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公开(公告)号:CN103290123B
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN201310204434.9
申请日:2013-05-28
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种黄牛IGF2基因单核苷酸多态性的检测方法及试剂盒,以包含IGF2基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,PCR扩增黄牛IGF2基因;通过DNA测序和限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术(PCR-RFLP)进行基因多态性的检测与快速分型,该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切相关的分子遗传标记。本发明提供的检测方法可用于黄牛生长性状的分子标记辅助选择,进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明检测方法简单、成本低,检测结果直接、可靠,适用于对黄牛IGF2基因突变位点的大规模的筛查和诊断。
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公开(公告)号:CN103320429A
公开(公告)日:2013-09-25
申请号:CN201310185665.X
申请日:2013-05-20
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种检测秦川牛Wnt7a基因单核苷酸多态性(SNP)的方法,该方法是以中国地方黄牛品种秦川牛基因组DNA为模版,使用Taq DNA聚合酶、Buffer(缓冲液)、Mg2+、dNTPs及引物M进行PCR扩增Wnt7a基因序列,再利用限制性内切酶Alw44I对PCR产物进行酶切,酶切完成后根据琼脂糖凝胶电泳对其片段进行分离检测,最终确定秦川牛Wnt7a基因单核苷酸多态性。因Wnt7a基因功能涉及体重、体长等生长性状,本发明提供的检测方法为Wnt7a基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础,以便用于中国秦川牛肉用生长性状的标记辅助选择,快速建立遗传资源优良的秦川牛种群。
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公开(公告)号:CN103243156A
公开(公告)日:2013-08-14
申请号:CN201310003907.9
申请日:2013-01-06
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种验证黄牛CIDEC基因SNPs位点遗传效应的方法,以包含CIDEC基因的黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增黄牛CIDEC基因不同单倍型;用限制性内切酶KpnI和XhoI分别消化PCR扩增产物和pGL3-Basic空载体后,再使用DNA连接酶将不同单倍型连接到pGL3-Basic载体上,构建pGL3-Basic-CIDEC-H1、H2、H3、H4、H8、H9表达载体,将构建成功的表达载体转染至3T3-L1细胞中,使用双荧光报告系统试剂盒检测不同单倍型的转录活性。综合不同单倍型的转录活性,以及SNP位点改变顺式作用元件的信息来验证关联分析结果。本发明提供的检测方法为验证CIDEC基因的单核苷酸多态性遗传效应奠定了基础,以便用于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS),快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号:CN101805787B
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN200910227401.X
申请日:2009-12-09
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种鸡内脂素基因9bp indel多态性检测方法及其应用,所述的检测方法包括以鸡内脂素基因9bp indel位点的位置设计引物;然后进行PCR扩增;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测该基因9bp indel多态性,9bp缺失时为DD基因型,9bp插入时为II基因型,该位点杂合的个体为ID基因型。利用上述检测结果结合鸡经济性状进行关联分析,用于鸡的辅助选择和分子育种。本发明的检测方法无需酶切,节约成本和时间;使用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,克服了琼脂糖电泳对小片段核苷酸差异检测的局限性;该方法不仅分辨率高,检测灵敏,判型准确,且该凝胶对染色方法也没有要求,溴化乙啶(EB)染色和银染均可。
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公开(公告)号:CN101921852B
公开(公告)日:2012-05-30
申请号:CN201010255603.8
申请日:2010-08-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛AdPLA基因单核苷酸多态性的方法,以包含AdPLA基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增黄牛AdPLA基因;用限制性内切酶FbaI消化PCR产物后,再进行琼脂糖凝胶电泳;根据电泳结果鉴定黄牛AdPLA基因第23076位的基因型;由于AdPLA基因功能涉及初生重、体重、日增重、体斜长、胸围等生长和体尺性状,基因型数据与这些性状关联分析后发现:18月龄和24月龄TT基因型个体的体斜长显著大于CC基因型个体(P<0.05);24月龄时TT基因型个体胸围显著大于CC基因型个体(P<0.05)。以上说明TT基因型可以作为一个提高黄牛体斜长和胸围的候选分子遗传标记。本发明提供的检测方法可以用于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS),快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号:CN101705288B
公开(公告)日:2011-12-28
申请号:CN200910219002.9
申请日:2009-11-17
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种奶山羊MFG-E8基因单核苷酸的多态性及其检测方法,以包含MFG-E8基因的待测奶山羊全基因组DNA为模板,以引物对P(包括P1,R1,newP)为引物,PCR扩增奶山羊MFG-E8基因;用限制性内切酶EcoRV消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳;根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定奶山羊MFG-E8基因第12892nt的单核苷酸多态性;由于MFG-E8基因功能涉及乳腺发育,乳脂和总固形物等奶成分,本发明提供的检测方法为MFG-E8基因的SNP与奶成分关系的建立奠定了基础,以便用于中国奶山羊奶用性状的标记辅助选择,快速建立遗传资源优良的奶山羊种群。
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公开(公告)号:CN101629209B
公开(公告)日:2011-12-28
申请号:CN200910023595.1
申请日:2009-08-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种检测黄牛Six6基因单核苷酸多态性的方法,以包含Six6基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增黄牛Six6基因;用限制性内切酶HhaI消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳;根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定黄牛Six6基因第2015位的单核苷酸多态性;由于Six6基因功能涉及日增重、体高、体重、体斜长、坐骨端宽等生长性状,本发明提供的检测方法为Six6基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础,以便用于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS),快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号:CN101921854A
公开(公告)日:2010-12-22
申请号:CN201010255639.6
申请日:2010-08-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种黄牛chemerin基因单核苷酸多态性的检测方法,其基因多态性包括:在黄牛chemerin基因第868位为A或G的碱基多态性;在黄牛chemerin基因第1021位为G或A的碱基多态性。上述黄牛chemerin基因的单核苷酸多态性为:以包含chemerin基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对(包括P和newP)为引物,PCR扩增黄牛chemerin基因;用限制性内切酶PvuII消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛chemerin基因第868位和第1021位的单核苷酸多态性;该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生产性状密切相关的分子遗传标记,中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS),快速建立遗传资源优良的黄牛种群。
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公开(公告)号:CN101893637A
公开(公告)日:2010-11-24
申请号:CN201010228956.9
申请日:2010-07-19
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种在免疫印迹实验中节约型、夹心式单面孵育抗体和检测试剂的方法,该方法包括以下内容:1)用石蜡膜-抗体-聚乙二烯二氟化物膜(PVDF膜)组成三明治式的夹心,将PVDF膜上转移有蛋白质印迹的一面朝向抗体进行单面孵育;2)用石蜡膜-检测试剂-PVDF膜组成三明治式的夹心,将PVDF膜上转移有蛋白质印迹的一面朝向检测试剂进行单面孵育。单面孵育抗体的方法所得结果不受目标蛋白的表达水平的限制,在节省80%的抗体和检测试剂的同时其检测结果与传统的免疫印迹方法所得结果一致。本发明提供的新的孵育方法对解决免疫印迹实验中昂贵的抗体费用和检测试剂费用问题提供了技术支持。
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公开(公告)号:CN101705288A
公开(公告)日:2010-05-12
申请号:CN200910219002.9
申请日:2009-11-17
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种奶山羊MFG-E8基因单核苷酸的多态性及其检测方法,以包含MFG-E8基因的待测奶山羊全基因组DNA为模板,以引物对P(包括P1,R1,newP)为引物,PCR扩增奶山羊MFG-E8基因;用限制性内切酶EcoRV消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳;根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定奶山羊MFG-E8基因第12892nt的单核苷酸多态性;由于MFG-E8基因功能涉及乳腺发育,乳脂和总固形物等奶成分,本发明提供的检测方法为MFG-E8基因的SNP与奶成分关系的建立奠定了基础,以便用于中国奶山羊奶用性状的标记辅助选择,快速建立遗传资源优良的奶山羊种群。
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