体上，成功表达获得了识别蓝舌病毒VP7蛋白的基因工程抗体；所述基因工程抗体能够与蓝舌病毒的重组VP7蛋白发生反应，且能识别蓝舌病毒感染BHK‑21细胞和KC细胞中的天然VP7蛋白；可利用该基因工程抗体建立蓝舌病毒竞争ELISA、夹心ELISA及胶体金试纸条等检测方法，为有效防控蓝舌病提供了技术基础。
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