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公开(公告)号：CN110178989A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910419081.1
申请日：2019-05-20
Applicant: 江苏大学
IPC: A23K20/147 , A23K10/12 , A23K10/18 , A23K20/163 , A23K10/37 , A23K20/24 , A23K20/26 , A23K20/189
Abstract: 本发明属于生物饲料领域，涉及一种高效低成本的大豆活性肽饲料加工方法；步骤为：活化菌株，分别得到地衣芽孢杆菌、产朊假丝酵母和乳酸菌发酵种子液；在豆渣中添加木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、红糖、磷酸二氢钾及七水硫酸镁，混合得到一期发酵培养基，接种地衣芽孢杆菌发酵种子液和产朊假丝酵母发酵种子液进行一期菌酶协同发酵，得到一期发酵混合物；再接种乳酸菌发酵种子液，加入酸性蛋白酶，混合得到二期发酵混合物；在密封条件下进行二期厌氧发酵，厌氧发酵后获得大豆肽饲料；本发明采用菌酶协同发酵以及好氧、厌氧分步发酵的模式，发酵彻底，大豆肽转化程度高，经济效益高；适口性好，动物喜食，经动物饲养实验验证，可明显提高动物的重量。
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公开(公告)号：CN104673817B
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201510077614.4
申请日：2015-02-13
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明涉及一种脂肪酶的原核表达及应用和固定化方法，属于酶工程及分子生物学应用领域；该脂肪酶Tm1350基因来源于极端嗜热菌，本发明将该基因构建到原核表达载体pET‑28a中，获得重组质粒pET‑28a‑Tm1350，转入宿主细胞E.coli BL 21，诱导重组脂肪酶的表达，然后纯化并鉴定其酶学性质；通过构建高拷贝数的穿梭表达载体pHS‑CotB‑Tm1350，转入枯草芽孢杆菌菌株DB403中，诱导重组孢子产生，随衣壳蛋白CotB的组装，该酶共表达在孢子表面。本发明首次通过孢子表面技术对脂肪酶固定化，该脂肪酶具有很好的热稳定性，耐碱性，甲醇激活性及耐甲醇性，具有很大的工业化应用潜能，如生物柴油的制备；该酶展示在孢子表面，不仅稳定性更好，而且通过简单离心或过滤就可回收利用，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN102696860B
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201210176742.0
申请日：2012-06-01
Applicant: 江苏大学
CPC classification number: Y02P60/873
Abstract: 本发明涉及利用醋糟、杂粕经益生菌三期发酵，生产一种高效低成本的微生物饲料蛋白。是以醋糟为主要碳源，棉粕为主要氮源兼部分碳源，经食品级霉菌一期发酵预处理，再以芽孢杆菌和酵母菌为发酵菌种同时补料添加部分棉粕进行二期发酵，最后再添加部分豆粕和菜子粕作为氮源兼部分碳源，接种乳酸菌和耐酸双歧杆菌并充分混匀后，分装在单向膜厌氧袋中密封保存，即三期发酵获得成品。本发明生产成本极低，所以可以作为饲料组份，添加量达5-40%。由于成品不需要干燥处理，活菌数极高，酶量丰富，杂菌极少，饲养效果明显：大幅度提高畜禽饲料利用率，提高产量，改善肠道环境，提高免疫力和抵抗力，代替抗生素，改善动物产品品质。
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公开(公告)号：CN102687792A
公开(公告)日：2012-09-26
申请号：CN201210176743.5
申请日：2012-06-01
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明涉及利用啤酒糟和米糠粕经益生菌三期发酵，生产一种高效、极低成本的饲用微生态制剂，或者叫微生物饲料添加剂。其特征是：啤酒糟和米糠粕经过脉孢菌一期初步发酵预处理，充分降解木质素、纤维素等，再添加部分米糠粕和少量豆粕经芽孢杆菌和酵母菌二期发酵，吸收霉菌降解废弃物产生的营养物质及霉菌本身解体的营养物质。然后加部分米糠粕和少量豆粕，经乳酸菌、双歧杆菌等最后在单向膜厌氧袋中经三期厌氧发酵成成品。本发明固体原料不需高温灭菌，成品不需要干燥处理，保质期一年以上，添加量达5-30%，活性益生菌数极高，酶量丰富，杂菌极少，饲养效果明显，具有明显的生态和社会效益。
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公开(公告)号：CN119685368A
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202411761349.7
申请日：2024-12-03
Applicant: 江苏大学
IPC: C12N15/75 , C12N15/66 , C12N15/70 , C12N9/52 , C12N1/21 , C12N15/62 , C12Q1/04 , A23K10/26 , A23K10/37 , A23K10/12 , A23K10/14 , A23K20/142 , A23K20/24 , C12R1/125 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术和发酵饲料领域，涉及一种高活性角蛋白酶的制备方法及其在羽毛粉降解和发酵饲料制备等领域的应用。本发明构建重组角蛋白酶工程菌并制备粗酶液；通过eq‑PCR扩增获得带有随机突变位点的kerD21eq片段，构建E.coli‑B.subtilis穿梭表达载体质粒文库，通过共转化B.subtilis WB800N获得突变体文库；同时建立了一种结合平板透明圈及96孔板法的高通量筛选方法，基于筛选后的突变菌株，制备得到高活性角蛋白酶，利用该酶完成了羽毛粉的降解，并可应用于发酵饲料的制备；使得羽毛废弃物得以有效利用，带来了显著的经济效益，并有效减少了污染物的产生，具备良好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119023949A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411130071.3
申请日：2024-08-16
Applicant: 江苏大学
IPC: G01N33/533 , G01N33/543 , G01N33/68 , C12Q1/6804
Abstract: 本发明提供一种痕量蛋白检测组合物及基于邻近延伸扩增效应的痕量蛋白的检测方法，属于蛋白检测技术领域。本发明设计第一、第二探针，与待测蛋白孵育；加入多功能DNA发卡和T4连接酶，得到完整双链DNA；加入切刻酶、Bst DNA聚合酶反应产生单链DNA；加入荧光探针，孵育后荧光检测得到蛋白含量。该方法中，由于邻近连接效应，两个探针核酸结构域同时与多功能DNA发卡发生杂交，打开多功能DNA发卡并形成带有缺刻的双链DNA，再通过连接酶修补，生成的双链在切刻酶和Bst DNA聚合酶作用下不断循环产生单链DNA，此单链与荧光探针作用，通过荧光强度检测蛋白含量。本发明的方法具有极高的灵敏度和特异性，且反应体系简单，可显著提高痕量蛋白检测水平。
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公开(公告)号：CN118931876A
公开(公告)日：2024-11-12
申请号：CN202411056903.1
申请日：2024-08-02
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种枯草芽孢杆菌脂肪酶突变体及其制备方法与应用；所述的脂肪酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，是由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生型脂肪酶突变而得，突变的方式为157位异亮氨酸变为缬氨酸而获得，其编码基因如SEQ ID NO.3所示。本发明提供了高酶活性的新型脂肪酶，该突变体具有理想的催化特性和高温耐受性，其中突变体I157V的酶活性较野生型提高了3.75倍；本发明的脂肪酶高活性突变体更易催化甘油三酯分解成更易于消化的甘油和脂肪酸，适用于提高动物饲料的油脂消化率，且适合工业化大规模低成本生产，具备广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN118834852A
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202411056900.8
申请日：2024-08-02
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种Tn5转座酶突变体及其应用；所述Tn5转座酶突变体在如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列基础上，经过Q118T(118位谷氨酰胺突变为苏氨酸)氨基酸突变得到；所述Tn5转座酶突变体基因的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所构建的突变体相比于野生型酶蛋白，具有改善的插入序列偏好性能力，在2‑5bp的AT偏好得到较明显改善。本发明通过蛋白质工程，显著提升了酶的功能特性，为Tn5转座酶在测序建库上的广泛应用提供了更有竞争力的解决方案，具备广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN118638774A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202410680246.1
申请日：2024-05-29
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明属于生物技术和生物质转化领域，具体涉及一种纤维二糖脱氢酶固定化酶制剂的制备方法及其在秸秆降解领域中的应用。通过构建重组工程菌，优化筛选衣壳蛋白、连接肽得到最佳展示条件，把CDH展示在芽孢表面；并利用ep‑PCR技术获得携带随机突变位点的cdh基因片段，构建穿梭表达载体cdhep突变质粒文库。结合芽孢表面展示技术操作简单、无需进行蛋白纯化的优点，通过高通量筛选获得高催化活性CDH突变体；在多种酶的混合体系中，所制备的酶制剂均表现出良好的秸秆协同降解能力，且固定化CDH可循环使用。本发明不仅为纤维二糖脱氢酶的制备提供了新途径，还为秸秆降解和生物能源开发提供了更有效的方法，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN111909913B
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202010675890.1
申请日：2020-07-14
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明涉及一种脂肪酶突变体及其应用，特别涉及一种对于洛尔类药物手性折分活性提高的脂肪酶及其应用，属于基因工程技术领域。本发明的脂肪酶突变体是在枯草杆菌脂肪酶的第十二位氨基酸序列间插入一段无规卷曲氨基酸序列，从而使得到的脂肪酶突变体在不同条件下水解活性分别提高，对于非甾体抗炎药物的手性拆分性能E值相较于野生型有了很大的提高，适合于工业化应用。
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