公开(公告)号：CN119685368A

公开(公告)日：2025-03-25

申请号：CN202411761349.7

申请日：2024-12-03

Applicant: 江苏大学

Inventor： 陈华友 ,  陈彦臻 ,  李苗苗 ,  冯勇 ,  倪忠 ,  郭忠建 ,  穆罕默德·赛义德 ,  胡朝阳 ,  陈永 ,  马毅

IPC: C12N15/75 ,  C12N15/66 ,  C12N15/70 ,  C12N9/52 ,  C12N1/21 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/04 ,  A23K10/26 ,  A23K10/37 ,  A23K10/12 ,  A23K10/14 ,  A23K20/142 ,  A23K20/24 ,  C12R1/125 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术和发酵饲料领域，涉及一种高活性角蛋白酶的制备方法及其在羽毛粉降解和发酵饲料制备等领域的应用。本发明构建重组角蛋白酶工程菌并制备粗酶液；通过eq‑PCR扩增获得带有随机突变位点的kerD21eq片段，构建E.coli‑B.subtilis穿梭表达载体质粒文库，通过共转化B.subtilis WB800N获得突变体文库；同时建立了一种结合平板透明圈及96孔板法的高通量筛选方法，基于筛选后的突变菌株，制备得到高活性角蛋白酶，利用该酶完成了羽毛粉的降解，并可应用于发酵饲料的制备；使得羽毛废弃物得以有效利用，带来了显著的经济效益，并有效减少了污染物的产生，具备良好的应用前景。