一种检测黄牛Pax3基因单核苷酸多态性的PCR-RFLP方法与应用

    公开(公告)号:CN103789406B

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201310465936.7

    申请日:2013-09-29

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测黄牛Pax3基因单核苷酸多态性的PCR?RFLP方法。首先,根据DNA池测序结果,检测到的基因多态性包括:在黄牛的Pax3基因序列转录起始位点?580位T或G的单核苷酸多态性;在Taq DNA聚合酶、Buffer(缓冲环境)、Mg++、dNTPs存在的情况下,PCR扩增黄牛Pax3基因,分别用HinfI和HaeIII限制性内切酶消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳分型。本发明提供的检测方法为Pax3基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础,以便用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择,从而快速高效、精确地培育中国优质、特色的肉牛新品系。

    一种快速检测黄牛APOA2基因多态性的方法及应用

    公开(公告)号:CN103789407A

    公开(公告)日:2014-05-14

    申请号:CN201310466317.X

    申请日:2013-09-29

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测中国地方黄牛APOA2基因序列突变的PCR-RFLP的方法,以包含APOA2基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增牛APOA2基因,发现3个突变位点;针对这3个突变位点,设计3对引物PR1、PR2和PR1,分别利用Bmgt120Ⅰ,HindⅢ和HaeⅢ三种限制性内切酶酶切PCR产物,然后用琼脂糖凝胶电泳鉴定黄牛APOA2基因3个突变位点的多态性。因此,本发明为中国地方黄牛生长性状的标记辅助选择(MAS)育种提供了一种在DNA水平筛查和鉴定与黄牛生长性状密切相关基因多态性的方法,有利于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

    一种检测黄牛Pax3基因单核苷酸多态性的PCR-RFLP方法与应用

    公开(公告)号:CN103789406A

    公开(公告)日:2014-05-14

    申请号:CN201310465936.7

    申请日:2013-09-29

    CPC classification number: C12Q1/686 C12Q2535/138

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测黄牛Pax3基因单核苷酸多态性的PCR-RFLP方法。首先,根据DNA池测序结果,检测到的基因多态性包括:在黄牛的Pax3基因序列转录起始位点-580位T或G的单核苷酸多态性;在Taq?DNA聚合酶、Buffer(缓冲环境)、Mg++、dNTPs存在的情况下,PCR扩增黄牛Pax3基因,分别用HinfI和HaeIII限制性内切酶消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳分型。本发明提供的检测方法为Pax3基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础,以便用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择,从而快速高效、精确地培育中国优质、特色的肉牛新品系。

    一种中国地方黄牛Pax7基因的单核苷酸多态性的PCR-RFLP检测方法

    公开(公告)号:CN101921857B

    公开(公告)日:2012-05-30

    申请号:CN201010255967.6

    申请日:2010-08-18

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测中国地方黄牛Pax7基因的单核苷酸多态性的PCR-RFLP方法。首先,以包含Pax7基因的黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P(包括P1(F1,R1)和P2(F2,R2))为引物,在Taq DNA聚合酶、Buffer(缓冲环境)、Mg++、dNTPs存在的情况下,PCR扩增黄牛Pax7基因;用限制性内切酶消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳,根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛Pax7基因编码区第3531位G或A的单核苷酸多态性与第56626位G或A的单核苷酸多态性。Pax7基因与家畜的早期骨骼肌发育有关,该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切相关的分子遗传标记,为黄牛的标记辅助选育(MAS)提供基础资料,进而可推广至黄牛分子育种领域。

    一种快速检测山羊Lhx3基因单核苷酸多态性的PCR-RFLP方法

    公开(公告)号:CN101921853B

    公开(公告)日:2012-05-30

    申请号:CN201010255628.8

    申请日:2010-08-18

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测山羊Lhx3基因单核苷酸多态性(SNP)的PCR-RFLP方法,其基因多态性为:在山羊Lhx3基因第5557位T或C的碱基多态性。上述山羊Lhx3基因的单核苷酸多态性的检测方法为:以包含Lhx3基因的待测山羊全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增山羊Lhx3基因;用限制性内切酶消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的片段进行琼脂糖凝胶电泳,根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定山羊第5557位的单核苷酸多态性。该方法操作简单,快速,成本低,而且检测的精确度高,便于推广应用。

    一种检测秦川牛FGF13基因拷贝数变异的方法及其应用

    公开(公告)号:CN105543352B

    公开(公告)日:2020-02-07

    申请号:CN201511030627.2

    申请日:2015-12-31

    Abstract: 本发明公开了一种检测秦川牛FGF13基因拷贝数变异的方法及其应用:基于实时定量PCR,以秦川牛基因组DNA为模板,利用一对特异性PCR引物扩增牛FGF13基因的拷贝数变异区域,同时利用另外一对特异性PCR引物扩增牛通用转录因子3基因作为对照,最后利用2‑ΔΔCt的方法计算并判定个体的拷贝数变异类型。本发明提供的方法为建立秦川牛FGF13基因拷贝数变异与生长性状之间的关联奠定了基础,有利于加快秦川牛分子标记辅助选择育种工作,该方法简单,快速,便于推广应用。

    一种黄牛chemerin基因的单核苷酸多态性检测方法

    公开(公告)号:CN101921854A

    公开(公告)日:2010-12-22

    申请号:CN201010255639.6

    申请日:2010-08-18

    Abstract: 本发明公开了一种黄牛chemerin基因单核苷酸多态性的检测方法,其基因多态性包括:在黄牛chemerin基因第868位为A或G的碱基多态性;在黄牛chemerin基因第1021位为G或A的碱基多态性。上述黄牛chemerin基因的单核苷酸多态性为:以包含chemerin基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对(包括P和newP)为引物,PCR扩增黄牛chemerin基因;用限制性内切酶PvuII消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛chemerin基因第868位和第1021位的单核苷酸多态性;该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生产性状密切相关的分子遗传标记,中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS),快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

    一种黄牛chemerin基因的单核苷酸多态性检测方法

    公开(公告)号:CN101921854B

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201010255639.6

    申请日:2010-08-18

    Abstract: 本发明公开了一种黄牛chemerin基因单核苷酸多态性的检测方法,其基因多态性包括:在黄牛chemerin基因第868位为A或G的碱基多态性;在黄牛chemerin基因第1021位为G或A的碱基多态性。上述黄牛chemerin基因的单核苷酸多态性为:以包含chemerin基因的待测黄牛全基因组DNA为模板,以引物对(包括P和newP)为引物,PCR扩增黄牛chemerin基因;用限制性内切酶PvuII消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛chemerin基因第868位和第1021位的单核苷酸多态性;该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与黄牛生产性状密切相关的分子遗传标记,中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择(MAS),快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

    一种与秦川牛生长相关的CNV标记的检测方法与应用

    公开(公告)号:CN105349674B

    公开(公告)日:2019-05-17

    申请号:CN201510867756.0

    申请日:2015-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种与秦川牛生长相关的CNV标记的检测方法与应用:所述的CNV标记是指牛SHH基因候选区域Chr 4:118264951‑118267170的拷贝数变异,该检测方法是以秦川牛的基因组DNA为模板,以引物对P1和P2为引物,通过实时荧光定量PCR分别扩增秦川牛SHH基因CNV区域和内参基因BTF3,根据log22‑ΔΔCt将结果分为插入型、缺失型和正常型,从而鉴定秦川牛SHH基因的拷贝数变异。本发明可在DNA水平上检测与秦川牛生产性状密切相关的CNV标记,可作为秦川牛生长性状的标记辅助选择的重要候选分子标记。

    一种检测秦川牛FGF13基因拷贝数变异的方法及其应用

    公开(公告)号:CN105543352A

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201511030627.2

    申请日:2015-12-31

    Abstract: 本发明公开了一种检测秦川牛FGF13基因拷贝数变异的方法及其应用:基于实时定量PCR,以秦川牛基因组DNA为模板,利用一对特异性PCR引物扩增牛FGF13基因的拷贝数变异区域,同时利用另外一对特异性PCR引物扩增牛通用转录因子3基因作为对照,最后利用2-ΔΔCt的方法计算并判定个体的拷贝数变异类型。本发明提供的方法为建立秦川牛FGF13基因拷贝数变异与生长性状之间的关联奠定了基础,有利于加快秦川牛分子标记辅助选择育种工作,该方法简单,快速,便于推广应用。

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