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公开(公告)号：CN104371935B
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201410570517.4
申请日：2014-10-23
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明提供一种博伊丁假丝酵母，它的保藏编号为CGMCC9446，完整命名为博伊丁假丝酵母T1。本发明还进一步提供该博伊丁假丝酵母T1在催化合成阿托伐他汀中间体中的应用，具体为以6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基已酸叔丁酯为底物、催化合成6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯，该博伊丁假丝酵母可以表达高立体选择性的羰基还原酶，使6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基已酸叔丁酯的转化率达到99％，产物6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯的d.e.值达到100％。
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公开(公告)号：CN104371935A
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201410570517.4
申请日：2014-10-23
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
CPC classification number: C12N1/16 , C12P13/002 , C12R1/645
Abstract: 本发明提供一种博伊丁假丝酵母，它的保藏编号为CGMCC9446，完整命名为博伊丁假丝酵母T1。本发明还进一步提供该博伊丁假丝酵母T1在催化合成阿托伐他汀中间体中的应用，具体为以6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基已酸叔丁酯为底物、催化合成6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯，该博伊丁假丝酵母可以表达高立体选择性的羰基还原酶，使6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基已酸叔丁酯的转化率达到99％，产物6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯的d.e.值达到100％。
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公开(公告)号：CN104293757A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410521149.4
申请日：2014-09-30
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
CPC classification number: C12N9/88 , C12P17/06 , C12Y401/02004
Abstract: 本发明公开了一种醛缩酶及其编码基因和应用。醛缩酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其编码基因的碱基序列如SEQ ID No.2所示。所述应用是该醛缩酶在生产他汀类药物中间体中的应用。本发明在嗜热菌野生型醛缩酶的基础上，对其编码基因进行随机突变叠加定点突变，获得双突变基因，该双突变基因表达的醛缩酶不仅保有了野生型醛缩酶的抗底物变性能力，其催化活性也大大提高；利用该酶催化乙醛和氯乙醛发生羟醛缩合反应，其催化效率比野生型醛缩酶提高了3倍；表明本发明的醛缩酶具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN103013898B
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201210440849.1
申请日：2012-11-07
Applicant: 宁波美诺华药业股份有限公司 , 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种表达羰基还原酶的重组工程菌及其应用，该工程菌包括宿主细胞和转入宿主细胞的重组载体，所述重组载体由原始载体及接入原始载体的目的基因构成，所述宿主细胞为大肠杆菌(Escherichiacoli)Rosetta(DE3)，所述的目的基因为羰基还原酶基因，碱基序列如SEQ IDNO.1所示。本发明重组工程菌羰基还原酶表达水平较高，利用诱导培养的菌体细胞将氮，氮-二甲基-3-氧基-3-(2-噻吩)-l-丙胺盐酸盐转化为(S)-氮，氮-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-l-丙胺；或将4-氯乙酰乙酸乙酯转化为(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，两种产物的光学纯度及转化率均较高。
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公开(公告)号：CN102911927B
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201210431917.8
申请日：2012-11-02
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: C12N9/88 , C12N15/60 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12P13/00 , C12N15/10 , C12N15/70 , C12R1/24 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶及其用途，该谷氨酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了一种编码该谷氨酸脱羧酶的基因及含有该基因的表达单元、重组载体和转化子。本发明又公开该谷氨酸脱羧酶在生产γ-氨基丁酸中的应用。本发明谷氨酸脱羧酶的催化速率是野生型谷氨酸脱羧酶的2.5倍，能高效合成GABA，为利用谷氨酸脱羧酶进行γ-氨基丁酸的生物制备创造了更有利的条件。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102517369B
公开(公告)日：2013-10-16
申请号：CN201110422746.8
申请日：2011-12-16
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开一种高密度微生物混合发酵在氮限制下合成含苯聚羟基烷酸酯的方法，第一阶段：在发酵培养基中加入≤0.5g/L的含苯有机物和5～20g/L的糖作为碳源，接入两种或两种以上的微生物种子液，利用在线信号判断碳源消耗量，流加碳源保证微生物生长所需；第二阶段：当微生物细胞吸光密度30，用不含氮碱性溶液调pH值并停止补氨水和其它含氮物质，使发酵液中的氮含量降低至0.001mol/L实现氮限制；监控溶解氧和pH值的变化，当二者同时迅速上升加碳源转化为含苯聚羟基烷酸酯。本发明利用微生物混合发酵、多种碳源分段补给合成既含短链单体又含有中长链单体的含苯聚羟基烷酸酯，并能有效地大范围调控其产物组成的优点。
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公开(公告)号：CN102757943B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201210256836.9
申请日：2012-07-24
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(V445A)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了一个突变位点，即445位的缬氨酸(GTG)突变为丙氨酸(GCG)。与父本酶和原始酶相比，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力和催化活力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。
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公开(公告)号：CN111534493A
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN202010250037.5
申请日：2020-04-01
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种嘌呤核苷磷酸化酶突变体、基因及应用。所述嘌呤核苷磷酸化酶突变体由大肠杆菌的嘌呤核苷磷酸化酶第167位甲硫氨酸突变成精氨酸、第168位苯丙氨酸突变成丙氨酸所得。本发明利用定点饱和突变技术对大肠杆菌(Escherichia coli)的嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)进行催化性能改良，筛选出的PNP突变酶比活力可达310U/mg，较野生型酶提高约47.6％，热稳定性更为优良。
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公开(公告)号：CN107177642B
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201710438866.4
申请日：2017-06-12
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种咪唑‑4‑乙酸的生物合成方法，该方法包括以下步骤：以L‑组氨酸为底物，在膜联L‑氨基酸脱氨酶的催化下，进行脱氨反应，得到含有中间产物3‑(4‑咪唑)‑2‑氧丙酸的反应液；向所述反应液中加入过氧化氢溶液，进行反应，反应结束后，得到咪唑‑4‑乙酸。本发明方法步骤简单，反应条件温和，原料来源广泛、生物催化剂易于制备、设备要求低，底物转化率高，且不需要使用有机溶剂和有毒试剂，相对于现有的化学法具有高效、成本低和环境友好的特点。
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公开(公告)号：CN104878059B
公开(公告)日：2018-06-26
申请号：CN201510149807.6
申请日：2015-03-31
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: C12P19/40
Abstract: 本发明公开了一种制备S‑腺苷蛋氨酸的方法，包括：以D/L‑蛋氨酸为原料，发酵获得S‑腺苷蛋氨酸，往发酵液中添加柠檬酸和磷酸盐。本发明将柠檬酸和磷酸盐添加入发酵液中，使菌株利用柠檬酸和磷酸盐合成ATP，在保证不显著提高原料成本的情况下，解决了现有技术中S‑腺苷蛋氨酸产量因胞内ATP浓度低造成的产物产量低的问题，显著提高了S‑腺苷蛋氨酸产量和L‑蛋氨酸的转化率。
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