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公开(公告)号：CN107287301B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201710501338.9
申请日：2017-06-27
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888
Abstract: 本发明公开了一种利用核仁磷酸蛋白基因选择山羊生长性状的分子标记方法，该方法以山羊基因组DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用4对引物在PCR条件下进行扩增Nucleophosmin(NPM)基因5'UTR区和外显子1，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1‑P4的PCR扩增产物，发现引物P3扩增位点存在18bp的碱基缺失，然后对引物P3的扩增产物进行基因分型和基因频率分析，以及与关中奶山羊和波尔山羊的生长性状之间进行关联分析；结果表明：Nucleophosmin基因外显子1由引物P3检测的SNPs位点可用作山羊产生长性状选择的分子标记。
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公开(公告)号：CN103468819B
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201310449829.5
申请日：2013-09-27
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种利用双基因聚合效应选育奶山羊产奶性状的方法，以奶山羊基因组DNA为模板，利用2对引物分别扩增催乳素受体（PRLR）基因的外显子9和乳蛋白转录因子（ELF5）基因内含子1，以浓度为1.5%的琼脂糖凝胶电泳对各扩增产物进行大小判定，采用DNA测序技术筛查2对引物扩增产物的位点突变，然后利用浓度为3.5%的琼脂糖凝胶电泳对PRLR和ELF5基因的2个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析，分析不同基因型组合与产奶性状之间的关系，筛选最佳基因型组合。
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公开(公告)号：CN103525921A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201310454718.3
申请日：2013-09-27
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q2600/124 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明公开了一种利用3基因聚合效应选育山羊产羔性状的方法，以山羊基因组DNA为模板，利用3对引物分别扩增干细胞因子（SCF）基因的3'非翻译区，III型跨膜酪氨酸激酶受体（KIT）基因的外显子7以及亲吻素（KISS1）基因的内含子1，以浓度为1.5%的琼脂糖凝胶电泳对各扩增产物进行大小判定，采用DNA测序技术筛查3对引物扩增产物的位点突变，然后利用浓度为10%的聚丙烯酰胺凝胶电泳和浓度为3.5%的琼脂糖凝胶电泳对SCF、KIT和KISS1基因的3个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析，分析不同基因型组合与产羔数之间的关系，筛选最佳基因型组合。
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公开(公告)号：CN101899526B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN201010263060.4
申请日：2010-08-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种山羊产羔性状的分子标记选择方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用引物P1和P2在PCR条件下分别扩增KITL基因内含子1和6，根据琼脂糖凝胶电泳结果判定目的片段的大小；用限制性内切酶CviAⅡ消化引物P1的PCR扩增产物后，再用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测酶切后的扩增片段，引物P1的扩增产物存在2个碱基的突变；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P2的PCR扩增产物，引物P2的扩增产物存在1个碱基的突变，然后对引物P1和P2的扩增产物进行基因分型和基因频率分析，以及与关中奶山羊、西农萨能奶山羊和布尔山羊的产羔数之间进行关联分析，表明KITL基因由引物P1和P2检测的SNPs位点可作为山羊产羔数性状选择的分子标记。
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公开(公告)号：CN101906480B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010278144.5
申请日：2010-09-10
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种利用神经内分泌因子基因选择山羊产羔性状的分子标记方法，该方法以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用对引物P1在PCR条件下进行扩增Kisspeptin基因内含子2，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1的PCR扩增产物，发现引物P1扩增位点存在1个碱基的突变和8bp的碱基缺失，然后对引物P1的扩增产物进行基因分型和基因频率分析，以及与关中奶山羊和西农萨能奶山羊的产羔性状之间进行关联分析；结果表明：Kisspeptin基因内含子2由引物P1检测的SNPs位点可用作山羊产羔数性状选择的分子标记。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101928774A
公开(公告)日：2010-12-29
申请号：CN201010199157.3
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测山羊生长激素（GH）基因编码区5个碱基突变多态性的聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、Buffer（缓冲环境）、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用两对反应（PCR）引物P1和P2，在PCR条件下进行扩增，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行扩增目的片段大小判定；采用DNA测序技术筛查到山羊GH基因编码区5个碱基的突变，然后对GH基因的SNPs进行基因分型和基因频率分析，以及与布尔山羊、布尔山羊和关中奶山羊的杂交后代（F1和F2代）3月龄的生长性状之间进行了关联分析；结果表明：GH基因P1和P2检测的SNPs位点可用作山羊生长性状早期选择（3月龄）的分子标记。
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公开(公告)号：CN114214424B
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN202111476770.X
申请日：2021-12-06
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , A01K67/02
Abstract: 本发明提供了一组检测优质高产奶山羊的引物组、测定方法和奶山羊的培育方法，涉及新品种选育技术领域。本发明所述引物组，以CDC14A基因的AA型和/或RBPJL基因的TT型作为高产奶基因型，利用所述引物组可以早期筛选出具有高产奶特性的奶山羊。本发明还提供了所述引物组在培育高产奶奶山羊新品种中的应用，以含有CDC14A基因的AA型和/或RBPJL基因的TT型的阿尔卑斯奶山羊为原始父本，以含有CDC14A基因的AA型和/或RBPJL基因的TT型的本地地方品种关中奶山羊为原始母本，每代均经过高产基因型检测，依次通过二元杂交、级进杂交和横交固定，得到奶山羊新品种。所述奶山羊新品种具有双亲优点。
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公开(公告)号：CN113355356A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110755642.2
申请日：2021-07-05
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供了一种CSN1S1基因敲除载体以及CSN1S1基因敲除奶山羊乳腺上皮细胞的制备方法，涉及基因工程技术领域，所述基因敲除载体包括CRISPR/Cas9载体骨架与连接在所述载体质粒上的一段DNA片段，所述DNA片段的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过该基因敲除载体简便、快速、高效地敲除了奶山羊CSN1S1基因，获得了纯合的敲除CSN1S1基因的奶山羊乳腺上皮细胞。
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公开(公告)号：CN101928774B
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201010199157.3
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测山羊生长激素（GH）基因编码区5个碱基突变多态性的聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、Buffer（缓冲环境）、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用两对反应（PCR）引物P1和P2，在PCR条件下进行扩增，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行扩增目的片段大小判定；采用DNA测序技术筛查到山羊GH基因编码区5个碱基的突变，然后对GH基因的SNPs进行基因分型和基因频率分析，以及与布尔山羊、布尔山羊和关中奶山羊的杂交后代（F1和F2代）3月龄的生长性状之间进行了关联分析；结果表明：GH基因P1和P2检测的SNPs位点可用作山羊生长性状早期选择（3月龄）的分子标记。
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公开(公告)号：CN101865798B
公开(公告)日：2011-11-09
申请号：CN201010199444.4
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N1/30
Abstract: 本发明公开了一种聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）电泳中的DNA银染方法，先用0.1% AgNO3浸泡聚丙烯酰胺凝胶10–15min，用蒸馏水清洗2次，其次用0.04%的Na2CO3、2mL的37% HCOH/L、2%的NaOH混合溶液显色5–6 min，蒸馏水冲洗2次即可完成全部染色过程。传统的DNA银染方法需要5-6种化学试剂，配制4中溶液，花费40-60min才能完成染色步骤，而本方法只需要4种化学试剂，配制2种溶液，花费20min就可以达到与传统染色方法相同的结果，而且在变性聚丙烯酰胺电泳（PAGE）中，本染色方法可以将DNA的量降低到0.44ng；在非变性聚丙烯酰胺电泳（PAGE）中可以将DNA的量降低到3.5ng。本方法与传统染色方法相比，不仅节约了时间，降低额成本，而且提高了检测的灵敏度。
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