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公开(公告)号：CN104862426B
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201510330728.5
申请日：2015-06-15
Applicant: 西南大学柑桔研究所
Abstract: 本发明公开了一种柑桔褪绿矮化相关病毒的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法，属于分子生物学技术领域。本发明提供了柑桔褪绿矮化相关病毒LAMP检测的外引物对F3、B3和内引物对FIP、BIP，以待测样品总DNA为模板，应用上述的内外引物对在63～65℃恒温反应条件下，进行环介导恒温扩增反应60～80min，扩增完成后78～82℃反应5～10min中止反应，然后根据浑浊度或利用荧光染料染色通过颜色变化或电泳条带进行可视化判断，鉴定植株样品是否感染柑桔褪绿矮化相关病毒。本发明操作简便、检测快速、不需要昂贵的核酸扩增仪器，几十分钟就可完成对样品的检测，重复性好、准确性高、灵敏度高。
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公开(公告)号：CN105861747A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610246323.8
申请日：2016-04-20
Applicant: 西南大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明提供一种快速鉴定柑橘脉突病毒侵染植株的方法，包括如下步骤：（1）取待测植株根部，提取总RNA；（2）以提取的总RNA为模板，利用柑橘脉突病毒的特异性下游引物EVqR4进行逆转录反应，获得cDNA；（3）以步骤（2）制得的cDNA为模板，利用特异性引物EVqF4、EVqR4进行实时荧光定量RT?PCR检测，并制作标准曲线；（4）根据上述步骤（3）的检测结果判断植株的带病情况，对带病植株的病毒进行定量计算。本发明对柑橘脉突病毒侵染植株的鉴定具有速度快、准确度高及重复性强的特点，并可对植株内的CEVE病毒进行定量分析。
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公开(公告)号：CN105176934A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510678752.8
申请日：2015-10-16
Applicant: 西南大学柑桔研究所
IPC: C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种柑桔黄化脉明病毒长期离体保存方法，在有活性的柑桔黄化脉明病毒提取液中加入等体积的保护剂，颠倒混合后迅速置于液氮中2～3min，然后转移至-80℃超低温冰箱保存；所述保护剂为用PBS缓冲液配制的含13～17％葡萄糖，5～7％蛋白胨以及10～30％甘油的溶液；所述的PBS缓冲液为：将NaCl 6.8～8g，Na2HPO4·12H2O 2.2～2.9g，KH2PO40.1～0.2g，KCl 0.15～0.2g，NaN30.2～0.5g，吐温-200.5～1.5mL，1000mL去离子水溶解灭菌备用。本方法离体保存的柑桔黄化脉明病毒在保存2年后仍能保持极高的侵染活性。
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公开(公告)号：CN104862426A
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201510330728.5
申请日：2015-06-15
Applicant: 西南大学柑桔研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开了一种柑桔褪绿矮化相关病毒的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法，属于分子生物学技术领域。本发明提供了柑桔褪绿矮化相关病毒LAMP检测的外引物对F3、B3和内引物对FIP、BIP，以待测样品总DNA为模板，应用上述的内外引物对在63～65℃恒温反应条件下，进行环介导恒温扩增反应60～80min，扩增完成后78～82℃反应5～10min中止反应，然后根据浑浊度或利用荧光染料染色通过颜色变化或电泳条带进行可视化判断，鉴定植株样品是否感染柑桔褪绿矮化相关病毒。本发明操作简便、检测快速、不需要昂贵的核酸扩增仪器，几十分钟就可完成对样品的检测，重复性好、准确性高、灵敏度高。
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公开(公告)号：CN104745725A
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201510103671.5
申请日：2015-03-10
Applicant: 西南大学柑桔研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2537/143 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明提供了一种同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测引物对、试剂盒及方法。引物对包括CYVCV检测引物对：CYVCV-4f/CYVCV--4r；CCDaV检测引物对：CCDV-2f/CCDV-2r；COX基因检测引物对：Ant1/Sen1。同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测方法，包括步骤：(1)提取柑橘待测样品的总核酸；(2)将提取到的总核酸进行多重PCR扩增；(3)对扩增产物进行检测是否含有CYVCV、CCDaV和COX基因的扩增片段，从而判断样品是否感染CYVCV或CCDaV。本发明方法检测特异性强，灵敏度高，稳定性好，工序简单，节约成本，适用于大规模推广。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104328220A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410620927.5
申请日：2014-11-06
Applicant: 西南大学柑桔研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2561/101
Abstract: 本发明涉及一种柑桔黄脉病毒的RT-LAMP引物组、检测方法及试剂盒,属于分子生物学技术领域。本发明提供了柑桔黄脉病毒RT-LAMP检测的外引物对F3、B3和内引物对FIP、BIP，以待测样品总RNA为模板，应用上述的内外引物对在60～63℃恒温反应条件下，进行环介导恒温扩增反应70～100min，扩增完成后80℃再反应5～10min，然后利用琼脂糖凝胶电泳或荧光染料染色，鉴定植株样品是否感染柑桔黄脉病毒。本发明操作简便、检测快速、不需要昂贵的核酸扩增仪器，几十分钟就可完成对RNA的检测，重复性好、准确性高、灵敏度高，适合田间样品的大规模测定和茎尖嫁接脱毒苗的快速评价。
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公开(公告)号：CN101914633A
公开(公告)日：2010-12-15
申请号：CN201010281556.4
申请日：2010-09-15
Applicant: 西南大学
Abstract: 本发明公开了一种检测柑桔碎叶病毒的巢式RT-PCR检测方法和试剂盒，属于生物技术领域。本方法通过提取核酸，应用柑桔碎叶病毒特异性上游外部引物、下游外部引物对待测样品进行第一轮RT-PCR扩增，再以柑桔碎叶病毒特异性上游内部引物、下游内部引物进行第二轮PCR扩增，最后电泳判断检测样品中是否存在柑桔碎叶病毒：电泳图谱中如出现256bp特征性条带，表明该样品中存在柑桔碎叶病毒，如果没有出现256bp特征性条带，表明该样品中不存在柑桔碎叶病毒。本发明还相应地建立了检测试剂盒，可特异、灵敏、高效地检测柑桔碎叶病毒，适用于田间样品检测、CTLV流行监控、脱毒苗木鉴定等多种用途。
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公开(公告)号：CN113557957A
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN202110856412.5
申请日：2021-07-28
Applicant: 西南大学
Inventor： 李中安
Abstract: 本发明公开了一种蓝标型两系法杂交小麦系统的选育方法及应用。本发明创建了对隐性核不育基因ms1具有完全恢复能力且含表现剂量效应和胚乳质感的蓝粒基因Ba和外源恢复基因Rf的外源易位染色体【T4AgL(含Ba的片段)‑4BL(靠着丝点的片段).4thS和T4AgL(含Ba的片段)‑4BL(靠着丝点的片段).4thS(含Rf的片段)】以及外源易位端体【T4AgL(含Ba的片段)‑4thS(含Rf的片段)、T4thS(含Rf的片段)‑4AgL(含Ba的片段).和T4thS(含Rf的片段)‑4AgL(含Ba的片段)‑4BL(靠着丝点的片段).】。完成了蓝标型两系法杂交小麦系统的改进。
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公开(公告)号：CN111602527A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010670919.7
申请日：2020-07-13
Applicant: 西南大学
Abstract: 本发明公开了一种柑橘陶粒扦插方法，采用陶粒和土壤作为基质用于扦插柑橘，陶粒的成本较低，具有很高的孔隙度而透气性非常好；内部多孔，可给予扦插柑橘枝梢一定的湿润小环境，同时下部的土壤也可以为柑橘提供营养。本申请为柑橘的扦插培养提供了新方案。
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