公开(公告)号：CN116903415A

公开(公告)日：2023-10-20

申请号：CN202310640555.1

申请日：2023-06-01

Applicant: 江苏大学

Inventor： 陈华友 ,  李柯仪 ,  夏雨桐 ,  王振 ,  陈彦臻 ,  高恶斌 ,  倪忠 ,  霍书豪 ,  朱道辰

IPC: C05G3/60 ,  C05F17/20 ,  C05F17/50 ,  C12N15/75 ,  C12N15/57 ,  C12N9/54 ,  C12N1/12 ,  C12R1/89

Abstract: 本发明属于微藻培养技术领域，具体涉及一种促进湛江等鞭金藻生长的高效肥水剂的生产方法。步骤为:本发明以次粉和羽毛粉为发酵原料，并筛选到对微藻的生长促进作用显著的菌株，将产乙酸高的布氏乳杆菌、弯曲乳杆菌、植物乳杆菌、双歧杆菌、产朊假丝酵母菌、枯草芽孢杆菌作为发酵菌种；同时克隆表达一种酸性条件下活性高的角蛋白酶高效工程菌并加入还原剂亚硫酸钠进行协同发酵，最终获得的肥水剂中乙酸、小肽、氨基酸、矿物质螯合率高；此外，肥水剂中的氨基酸，矿物质可也作为湛江等鞭金藻的营养补剂。本方法适用于任何开放式或封闭式培养体系，安全环保、成本低且还能避免有害菌的大量繁殖，改善水产养殖环境，应用前景广阔。

公开(公告)号：CN119685368A

公开(公告)日：2025-03-25

申请号：CN202411761349.7

申请日：2024-12-03

Applicant: 江苏大学

Inventor： 陈华友 ,  陈彦臻 ,  李苗苗 ,  冯勇 ,  倪忠 ,  郭忠建 ,  穆罕默德·赛义德 ,  胡朝阳 ,  陈永 ,  马毅

IPC: C12N15/75 ,  C12N15/66 ,  C12N15/70 ,  C12N9/52 ,  C12N1/21 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/04 ,  A23K10/26 ,  A23K10/37 ,  A23K10/12 ,  A23K10/14 ,  A23K20/142 ,  A23K20/24 ,  C12R1/125 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术和发酵饲料领域，涉及一种高活性角蛋白酶的制备方法及其在羽毛粉降解和发酵饲料制备等领域的应用。本发明构建重组角蛋白酶工程菌并制备粗酶液；通过eq‑PCR扩增获得带有随机突变位点的kerD21eq片段，构建E.coli‑B.subtilis穿梭表达载体质粒文库，通过共转化B.subtilis WB800N获得突变体文库；同时建立了一种结合平板透明圈及96孔板法的高通量筛选方法，基于筛选后的突变菌株，制备得到高活性角蛋白酶，利用该酶完成了羽毛粉的降解，并可应用于发酵饲料的制备；使得羽毛废弃物得以有效利用，带来了显著的经济效益，并有效减少了污染物的产生，具备良好的应用前景。

公开(公告)号：CN116926101A

公开(公告)日：2023-10-24

申请号：CN202310723030.4

申请日：2023-06-16

Applicant: 江苏大学

Inventor： 陈华友 ,  王振 ,  阎铭晨 ,  陈彦臻 ,  李柯仪 ,  陈飞飞 ,  倪忠 ,  方真 ,  雍阳春

IPC: C12N15/75 ,  C12N15/57 ,  C12N9/54 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/04 ,  G01N21/31 ,  A23K10/26 ,  A23K10/37 ,  A23K10/12 ,  A23K10/14 ,  A23K20/24 ,  A23K20/20 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明属于酶工程和农业废弃物转化领域，具体涉及一种高抗逆性高活性角蛋白酶的制备方法及其在羽毛粉饲料中的应用。本发明将一种来自于Bacillus tequilensis strain Q7的角蛋白酶kerQ7进行了芽孢表面展示固定化，并通过对两种不同衣壳蛋白的筛选和进一步的连接肽优化得到一种耐热性强且在较广的pH范围内稳定性高的角蛋白酶制剂；接着继续在芽孢展示的基础上建立了高通量筛选的方法，并通过易错PCR和定向筛选对与cotG融合的kerQ7进行耐酸性的定向改造，得到一株活性、耐酸性和热稳定性均显著提升的突变体H4，其可促进羽毛废弃物的降解和羽毛角蛋白资源在饲料行业的大规模应用。