一种可溶性、高取代度磷酸化酵母葡聚糖的制备方法

    公开(公告)号:CN104017104B

    公开(公告)日:2016-05-25

    申请号:CN201410213080.9

    申请日:2014-05-20

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种可溶性、高取代度磷酸化酵母葡聚糖的制备方法,具体过程如下:(1)将粉末状酵母葡聚糖原料与六偏磷酸钠或六偏磷酸钾按质量比1:1.5~15混合好后,采用行星式球磨机通过机械化学方法处理8~40 min;(2)将步骤(1)处理后得到的葡聚糖混合物溶于水中得到溶解液,葡聚糖混合物与水的质量比为1:6~18;如果产生沉淀,则通过离心除去不溶物,从而得到溶解液;(3)对步骤(2)得到的溶解液进行透析或超滤,除去多余的六偏磷酸钠或六偏磷酸钾,得到磷酸化酵母葡聚糖溶液。本方法具有简便、快速、高效、不使用有机溶剂和强酸、强碱试剂的特点,有利于工业化的规模化生产。

    一株产细菌素的肠膜明串珠菌及其应用

    公开(公告)号:CN105385636A

    公开(公告)日:2016-03-09

    申请号:CN201510889425.7

    申请日:2015-12-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开一株产细菌素的肠膜明串珠菌,保藏号为:CCTCC M 2015639。本菌种产生的细菌素对单增李斯特菌有抑菌活性,且具有良好的热稳定性和pH稳定性,对蛋白酶敏感;这株菌的发酵上清液可以直接用作细菌素粗品,采用阳离子交换层析对发酵上清液进行分离纯化后可以得到较纯的细菌素产品;干燥后可以得到粉末状粗品或较纯品;将细菌素溶液直接喷涂于固体食品的表面,或混合于含菌食品中,用于抑制食品中的单增李斯特菌。本菌种与化学防腐剂和抗生素相比,细菌素为蛋白类物质,可被蛋白酶完全酶解,具有无残留、不产生抗药性和安全等特点。

    溶菌酶组合抑菌剂
    13.
    发明授权

    公开(公告)号:CN102138570B

    公开(公告)日:2014-02-05

    申请号:CN201110033635.8

    申请日:2011-01-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种溶菌酶组合抑菌剂,主要解决溶菌酶对革兰氏阴性菌抑制效果差的问题。其由溶菌酶与甘氨酸以及乙二胺四乙酸进行复配组成,各组分按质量份的配比为:溶菌酶0.25~5,甘氨酸1~10,乙二胺四乙酸0.05~0.5;其可以为固态组合物,其在含菌料中的添加量按重量比为1.3~15‰,也可以将其溶解于10mM、pH7.4的磷酸缓冲液中,再加入含菌料中使用。本发明可以使溶菌酶对大肠杆菌等革兰氏阴性菌的抑制效果提高40至600多倍,本发明相对于抗生素和化学防腐剂而言,具有绿色可降解、无残留和安全的特点。

    一种随机突变获得的谷氨酸脱羧酶突变体基因及其编码蛋白质和应用

    公开(公告)号:CN103484489A

    公开(公告)日:2014-01-01

    申请号:CN201310438191.5

    申请日:2013-09-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了两种pH作用范围拓宽的谷氨酸脱羧酶突变体,其DNA序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3,氨基酸序列分别为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4。本发明结合随机突变(易错PCR)技术和DNA定点突变技术,对野生型谷氨酸脱羧酶GadB1编码基因进行分子改造,得到了两种突变酶GadB1T17I/D294G/Q346H和GadB1T17I/D294G/E312S/Q346H,相对野生酶其有效pH作用范围得到一定的扩展,尤其在偏中性pH条件下仍具有较好的活性。随着有效pH作用范围的拓宽,突变酶在pH5.5~6.5条件下,仍然具有较高的催化活性,因此解决了谷氨酸脱羧酶催化GABA生物合成时,在pH5.5~6.5时,催化能力低的问题,为利用该酶及其编码基因来生物合成GABA创造好的条件。

    一种空肠弯曲菌的高灵敏快速检测试剂盒

    公开(公告)号:CN102534038A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210045964.9

    申请日:2012-02-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供一种可用于食源性病原菌空肠弯曲菌的高灵敏快速分子检测试剂盒,其中包括针对特异性检测靶基因flhA的、可用于环介导等温扩增靶序列的4条高特异性引物(2条内引物flhA-FIP/flhA-BIP和2条外引物flhA-F3/flhA-B3),以及可进行环介导等温扩增靶序列的高效反应体系。同时,本发明还提供了一种应用所述试剂盒检测空肠弯曲菌的方法。运用本发明试剂盒和方法检测空肠弯曲菌,比PCR检测灵敏度高100倍以上,且对空肠弯曲菌检测具有高度的特异性。本发明提供的试剂盒和检测方法,不仅灵敏度高特异性强,而且操作简便、耗时短、成本低,为食品中空肠弯曲杆菌的检测提供了一种高效可靠、便捷实用的手段。

    胱胺二盐酸盐的合成方法
    16.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102399175A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110322868.X

    申请日:2011-10-21

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 李永富 史锋

    Abstract: 一种胱胺二盐酸盐的合成方法,包括如下步骤:(1)按质量百分数称取如下组分:半胱胺盐酸盐:20~50%;水:15~25%;复合胶:1~10%;吸附剂:22~35%;催化剂:1~15%;(2)将步骤(1)所述的复合胶加入到水中,加入半胱胺盐酸盐,搅拌均匀,室温放置2~3h,用胶体磨研磨1~2次,加入吸附剂吸附成固体粉末,最后加入催化剂搅拌均匀,在容器中在室温下放置48~120h,直至物料内部温度与室温一致,反应结束;反应产物用水溶解过滤,滤液用乙醇提纯,沉淀为纯的胱胺二盐酸盐;所述催化剂为氨酪酸。本发明为固相室温合成,工艺简单、设备投资少、生产成本低。

    一种D-手性肌醇的生物合成方法及其合成菌株

    公开(公告)号:CN118028322A

    公开(公告)日:2024-05-14

    申请号:CN202410143745.7

    申请日:2024-02-01

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种D‑手性肌醇的生物合成方法及其合成菌株,属于基因工程领域。本发明通过对关键酶IolI的对比和优化,人工合成了4个非天然肌糖异构酶的基因序列iolI2,iolI3,iolI4,iolI5;并进一步将不同肌糖异构酶基因iolIn和肌醇脱氢酶基因iolG在谷氨酸棒杆菌中进行过表达,实现了从肌‑肌醇(MI)到DCI的转化,使转化率提高到16%。在此基础上,本发明将iolI2‑iolG共表达菌用于D‑手性肌醇的全细胞转化,并对转化过程的条件如温度、pH、和MI浓度进行了一系列优化,使转化率提高到17%‑28%,产量提高到约7g/L。

    一种棒杆菌中基因多拷贝整合方法

    公开(公告)号:CN116732082A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202310699287.0

    申请日:2023-06-14

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 史锋 陈睿 李永富

    Abstract: 本发明公开了一种棒杆菌中基因多拷贝整合方法,具体涉及一种在谷氨酸棒杆菌等棒杆菌中进行基因多拷贝整合的方法,属于基因工程领域。本发明提供的多拷贝整合系统是基于IScg1基因在谷氨酸棒杆菌有8个拷贝,通过不断进行整合质粒的转化及逐步提高的筛选压力将多个目的/外源基因表达框整合在染色体上,最后经过10轮进化,成功构建多拷贝整合目的基因的重组菌株。本发明提供的整合质粒以pBlueScript IISK(‑)为骨架,携带IScg1的上下游同源臂、筛选标记基因、目的基因表达框。其中,所述筛选标记表达盒包括内源性启动子和筛选标记基因,通过弱启动子降低菌株对抗生素的耐受性,从而提高目的菌株的筛选效率,为谷氨酸棒杆菌基因多拷贝整合提供了新的思路。

    一种在棒状杆菌中辅助sacB基因编辑系统的CRISPR-cpf1筛选工具

    公开(公告)号:CN114480467B

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202210184437.X

    申请日:2022-02-24

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 史锋 陈睿 李永富

    Abstract: 本发明公开了一种在棒状杆菌中辅助sacB基因编辑系统的CRISPR‑cpf1筛选工具,属于基因工程领域。本发明通过对现有基因编辑技术的改进及组合,提供了一种提高基于自杀质粒介导的同源重组及sacB系统二轮交换时的筛选效率的筛选工具,基于CRISPR/Cpf1机理及谷氨酸棒杆菌不存在非同源修复机制给予的致死性,创造性地开发了一种反向筛选工具,并无需再做改造或更换sgRNA就能直接用于筛选二轮交换菌株,解决了sacB系统二轮交换低效的问题,并具有普适性。同时降低了假阳性的概率、显著提升了筛选效果。在棒状杆菌的基因编辑及进一步利用中有广阔的应用前景。

    一种无大米全谷物青稞米饭的制备方法

    公开(公告)号:CN112089003A

    公开(公告)日:2020-12-18

    申请号:CN202010972896.5

    申请日:2020-09-16

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种无大米全谷物青稞米饭的制备方法,属于食品加工技术领域。本发明提供了一种全谷物米,所述全谷物米包括青稞和杂粮,不含大米;所述青稞和杂粮的质量比为1:1‑2。本发明所选用的青稞米与杂粮的配比,在本发明中青稞米的比例达到了30%‑50%,杂粮比例达到50%‑70%,杂粮比例100%,相较于市面上现有的白米饭,杂粮的比例达到100%;青稞米和杂粮两者相互作用,能够完全替代白米,是一款真正的无大米全谷物青稞米饭,本发明产品还具有口感Q弹、气味芳香的优点。

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