公开(公告)号：CN102925584B

公开(公告)日：2013-12-11

申请号：CN201210494834.3

申请日：2012-11-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 许金俊 ,  曲昌宝 ,  陶建平 ,  刘聪 ,  刘丹丹 ,  曹李琴 ,  侯照峰 ,  宿世杰 ,  郭平 ,  李聪 ,  张祖航

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测火鸡组织滴虫的试剂盒。本发明含有10×等温反应缓冲液、BstDNA聚合酶8000U/mL、l0mMdNTP、25mMMgCl2、200µM内引物、200µM内引物2、l00µM外引物1、100µM外引物2、5M甜菜碱和去离子水的反应液A、反应液B（1000X的荧光染料SYBRGreenⅠ）。通过对鸡肝脏组织样品中DNA提取、火鸡组织滴虫的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测，从而检测出火鸡组织滴虫。解决了现有技术时间长、工作量大、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单，适于现场快速检测。

公开(公告)号：CN1763534A

公开(公告)日：2006-04-26

申请号：CN200510095208.7

申请日：2005-10-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  许金俊 ,  李瑞芳 ,  金文杰 ,  邵红霞

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/531

Abstract: 奶牛结核病的快速检测方法及特异性单克隆抗体BovIFN－γ－4A3、BovIFN－γ－4G5的构建方法，涉及奶牛结核病的检测技术领域。用重组菌诱导表达的融合蛋白GST－BovIFN－γ免疫Balb/c小鼠，通过杂交瘤技术研制出抗BovIFN－γ的单克隆抗体，即获得特异性单克隆抗体BovIFN－γ－4A3和BovIFN－γ－4G5。单抗BovIFN－γ－4A3属于IgG2b亚类，单抗BovIFN－γ－4G5属于IgM亚类，能特异性识别BovIFN－γ。本发明在制备了rBovIFN－γ的基础上，研制出抗BovIFN－γ的单克隆抗体，以单克隆抗体为基础建立快速检测病牛血细胞分泌的IFN－γ量，从而判断奶牛的结核病感染情况。该方法检测步骤简单、敏感性高、快速，整个检测过程只需4小时。

公开(公告)号：CN110484450A

公开(公告)日：2019-11-22

申请号：CN201910676954.7

申请日：2019-07-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陶建平 ,  王乐乐 ,  刘丹丹 ,  苏丁泽阳 ,  高阳 ,  候照峰 ,  宿世杰 ,  许金俊

IPC: C12N1/06 ,  C12N1/10 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明公开了一种艾美耳球虫未孢子化卵囊壁的制备方法。通过0.5 M蔗糖卵囊壁破碎液和1.1 M蔗糖分离液的梯度离心，将卵囊壁从卵囊破碎液中分离纯化。实验证明，采用本方法可实现快速分离纯化艾美耳球虫未孢子化卵囊壁，回收量是传统方法的2倍以上，且纯度高，卵囊壁蛋白结构完整；另外，本方法还具有试剂配制方法简单，操作步骤简单方便等优点，对开展艾美耳球虫的研究实验具有重要价值和很强的实用性。

公开(公告)号：CN103233017B

公开(公告)日：2014-11-05

申请号：CN201310162739.8

申请日：2013-05-06

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陶建平 ,  刘丹丹 ,  曹李琴 ,  许金俊

IPC: C12N15/30 ,  C07K14/455 ,  C12N15/70 ,  A61K48/00 ,  A61P33/02

Abstract: 本发明属于基因工程疫苗领域，具体涉及一种鸡毒害艾美耳球虫配子体抗原基因、表达及其表达产物的应用。该基因的开放阅读框大小为561bp。将其构建为原核表达载体pET28a-Engam22，转化BL21宿主菌后诱导表达。表达产物能被鸡康复血清所识别，显示重组蛋白有免疫原性。该基因构建的重组真核表达质粒pcDNA3.1-Engam22免疫雏鸡，能诱导产生体液免疫与细胞免疫，显示该基因能用于鸡球虫基因工程疫苗的研制。

公开(公告)号：CN101928771A

公开(公告)日：2010-12-29

申请号：CN200910234679.X

申请日：2009-11-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陶建平 ,  许金俊 ,  辛玲

IPC: C12Q1/68 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明属于分子生物鉴定领域，具体涉及一种鸡球虫种类快速鉴定的多重PCR方法，以及检测用试剂盒。所说的鸡球虫种类多重PCR快速检测方法，是以待测样本DNA为模板，以SEQ ID NO.1-6的序列为引物进行多重PCR反应，PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳，根据电泳条带判定样本种类；其中151bp、463bp、303bp大小条带，分别为巨型艾美耳球虫、柔嫩艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫检测阳性。本发明的方法与传统鉴定鸡球虫种类的方法相比具有快速准确敏感的优点。

公开(公告)号：CN1295330C

公开(公告)日：2007-01-17

申请号：CN200510038289.7

申请日：2005-01-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  许金俊 ,  孔桂美 ,  刘岳龙 ,  金文杰

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/63 ,  C12N15/23 ,  A61K38/21

Abstract: 抗病毒活性重组鸡γ-干扰素的制取方法及用途，涉及一种广谱高效抗病毒基因工程产品的制取方法。将ChIFN-γ基因从真核质粒中经双酶切后克隆到转移载体中，获得重组转移质粒pFASTBACl-ChIFN-γ；取DH10Bac感受态细胞，加入1ng pFASTBACl-ChIFN-γ，转座后，用SOC培养基稀释培养物，涂布Luria平板，培养后，挑取白色菌落，Luria平板进行纯化，阳性质粒命名为Bacmid-ChIFN-γ，提取阳性质粒DNA；取上述阳性质粒DNA转染Sf9细胞，制得高抗病毒活性重组鸡γ-干扰素。本发明还在于将该干扰素用于抑制MDV GA对CEF的致病变作用、抑制NDV F48E8在细胞上的增殖、抗AIV(H5N1)病毒对细胞的致病作用。

公开(公告)号：CN1403155A

公开(公告)日：2003-03-19

申请号：CN02138397.9

申请日：2002-10-08

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  许金俊 ,  金文杰 ,  刘岳龙

IPC: A61K38/21 ,  C12N15/81 ,  C07K14/555 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明属于生物技术制药工业中的基因工程生产多肽药物的技术领域。应用一步法逆转录—聚合酶链式反应(RT－PCR)技术对奶牛γ－干扰素(BovIFN－γ)基因的cDNA序列进行扩增，从奶牛脾淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段。将BovIFN－γ基因克隆到大肠杆菌表达载体PGEX－6P－1谷光甘肽－S－转移酶的下游，经IPTG诱导后，表达融合蛋白；或将BovIFN－γ基因克隆到酵母高效表达载体，通过转化酵母细胞，获得阳性克隆，并大量表达基因产物；通过亲和层析纯化，大量制备表达产物，通过细胞病变抑制试验证实，表达产物有极好的抑制VSV病毒的活性。或将BovIFN－γ基因插入到pcDNA3，通过大量制备质粒DNA，以质粒DNA直接注射奶牛乳腔，使其BovIFN－γ基因在乳腺中大量表达，从而达到预防或治疗奶牛隐性乳房炎的目的。