公开(公告)号：CN102747053B

公开(公告)日：2014-04-23

申请号：CN201210257003.4

申请日：2012-07-24

Applicant: 浙江大学宁波理工学院

Inventor： 梅乐和 ,  张澎湃 ,  胡升 ,  雷引林 ,  金志华 ,  胡桂香

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ？ID？NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了三个突变位点，即第168位的天冬氨酸(GAT)突变为亮氨酸(CTT)，第435位的谷氨酸(GAA)突变为苏氨酸(ACG)，第445位的缬氨酸(GTG)突变为丙氨酸(GCG)。与父本酶和原始酶相比，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。

公开(公告)号：CN102747052B

公开(公告)日：2013-10-30

申请号：CN201210256898.X

申请日：2012-07-24

Applicant: 浙江大学宁波理工学院

Inventor： 梅乐和 ,  张澎湃 ,  胡升 ,  金志华 ,  胡桂香

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(L148S/Q229R)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了两个突变位点，即第148位的亮氨酸(L)突变为丝氨酸(S)，第229位的谷氨酰胺(Q)突变为精氨酸(R)。与父本相比较，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力和热稳定性。

公开(公告)号：CN102757944A

公开(公告)日：2012-10-31

申请号：CN201210256860.2

申请日：2012-07-24

Applicant: 浙江大学宁波理工学院

Inventor： 梅乐和 ,  张澎湃 ,  胡升 ,  胡桂香 ,  雷引林

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(D168L/E435T)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶基础上增加了两个突变位点，即第168位的天冬氨酸(GAT)突变为亮氨酸(CTT)，第435位的谷氨酸(GAA)突变为苏氨酸(ACG)。与父本相比较，本发明变体酶具有与底物更大的亲和力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。

公开(公告)号：CN102747053A

公开(公告)日：2012-10-24

申请号：CN201210257003.4

申请日：2012-07-24

Applicant: 浙江大学宁波理工学院

Inventor： 梅乐和 ,  张澎湃 ,  胡升 ,  雷引林 ,  金志华 ,  胡桂香

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了三个突变位点，即第168位的天冬氨酸(GAT)突变为亮氨酸(CTT)，第435位的谷氨酸(GAA)突变为苏氨酸(ACG)，第445位的缬氨酸(GTG)突变为丙氨酸(GCG)。与父本酶和原始酶相比，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。

公开(公告)号：CN102747052A

公开(公告)日：2012-10-24

申请号：CN201210256898.X

申请日：2012-07-24

Applicant: 浙江大学宁波理工学院

Inventor： 梅乐和 ,  张澎湃 ,  胡升 ,  金志华 ,  胡桂香

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(L148S/Q229R)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了两个突变位点，即第148位的亮氨酸(L)突变为丝氨酸(S)，第229位的谷氨酰胺(Q)突变为精氨酸(R)。与父本相比较，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力和热稳定性。

公开(公告)号：CN102757943A

公开(公告)日：2012-10-31

申请号：CN201210256836.9

申请日：2012-07-24

Applicant: 浙江大学宁波理工学院

Inventor： 梅乐和 ,  张澎湃 ,  胡升 ,  雷引林 ,  金志华 ,  胡桂香

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(V445A)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了一个突变位点，即445位的缬氨酸(GTG)突变为丙氨酸(GCG)。与父本酶和原始酶相比，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力和催化活力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。

公开(公告)号：CN102757943B

公开(公告)日：2013-06-05

申请号：CN201210256836.9

申请日：2012-07-24

Applicant: 浙江大学宁波理工学院

Inventor： 梅乐和 ,  张澎湃 ,  胡升 ,  雷引林 ,  金志华 ,  胡桂香

IPC: C12N9/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(V445A)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了一个突变位点，即445位的缬氨酸(GTG)突变为丙氨酸(GCG)。与父本酶和原始酶相比，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力和催化活力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。