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公开(公告)号：CN102146461B
公开(公告)日：2013-02-27
申请号：CN201110029800.2
申请日：2011-01-27
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于基因突变检测领域，具体涉及一种高敏感性的TP53基因点突变检测方法及其试剂盒。该方法包括以下步骤：1）按照常规技术提取DNA；2）然后配置含有特异性引物对、DNA聚合酶、PCR常规组件的PCR反应体系；3）对步骤1）所得DNA进行PCR扩增，并对PCR产物进行分析，判断是否发生突变；其中特异性引物对中正义引物的倒数第二个碱基为硫代修饰的碱基；所述DNA聚合酶为高保真DNA聚合酶Pfu；本发明具有快速，特异性高，可靠性高，灵敏，条件依赖少，适用平台广等优点。
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公开(公告)号：CN102146461A
公开(公告)日：2011-08-10
申请号：CN201110029800.2
申请日：2011-01-27
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于基因突变检测领域，具体涉及一种高敏感性的TP53基因点突变检测方法及其试剂盒。该方法包括以下步骤：1）按照常规技术提取DNA；2）然后配置含有特异性引物对、DNA聚合酶、PCR常规组件的PCR反应体系；3）对步骤1）所得DNA进行PCR扩增，并对PCR产物进行分析，判断是否发生突变；其中特异性引物对中正义引物的倒数第二个碱基为硫代修饰的碱基；所述DNA聚合酶为高保真DNA聚合酶Pfu；本发明具有快速，特异性高，可靠性高，灵敏，条件依赖少，适用平台广等优点。
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公开(公告)号：CN102352411A
公开(公告)日：2012-02-15
申请号：CN201110298119.8
申请日：2011-09-29
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种多重PCR扩增方法以及用于多重PCR扩增的试剂盒；所述多重PCR扩增方法包括了设计公共引物以及带有公共引物的多重引物的步骤，所述公共引物设计应遵循两条原则：（1）任何优化的扩增条件下，公共引物与待测模板进行扩增时无特异性产物；（2）当带有公共引物的多重引物扩增得到特异性产物时，公共引物对具有扩增所述特异性产物的能力；然后配置多重PCR体系进行扩增。本发明由于公共引物的引入，使反应体系内的序列特异性引物对浓度下降4个以上对数级别，如此低浓度的多重引物在同一个反应体系中出现相互作用的几率将大大降低，不仅可解决不同引物对相互干扰这一多重PCR中的技术瓶颈，亦为加入新的引物对、增加检测基因数量创造前提条件。
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公开(公告)号：CN102321737A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110206042.7
申请日：2011-07-22
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明提供一种检测CCR5-Δ32基因突变的方法及用于该方法的引物，具体涉及通过设计一组引物，以样本基因组DNA为模板，利用电泳分离PCR扩增所得产物所得条带数目判断CCR5-Δ32基因突变类型，其特征在于1)设计并制备一组检测CCR5基因突变的引物，所述引物包括针对CCR5-Δ32的基因突变设计的三条特异性PCR引物，引物具有SEQ ID No.1、2、3的核苷酸序列。2)通过观测PCR扩增产物电泳后的条带数目，判断样本的CCR5-Δ32的基因型。
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公开(公告)号：CN102352411B
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201110298119.8
申请日：2011-09-29
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种多重PCR扩增方法以及用于多重PCR扩增的试剂盒；所述多重PCR扩增方法包括了设计公共引物以及带有公共引物的多重引物的步骤，所述公共引物设计应遵循两条原则：（1）任何优化的扩增条件下，公共引物与待测模板进行扩增时无特异性产物；（2）当带有公共引物的多重引物扩增得到特异性产物时，公共引物对具有扩增所述特异性产物的能力；然后配置多重PCR体系进行扩增。本发明由于公共引物的引入，使反应体系内的序列特异性引物对浓度下降4个以上对数级别，如此低浓度的多重引物在同一个反应体系中出现相互作用的几率将大大降低，不仅可解决不同引物对相互干扰这一多重PCR中的技术瓶颈，亦为加入新的引物对、增加检测基因数量创造前提条件。
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