特异启动子NtR2驱动AhRESS在花生发状根系产白藜芦醇的方法

    公开(公告)号:CN105505990B

    公开(公告)日:2019-03-12

    申请号:CN201610025960.2

    申请日:2016-01-15

    Abstract: 本发明涉及特异启动子NtR2驱动AhRESS在花生发状根系产白藜芦醇的方法,属于植物基因工程领域。利用发根农杆菌介导将烟草根特异启动子NTR2驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS载体pBI121‑NTR2‑AhRESS遗传转化花生,获得特异表达AhRESS的转基因花生发状根。利用有机溶剂浸提法提取转基因花生发状根中白藜芦醇,经高效液相色谱(HPLC)测定,其白藜芦醇含量最高为66.16μg/g(FW),是未转基因发状根中白藜芦醇含量的3倍。本发明为利用烟草根特异启动子驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS在花生发状根中特异表达,进而生产白藜芦醇提供了良好的基础。

    NtRLK2基因在烟草抗青枯病中的应用

    公开(公告)号:CN106867979A

    公开(公告)日:2017-06-20

    申请号:CN201710029165.5

    申请日:2017-01-16

    Abstract: 本发明涉及烟草青枯病抗性相关LRR类受体蛋白激酶类基因NtRLK2的序列和功能上的应用,属于分子生物学技术领域,本发明通过基因芯片分析,获得了一个受青枯菌诱导表达上调2倍的LRR类受体蛋白激酶类基因NtRLK2部分片段,经RACE技术获得其全长cDNA序列,从烟草高抗青枯病品种系3中克隆了该基因并用于构建超表达和RNAi表达载体,转入烟草中感青枯病品种翠碧一号,接种鉴定表明该基因的RNAi干扰明显增强烟草植株对青枯菌的抗病性,初步预测该基因可能是内源抗病基因的互作基因,抑制了抗病基因的表达。这将为烟草青枯病抗病遗传育种奠定了基础。

    一种花生高油酸隐性突变系Ahfad2a-1植株的选育方法

    公开(公告)号:CN105519432A

    公开(公告)日:2016-04-27

    申请号:CN201610025964.0

    申请日:2016-01-15

    CPC classification number: A01H1/04 A01H1/02 A01H1/06 C12Q1/6895 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明公开了一种花生高油酸隐性突变系Ahfad2a-1植株的选育方法,属于植物育种方法,(1)选择花生种子;(2)进行γ射线诱变处理,(3)将处理后的M0代种子种植于大田。(4)对诱变处理后代进行油酸含量的定向选择,连续5代正向选育,利用近红外无伤检测技术进行单粒检测,获得O/L高于3.0的株系进行鉴定。(5)提取M5代种子筛选出的油酸/亚油酸比值大于3.0的株系叶片DNA,以Ahfad2a基因特异引物进行PCR,对PCR产物进行测序分析,筛选Ahfad2a-1突变体。(6)用Ahfad2a-1突变体做父本,以高产、优质、抗逆性强、综合性状好的优良品种为母本进行杂交,获得高油酸高产优质花生品种。

    特异启动子NtR2驱动AhRESS在花生发状根系产白藜芦醇的方法

    公开(公告)号:CN105505990A

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201610025960.2

    申请日:2016-01-15

    CPC classification number: C12N15/8205 C12N15/8243

    Abstract: 本发明涉及特异启动子NtR2驱动AhRESS在花生发状根系产白藜芦醇的方法,属于植物基因工程领域。利用发根农杆菌介导将烟草根特异启动子NTR2驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS载体pBI121-NTR2-AhRESS遗传转化花生,获得特异表达AhRESS的转基因花生发状根。利用有机溶剂浸提法提取转基因花生发状根中白藜芦醇,经高效液相色谱(HPLC)测定,其白藜芦醇含量最高为66.16μg/g(FW),是未转基因发状根中白藜芦醇含量的3倍。本发明为利用烟草根特异启动子驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS在花生发状根中特异表达,进而生产白藜芦醇提供了良好的基础。

    一种诱导转基因花生发状根生物反应器产白藜芦醇的方法

    公开(公告)号:CN105463016A

    公开(公告)日:2016-04-06

    申请号:CN201610025963.6

    申请日:2016-01-15

    Abstract: 本发明涉及一种诱导转基因花生发状根生物反应器产白藜芦醇的方法,属于生物技术领域。利用发根农杆菌介导将烟草根特异启动子NtR12驱动花生白藜芦醇合酶基因AhRESS载体pBI121-NtR12-AhRESS遗传转化花生,获得特异表达AhRESS的转基因花生发状根。建立了高产白藜芦醇的优化生产体系,花生发状根培养至第11天,经20mM的醋酸钠处理24h,发状根中白藜芦醇含量可提高0.8倍,是非转基因花生根系的5.34倍,含量达到148.62μg/g(FW),同时培养基中白藜芦醇为80.86μg/100mL,是花生本身根系白藜芦醇含量的7倍多。本发明为利用生物反应器培养花生发状根进而生产白藜芦醇奠定了基础。

    花生LRR-RLK基因及在烟草抗青枯病中的应用

    公开(公告)号:CN104480118A

    公开(公告)日:2015-04-01

    申请号:CN201410741648.4

    申请日:2014-12-09

    Abstract: 本发明涉及一种花生青枯病抗性相关LRR类受体蛋白激酶类基因AhRLK6及其超表达载体的构建,更涉及到了该花生AhRLK6基因在烟草抗青枯病基因工程中的应用,属于植物基因工程技术领域。该基因含有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。构建超表达载体转化翠碧一号烟草,通过分子检测对转基因植株进行青枯菌接种,其在烟草中超表达可显著提高转基因烟草对青枯病的抗性,表明AhRLK6可能参与植物对青枯菌的防御反应,这将为植物青枯病抗病遗传育种奠定了基础,将大力促进烟草抗青枯病基因工程的发展与应用。

    花生NBS-LRR基因及其在烟草抗青枯病中的应用

    公开(公告)号:CN104480117A

    公开(公告)日:2015-04-01

    申请号:CN201410741491.5

    申请日:2014-12-09

    Abstract: 本发明涉及一种花生青枯病抗性相关基因AhRRS5及其超表达载体的构建及在烟草抗青枯病基因工程中的应用,属于植物基因工程技术领域。该基因含有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。构建过量表达载体转化烟草,通过对转基因植株进行青枯菌接种鉴定和分子检测,其在烟草中超表达可显著提高转基因烟草对青枯病的抗性,表明AhRRS5在植物应答青枯病菌侵染中起着重要的调节作用,这对植物的抗青枯病基因工程育种应用有重要意义,将大力促进烟草抗青枯病基因工程的发展与应用。

    利用根特异启动子与抗病基因培育烟草抗青枯病品系方法

    公开(公告)号:CN101880673A

    公开(公告)日:2010-11-10

    申请号:CN201010227467.1

    申请日:2010-07-15

    Abstract: 本发明提供了一种利用根特异启动子与抗病RIP基因培育烟草抗青枯病品系的方法,包括根特异启动子的克隆,抗病基因RIP的克隆,抗烟草青枯病表达载体的构建,培育抗青枯病转基因烟草,以及接种转基因烟草青枯菌进行材料的筛选鉴定。将烟草根特异启动子运用于烟草分子育种上,提高了转基因安全性,由根特异启动子携带光谱抗病基因在烟草根和茎部表达,对烟草青枯病有较强的抵抗能力甚至达到免疫功能。通过对转基因烟草进行RT-PCR鉴定,表明了RIP基因不在烟草叶片表达,通过对转基因烟草进行接种青枯菌进行抗性鉴定,得到了高抗烟草青枯病的转基因新材料,为培养高抗烟草青枯病的转基因植株奠定了有利的基础。

    一种花生C2结构域蛋白编码基因AhSRC2及其应用

    公开(公告)号:CN115029355B

    公开(公告)日:2023-09-19

    申请号:CN202210675137.1

    申请日:2022-06-15

    Abstract: 本发明公开了一种C2结构域蛋白编码基因AhSRC2及其应用。所述AhSRC2基因含有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。构建原核表达载体pET32a‑AhSRC2,诱导表达纯化获得融合表达蛋白,通过Gateway系统构建GFP融合表达载体并对AhSRC2基因的表达进行亚细胞定位,同时基于Gateway系统构建CaMV 35S启动子驱动的植物表达载体农杆菌介导转化感青枯病品种红花大金元,通过对转基因植株进行分子检测和青枯菌接种鉴定,AhSRC2在烟草中过表达可显著提高转基因烟草对青枯病的抗性,表明AhSRC2可能参与了植物对青枯病的抗性反应,这对植物的抗青枯病基因工程育种应用有重要意义。

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