公开(公告)号：CN106995841B

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN201710167334.1

申请日：2017-03-20

Applicant: 苏州大学

Inventor： 孙万平 ,  沈苏南 ,  王晓囡 ,  季建刚 ,  张丽君 ,  薛满

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种转基因大豆检测用多重PCR试剂盒及检测方法，可快速检测我国农业部批准进口的12种转基因大豆，包括MON87701、GTS40‑3‑2、MON89788、CV127、A2704、A5547、DP356043、DP305423、MON87769、MON87708、305423×40‑3‑2、MON87701×MON89788；本发明公开的多重PCR试剂盒基于“公共引物”介导的多重PCR方法，包括公共引物、多重引物、多重PCR体系检测；两步退火温度法提高多重PCR体系的特异性、敏感性，该多重PCR方法具有包容性，可继续增加检测靶标，有利于提高多重PCR的检测通量。本发明具有灵敏度高，经济、快速、操作简单等优点，可应用于食品检测。

公开(公告)号：CN106995841A

公开(公告)日：2017-08-01

申请号：CN201710167334.1

申请日：2017-03-20

Applicant: 苏州大学

Inventor： 孙万平 ,  沈苏南 ,  王晓囡 ,  季建刚 ,  张丽君 ,  薛满

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种转基因大豆检测用多重PCR试剂盒及检测方法，可快速检测我国农业部批准进口的12种转基因大豆，包括MON87701、GTS40‑3‑2、MON89788、CV127、A2704、A5547、DP356043、DP305423、MON87769、MON87708、305423×40‑3‑2、MON87701×MON89788；本发明公开的多重PCR试剂盒基于“公共引物”介导的多重PCR方法，包括公共引物、多重引物、多重PCR体系检测；两步退火温度法提高多重PCR体系的特异性、敏感性，该多重PCR方法具有包容性，可继续增加检测靶标，有利于提高多重PCR的检测通量。本发明具有灵敏度高，经济、快速、操作简单等优点，可应用于食品检测。

公开(公告)号：CN104293962B

公开(公告)日：2017-01-11

申请号：CN201410556794.X

申请日：2014-10-20

Applicant: 苏州大学

Inventor： 孙万平 ,  段欠欠 ,  王萃 ,  胡颖熹 ,  沈苏南 ,  朱雪明

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种筛选公共引物的方法，具体为选择待扩增靶序列作为模板，设计一对特异引物与m条正向公共引物、n条反向公共引物，在特异引物的5'端分别连接公共引物、酶切位点和保护碱基组合成“长引物”，然后用“长引物”对模板进行PCR扩增，得到与公共引物序列同源的PCR产物，将这段模板序列导入质粒载体，通过转化将质粒转移进入大肠杆菌感受态细胞，获得公共引物的质粒模板；利用此质粒模板，通过排列组合可实现m×n对公共引物的敏感性筛选。因此，本发明可以达到高效筛选公共引物的目的，具有高效、快速和操作简单的优点。

公开(公告)号：CN104293962A

公开(公告)日：2015-01-21

申请号：CN201410556794.X

申请日：2014-10-20

Applicant: 苏州大学

Inventor： 孙万平 ,  段欠欠 ,  王萃 ,  胡颖熹 ,  沈苏南 ,  朱雪明

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q2525/131

Abstract: 本发明公开了一种筛选公共引物的方法，具体为选择待扩增靶序列作为模板，设计一对特异引物与m条正向公共引物、n条反向公共引物，在特异引物的5'端分别连接公共引物、酶切位点和保护碱基组合成“长引物”，然后用“长引物”对模板进行PCR扩增，得到与公共引物序列同源的PCR产物，将这段模板序列导入质粒载体，通过转化将质粒转移进入大肠杆菌感受态细胞，获得公共引物的质粒模板；利用此质粒模板，通过排列组合可实现m×n对公共引物的敏感性筛选。因此，本发明可以达到高效筛选公共引物的目的，具有高效、快速和操作简单的优点。

公开(公告)号：CN108866224B

公开(公告)日：2022-03-11

申请号：CN201810517389.5

申请日：2018-05-25

Applicant: 苏州市食品检验检测中心 ,  苏州大学

Inventor： 薛满 ,  孙万平 ,  王晓囡 ,  沈苏南 ,  刘婉婉 ,  陶静 ,  马建婷

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了十三种转基因大豆检测用多重PCR试剂盒及检测方法，可快速检测我国农业部批准进口的13种转基因大豆，包括MON87701、GTS40‑3‑2、MON89788、CV127、A2704、A5547、DP356043、DP305423、MON87769、MON87708、305423×40‑3‑2、MON87701×MON89788、MON87705；本发明公开的多重PCR试剂盒基于“公共引物”介导的多重PCR方法，包括公共引物、多重引物、多重PCR体系检测；新设计的退火温度法提高多重PCR体系的特异性、敏感性，该多重PCR方法具有包容性，可继续增加检测靶标，有利于提高多重PCR的检测通量。本发明具有灵敏度高，经济、快速、操作简单等优点，可应用于食品检测。

公开(公告)号：CN108866224A

公开(公告)日：2018-11-23

申请号：CN201810517389.5

申请日：2018-05-25

Applicant: 苏州市食品检验检测中心 ,  苏州大学

Inventor： 薛满 ,  孙万平 ,  王晓囡 ,  沈苏南 ,  刘婉婉 ,  陶静 ,  马建婷

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了十三种转基因大豆检测用多重PCR试剂盒及检测方法，可快速检测我国农业部批准进口的13种转基因大豆，包括MON87701、GTS40‑3‑2、MON89788、CV127、A2704、A5547、DP356043、DP305423、MON87769、MON87708、305423×40‑3‑2、MON87701×MON89788、MON87705；本发明公开的多重PCR试剂盒基于“公共引物”介导的多重PCR方法，包括公共引物、多重引物、多重PCR体系检测；新设计的退火温度法提高多重PCR体系的特异性、敏感性，该多重PCR方法具有包容性，可继续增加检测靶标，有利于提高多重PCR的检测通量。本发明具有灵敏度高，经济、快速、操作简单等优点，可应用于食品检测。