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公开(公告)号：CN108300761A
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201810193251.4
申请日：2018-03-09
IPC: C12Q1/66 , C12Q1/6851 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种筛选miR-574-5p靶基因的方法，该方法以山羊基因组DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用MAP3K9引物在PCR条件下进行扩增MAP3K9基因3'UTR区；构建双荧光素酶报告系统，检测荧光素酶活性，结果显示，miR-574-5p降低了荧光素酶的活性，初步确定MAP3K9为miR-574-5p的靶基因；采用RT-qPCR和Western blot方法验证miR-574-5p对MAP3K9基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果显示：miR-574-5p可以抑制MAP3K9基因在mRNA和蛋白水平上的表达，进一步确定miR-574-5p可与MAP3K93'UTR结合，MAP3K9是miR-574-5p的靶基因，为进一步研究miR-574-5p对奶山羊乳腺发育和泌乳功能的影响奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107177662A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710565754.5
申请日：2017-07-12
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: C12P33/20
Abstract: 本发明属于微生物次生代谢产物技术领域，公开一种薯蓣皂素的发酵制备方法，采用薯蓣内生菌进行发酵，发酵方法包括下述步骤：1)将薯蓣内生菌接入种子培养基中进行种子培养，得到发酵菌种；2)向发酵培养基中加入消泡剂，将步骤1)所述发酵菌种接入盛装有发酵培养基的发酵罐中进行发酵，开启搅拌，设定发酵条件为发酵温度28℃、通气量1.0‑5.5L/min；3)从发酵产物中分离得到所述薯蓣皂素。本发明建立了小罐发酵生产薯蓣皂素的基本工艺，显著提高了薯蓣皂素的产量，克服了现有薯蓣皂素生产产量低、耗能高的技术缺陷，为盾叶薯蓣内生菌的开发利用提供了研究基础。
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公开(公告)号：CN104327139A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410507918.5
申请日：2014-09-28
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: Y02P20/582 , C07H19/16 , C07H1/08
Abstract: 本发明公开了一种虫草素晶体的制备方法，包括下述步骤：1)以培养蛹虫草子座剩余的基质为原料，将基质粉碎后以有机溶剂进行浸提，离心收集上清液；2)利用大孔树脂吸附色谱柱对离心后的粗液进行纯化；3)步骤2)所得虫草素采用乙醇、硫酸铵组成的双水相体系进行富集并收集样品；4)装层析柱，甲醇溶液洗脱，洗脱液减压蒸馏浓缩，浓缩的洗脱液甲醇洗脱，洗脱液结晶得到虫草素晶体。本发明公开的虫草素晶体的制备方法降低了生产成本，并且提高了虫草素纯度，避免了有机溶剂残留。
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公开(公告)号：CN103012228B
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201210500980.2
申请日：2012-11-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07C403/24
Abstract: 本发明公开了一种银离子螯合色谱柱用于分离纯化虾青素的方法，包括以下步骤：(1)制备银离子螯合氨基化硅胶；(2)在垂直固定的色谱柱内依次加入少量石油醚和石英砂后，再加入石油醚浸泡处理过的银离子螯合氨基化硅胶，使颗粒自由沉降并用石油醚平衡；(3)将虾青素粗提液加入层析柱中；(4)以石油醚洗柱至流出液为无色；(5)以正己烷与丙酮混合液洗脱至流出液变为无色，收集虾青素。本发明步骤简单、时间短、回收率高、有机溶剂消耗少、环境污染小、生产成本低，且易于工业放大。由本发明产生的虾青素可以用于饲料、食品、化妆品、药品等行业。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103468819A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201310449829.5
申请日：2013-09-27
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种利用双基因聚合效应选育奶山羊产奶性状的方法，以奶山羊基因组DNA为模板，利用2对引物分别扩增催乳素受体（PRLR）基因的外显子9和乳蛋白转录因子（ELF5）基因内含子1，以浓度为1.5%的琼脂糖凝胶电泳对各扩增产物进行大小判定，采用DNA测序技术筛查2对引物扩增产物的位点突变，然后利用浓度为3.5%的琼脂糖凝胶电泳对PRLR和ELF5基因的2个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析，分析不同基因型组合与产奶性状之间的关系，筛选最佳基因型组合。
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公开(公告)号：CN102631521B
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210129469.6
申请日：2012-04-28
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07J71/00 , A61K36/8945 , A61P35/00 , A61P31/10 , A61P9/00 , A61P3/10 , A61P37/02 , A61K125/00
Abstract: 本发明公开了一种双水相萃取薯蓣皂苷的方法。本方法以乙醇/硫酸铵双水相体系作为提取剂，采用超声波/SDS协同辅助双水相体系萃取薯蓣皂苷，然后通过酸水解生产薯蓣皂苷元。采用本方法，每克薯蓣干粉可得到27.5mg以上薯蓣皂苷元，纯度达到85％以上，单次萃取回收率超过60％。本方法与传统的酸水解方法比较，具有提取快速，酸用量少，污染小等优点；与一般的盐/聚合物双水相比较具有成本低、操作容易、上下相溶剂易回收等优点。
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公开(公告)号：CN103012228A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210500980.2
申请日：2012-11-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07C403/24
Abstract: 本发明公开了一种银离子螯合色谱柱用于分离纯化虾青素的方法，包括以下步骤：(1)制备银离子螯合氨基化硅胶；(2)在垂直固定的色谱柱内依次加入少量石油醚和石英砂后，再加入石油醚浸泡处理过的银离子螯合氨基化硅胶，使颗粒自由沉降并用石油醚平衡；(3)将虾青素粗提液加入层析柱中；(4)以石油醚洗柱至流出液为无色；(5)以正己烷与丙酮混合液洗脱至流出液变为无色，收集虾青素。本发明步骤简单、时间短、回收率高、有机溶剂消耗少、环境污染小、生产成本低，且易于工业放大。由本发明产生的虾青素可以用于饲料、食品、化妆品、药品等行业。
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公开(公告)号：CN101845507B
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201010199506.1
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种检测山羊促性腺激素释放激素基因外显子4和生长分化因子9基因外显子2三个碱基突变多态性的方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用2对引物P1和P2在PCR条件下进行扩增，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1和P2的PCR扩增产物，发现这两个扩增位点存在3个碱基的突变，然后对两个基因的SNPs进行基因分型和基因频率分析，以及与布尔山羊和西农萨能奶山羊的产羔性状之间进行关联分析；结果表明：GnRH基因外显子4(包含部分内含子3和3′非翻译区)和GDF9基因外显子2基因由引物P1和P2检测的SNPs位点可用作山羊产羔性状选择的分子标记。
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公开(公告)号：CN102366518A
公开(公告)日：2012-03-07
申请号：CN201110313919.2
申请日：2011-10-17
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种超声波辅助乙醇/正丁醇双水相萃取薯蓣皂苷的方法，以乙醇/正丁醇双水相体系作为提取剂，用超声波辅助双水相体系萃取薯蓣皂苷，再用酸水解得到薯蓣皂苷元。每克薯蓣干粉可得到32mg以上薯蓣皂苷元，纯度达到90％以上，回收率超过85％。本发明与传统的酸水解和索氏提取方法比较，具有条件温和，提取快速，容易放大，酸用量少，污染小等优点；与一般的盐/短链醇双水相比较具有萃取完全，上下相溶剂皆可回收重复利用，高效，绿色，环保等优点。
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