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公开(公告)号：CN102964603B
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201210420950.0
申请日：2012-10-29
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: C08G83/00
Abstract: 本发明公开一种合成以笼型八聚（γ-氨丙基）硅倍半氧烷为核的树枝状化合物三氟乙酸盐的方法：将OAS盐酸盐和DIPEA溶于DMF中，滴加溶于DMF的N，N’-二叔丁氧羰基-L-赖氨酸N-丁二酰亚胺酯或N，N’-二叔丁氧羰基-L-赖氨酸五氟苯酚酯，反应10～14h；加-2～2℃的乙腈，过滤干燥20～24h得叔丁氧羰基保护的G1（OL）；将G1（OL）加到-2～2℃的三氟乙酸中反应3～5h，反应混合物加到-2～5℃的乙醚中，混合、静置过滤收集沉淀得G1（OL）三氟乙酸盐；调整反应物料配比，其余步骤重复上述过程制得G4（OL）三氟乙酸盐。本发明具有污染小，反应时间短，后处理简单，产率高的优点。
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公开(公告)号：CN102757943B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201210256836.9
申请日：2012-07-24
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(V445A)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了一个突变位点，即445位的缬氨酸(GTG)突变为丙氨酸(GCG)。与父本酶和原始酶相比，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力和催化活力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。
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公开(公告)号：CN102757943A
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201210256836.9
申请日：2012-07-24
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(V445A)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了一个突变位点，即445位的缬氨酸(GTG)突变为丙氨酸(GCG)。与父本酶和原始酶相比，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力和催化活力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。
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公开(公告)号：CN102964603A
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN201210420950.0
申请日：2012-10-29
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: C08G83/00
Abstract: 本发明公开一种合成以笼型八聚（γ-氨丙基）硅倍半氧烷为核的树枝状化合物三氟乙酸盐的方法：将OAS盐酸盐和DIPEA溶于DMF中，滴加溶于DMF的N，N’-二叔丁氧羰基-L-赖氨酸N-丁二酰亚胺酯或N，N’-二叔丁氧羰基-L-赖氨酸五氟苯酚酯，反应10~14h；加-2~2℃的乙腈，过滤干燥20~24h得叔丁氧羰基保护的G1（OL）；将G1（OL）加到-2~2℃的三氟乙酸中反应3~5h，反应混合物加到-2~5℃的乙醚中，混合、静置过滤收集沉淀得G1（OL）三氟乙酸盐；调整反应物料配比，其余步骤重复上述过程制得G4（OL）三氟乙酸盐。本发明具有污染小，反应时间短，后处理简单，产率高的优点。
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公开(公告)号：CN102757944A
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201210256860.2
申请日：2012-07-24
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(D168L/E435T)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶基础上增加了两个突变位点，即第168位的天冬氨酸(GAT)突变为亮氨酸(CTT)，第435位的谷氨酸(GAA)突变为苏氨酸(ACG)。与父本相比较，本发明变体酶具有与底物更大的亲和力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102747053A
公开(公告)日：2012-10-24
申请号：CN201210257003.4
申请日：2012-07-24
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了三个突变位点，即第168位的天冬氨酸(GAT)突变为亮氨酸(CTT)，第435位的谷氨酸(GAA)突变为苏氨酸(ACG)，第445位的缬氨酸(GTG)突变为丙氨酸(GCG)。与父本酶和原始酶相比，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力，催化吲哚生成靛蓝的效率更高。
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公开(公告)号：CN102747052A
公开(公告)日：2012-10-24
申请号：CN201210256898.X
申请日：2012-07-24
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM-3(L148S/Q229R)变体酶及其编码基因和用途，该变体酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，它在细胞色素P450BM-3(F87V/A74G/L188Q)变体酶的基础上增加了两个突变位点，即第148位的亮氨酸(L)突变为丝氨酸(S)，第229位的谷氨酰胺(Q)突变为精氨酸(R)。与父本相比较，本发明变体酶具有与底物更高的亲和力和热稳定性。
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公开(公告)号：CN103773819B
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201410005905.8
申请日：2014-01-03
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种生产乳酸同时耦合制备GABA的方法，包括：将米根霉接入发酵培养基中进行发酵，当发酵液的pH小于4.8时，向发酵液中加入谷氨酸脱羧酶、磷酸吡哆醛和L-谷氨酸钠，之后持续向发酵液中加入L-谷氨酸钠，利用谷氨酸脱羧酶催化谷氨酸生成GABA的活力，消耗环境中的H+，使发酵液的pH维持在4.8～6.0，达到解除酸抑制对乳酸发酵的抑制、实现乳酸与GABA的同时生产的目的。本发明为乳酸发酵提供了一种新的解除底物抑制的方法，并且在发酵过程中耦合产生功能化合物γ-氨基丁酸，不仅增加了乳酸的产量，而且提高了过程的经济性。
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公开(公告)号：CN103059317B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201210421260.7
申请日：2012-10-29
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
IPC: C08G83/00
Abstract: 本发明公开一种合成以笼型八聚（γ-氨丙基）硅倍半氧烷为核的树枝状化合物三氟乙酸盐的方法：将OAS盐酸盐和DIPEA溶于DMF中，滴加溶于DMF的N，N’-二叔丁氧羰基-L-赖氨酸N-丁二酰亚胺酯或N，N’-二叔丁氧羰基-L-赖氨酸五氟苯酚酯，反应10～14h；加-2～2℃的乙腈，过滤干燥20～24h得叔丁氧羰基保护的G1（OL）；将G1（OL）加到-2～2℃的三氟乙酸中反应3～5h，反应混合物加到-2～5℃的乙醚中，混合、静置过滤收集沉淀得G1（OL）三氟乙酸盐；调整反应物料配比，其余步骤重复上述过程制得G3（OL）三氟乙酸盐。本发明具有污染小，反应时间短，后处理简单，产率高的优点。
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公开(公告)号：CN103773819A
公开(公告)日：2014-05-07
申请号：CN201410005905.8
申请日：2014-01-03
Applicant: 浙江大学宁波理工学院
Abstract: 本发明公开了一种生产乳酸同时耦合制备GABA的方法，包括：将米根霉接入发酵培养基中进行发酵，当发酵液的pH小于4.8时，向发酵液中加入谷氨酸脱羧酶、磷酸吡哆醛和L-谷氨酸钠，之后持续向发酵液中加入L-谷氨酸钠，利用谷氨酸脱羧酶催化谷氨酸生成GABA的活力，消耗环境中的H+，使发酵液的pH维持在4.8～6.0，达到解除酸抑制对乳酸发酵的抑制、实现乳酸与GABA的同时生产的目的。本发明为乳酸发酵提供了一种新的解除底物抑制的方法，并且在发酵过程中耦合产生功能化合物γ-氨基丁酸，不仅增加了乳酸的产量，而且提高了过程的经济性。
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