-
公开(公告)号:CN112575061A
公开(公告)日:2021-03-30
申请号:CN202011570847.5
申请日:2020-12-26
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/6806
Abstract: 本发明属于核酸提取技术领域,具体为一种快速一步法提取组织DNA的方法,将组织加入快速一步法核酸提取试剂中,静置,完成组织DNA的提取;所述快速一步法核酸提取试剂包括下述原料:氢氧化钠(NaOH)、乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA)、醋酸钾(KAc)。采用本发明的提取方法,组织只需与试剂静置2~6min,无须多步反应和实验设备,所提取的组织DNA浓度与纯度均较好;静置2‑6分重点的5个不同时间点的上清,稀释10倍作为PCR扩增模板时,扩增产物电泳条带均较清晰。因此,本发明方法对组织进行现场核酸的即时检验(point‑of‑care testing,POCT)具有极其重要的意义。
-
公开(公告)号:CN106995841B
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN201710167334.1
申请日:2017-03-20
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种转基因大豆检测用多重PCR试剂盒及检测方法,可快速检测我国农业部批准进口的12种转基因大豆,包括MON87701、GTS40‑3‑2、MON89788、CV127、A2704、A5547、DP356043、DP305423、MON87769、MON87708、305423×40‑3‑2、MON87701×MON89788;本发明公开的多重PCR试剂盒基于“公共引物”介导的多重PCR方法,包括公共引物、多重引物、多重PCR体系检测;两步退火温度法提高多重PCR体系的特异性、敏感性,该多重PCR方法具有包容性,可继续增加检测靶标,有利于提高多重PCR的检测通量。本发明具有灵敏度高,经济、快速、操作简单等优点,可应用于食品检测。
-
公开(公告)号:CN106995841A
公开(公告)日:2017-08-01
申请号:CN201710167334.1
申请日:2017-03-20
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种转基因大豆检测用多重PCR试剂盒及检测方法,可快速检测我国农业部批准进口的12种转基因大豆,包括MON87701、GTS40‑3‑2、MON89788、CV127、A2704、A5547、DP356043、DP305423、MON87769、MON87708、305423×40‑3‑2、MON87701×MON89788;本发明公开的多重PCR试剂盒基于“公共引物”介导的多重PCR方法,包括公共引物、多重引物、多重PCR体系检测;两步退火温度法提高多重PCR体系的特异性、敏感性,该多重PCR方法具有包容性,可继续增加检测靶标,有利于提高多重PCR的检测通量。本发明具有灵敏度高,经济、快速、操作简单等优点,可应用于食品检测。
-
公开(公告)号:CN104293962B
公开(公告)日:2017-01-11
申请号:CN201410556794.X
申请日:2014-10-20
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种筛选公共引物的方法,具体为选择待扩增靶序列作为模板,设计一对特异引物与m条正向公共引物、n条反向公共引物,在特异引物的5'端分别连接公共引物、酶切位点和保护碱基组合成“长引物”,然后用“长引物”对模板进行PCR扩增,得到与公共引物序列同源的PCR产物,将这段模板序列导入质粒载体,通过转化将质粒转移进入大肠杆菌感受态细胞,获得公共引物的质粒模板;利用此质粒模板,通过排列组合可实现m×n对公共引物的敏感性筛选。因此,本发明可以达到高效筛选公共引物的目的,具有高效、快速和操作简单的优点。
-
公开(公告)号:CN104293962A
公开(公告)日:2015-01-21
申请号:CN201410556794.X
申请日:2014-10-20
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2525/131
Abstract: 本发明公开了一种筛选公共引物的方法,具体为选择待扩增靶序列作为模板,设计一对特异引物与m条正向公共引物、n条反向公共引物,在特异引物的5'端分别连接公共引物、酶切位点和保护碱基组合成“长引物”,然后用“长引物”对模板进行PCR扩增,得到与公共引物序列同源的PCR产物,将这段模板序列导入质粒载体,通过转化将质粒转移进入大肠杆菌感受态细胞,获得公共引物的质粒模板;利用此质粒模板,通过排列组合可实现m×n对公共引物的敏感性筛选。因此,本发明可以达到高效筛选公共引物的目的,具有高效、快速和操作简单的优点。
-
公开(公告)号:CN103977484A
公开(公告)日:2014-08-13
申请号:CN201410203741.X
申请日:2014-05-14
Applicant: 苏州大学张家港工业技术研究院
Abstract: 本发明公开了一种气动磁力蓄能式无针注射器,包括具有内腔的缸筒、固设于缸筒前端的前端盖、固设于缸筒后端的后端盖、安装在前端盖上的无针安瓿组件、可沿前后方向移动地设于缸筒内腔中的冲击件,后端盖上固定地设有可磁力吸合所述冲击件的磁铁,后端盖上还开设有与缸筒的内腔相连通的气流通道,冲击件的后部固设有可堵塞气流通道的口部的密封件,无针注射器还包括用于向气流通道中充入压缩气体的气源装置,无针安瓿组件至少包括可前后移动的活塞杆。通过气源装置向气流通道中充入压缩气体,当气流通道内的气压力达到一定值时,冲击件克服磁铁的磁力向前冲击而实现注射过程。该无针注射器结构简单,制作工艺性优良,且具有良好的使用性能。
-
公开(公告)号:CN103937891A
公开(公告)日:2014-07-23
申请号:CN201410153342.7
申请日:2014-04-16
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6858 , C12Q2535/125 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明属于基因检测领域,具体涉及一种检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒,包括:常规多重PCR组件、针对常见白血病融合基因的嵌合引物和公共引物对。嵌合引物为在针对BCR/ABL、PML/RARα、AML1/ETO、E2A/PBX1常见白血病融合基因7个剪切异构体的特异引物5’端加上公共引物的序列。利用本发明公开的检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒可同时检测包括AML1/ETO、BCR/ABLe1a2、BCR/ABLe13a2、BCR/ABLe14a2、PML/RARαL型、PML/RARαS型和E2A/PBX1I型7种发病率高的白血病融合基因,不仅可节约试剂使用量和降低检测成本,同时提高了检测效率。此外,本发明的检测敏感性最高可达10拷贝/25μL,并且操作简单,临床检出率高,具有临床推广应用价值。
-
公开(公告)号:CN102352411A
公开(公告)日:2012-02-15
申请号:CN201110298119.8
申请日:2011-09-29
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种多重PCR扩增方法以及用于多重PCR扩增的试剂盒;所述多重PCR扩增方法包括了设计公共引物以及带有公共引物的多重引物的步骤,所述公共引物设计应遵循两条原则:(1)任何优化的扩增条件下,公共引物与待测模板进行扩增时无特异性产物;(2)当带有公共引物的多重引物扩增得到特异性产物时,公共引物对具有扩增所述特异性产物的能力;然后配置多重PCR体系进行扩增。本发明由于公共引物的引入,使反应体系内的序列特异性引物对浓度下降4个以上对数级别,如此低浓度的多重引物在同一个反应体系中出现相互作用的几率将大大降低,不仅可解决不同引物对相互干扰这一多重PCR中的技术瓶颈,亦为加入新的引物对、增加检测基因数量创造前提条件。
-
公开(公告)号:CN116445661A
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202310229487.X
申请日:2023-03-10
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种GI、GII型诺如病毒现场分型检测的方法,包括以下步骤,在引物存在下,将模板进行双重RT‑RPA反应,然后将反应后的扩增产物分别加入到GI、GII型诺如病毒的CRISPR/Cas12a检测体系,荧光分析,完成GI、GII型诺如病毒现场分型检测。本发明覆盖诺如病毒GI、GII各个亚型,与轮状病毒和肠道腺病毒等常见胃肠炎病毒均无交叉反应,并能有效区分GI和GII两种基因型,而未发生脱靶现象,对于GI、GII基因型诺如病毒的最低检测限分别为102 copies/µL和1 copies/µL。整个检测过程在37℃恒温条件下,35min内即可完成,可以直接利用紫外电筒进行现场检测,无须实验室仪器以及专业人员操作。
-
公开(公告)号:CN106868218B
公开(公告)日:2020-06-23
申请号:CN201710204099.0
申请日:2017-03-30
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种用于病毒性脑炎快速诊断的多重PCR试剂盒,能够快速检测六种病毒性脑炎,单纯疱疹病毒1型(HSVⅠ)、单纯疱疹病毒2型(HSVⅡ)、水痘带状疱疹病毒(VZV)、EB病毒(EBV)、肠道病毒71型(EV71)及巨细胞病毒(CMV);本发明公开的6对引物能够特异性扩增HSVⅠ、HSVⅡ、EBV、CMV、EV71、VZV,引物之间互不干扰,构建的mPCR体系敏感性达到102~103拷贝;针对临床疑似病毒性脑炎患者15例脑脊液标本,本mPCR体系检测检出6份阳性标本,其中HSVⅠ5例,CMV1例;本发明设计的mPCR体系具有高敏感性、特异性和稳定性及操作简单的优点,能同时快速检测6种常见病毒,有助于临床病毒性脑炎的快速诊断。
-
-
-
-
-
-
-
-
-