公开(公告)号：CN103233017B

公开(公告)日：2014-11-05

申请号：CN201310162739.8

申请日：2013-05-06

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陶建平 ,  刘丹丹 ,  曹李琴 ,  许金俊

IPC: C12N15/30 ,  C07K14/455 ,  C12N15/70 ,  A61K48/00 ,  A61P33/02

Abstract: 本发明属于基因工程疫苗领域，具体涉及一种鸡毒害艾美耳球虫配子体抗原基因、表达及其表达产物的应用。该基因的开放阅读框大小为561bp。将其构建为原核表达载体pET28a-Engam22，转化BL21宿主菌后诱导表达。表达产物能被鸡康复血清所识别，显示重组蛋白有免疫原性。该基因构建的重组真核表达质粒pcDNA3.1-Engam22免疫雏鸡，能诱导产生体液免疫与细胞免疫，显示该基因能用于鸡球虫基因工程疫苗的研制。

公开(公告)号：CN102925584A

公开(公告)日：2013-02-13

申请号：CN201210494834.3

申请日：2012-11-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 许金俊 ,  曲昌宝 ,  陶建平 ,  刘聪 ,  刘丹丹 ,  曹李琴 ,  侯照峰 ,  宿世杰 ,  郭平 ,  李聪 ,  张祖航

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测火鸡组织滴虫的试剂盒。本发明含有10×等温反应缓冲液、BstDNA聚合酶8000U/mL、l0mMdNTP、25mMMgCl2、200µM内引物、200µM内引物2、l00µM外引物1、100µM外引物2、5M甜菜碱和去离子水的反应液A、反应液B（1000X的荧光染料SYBRGreenⅠ）。通过对鸡肝脏组织样品中DNA提取、火鸡组织滴虫的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测，从而检测出火鸡组织滴虫。解决了现有技术时间长、工作量大、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单，适于现场快速检测。

公开(公告)号：CN103233017A

公开(公告)日：2013-08-07

申请号：CN201310162739.8

申请日：2013-05-06

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陶建平 ,  刘丹丹 ,  曹李琴 ,  许金俊

IPC: C12N15/30 ,  C07K14/455 ,  C12N15/70 ,  A61K48/00 ,  A61P33/02

Abstract: 本发明属于基因工程疫苗领域，具体涉及一种鸡毒害艾美耳球虫配子体抗原基因、表达及其表达产物的应用。该基因的开放阅读框大小为561bp。将其构建为原核表达载体pET28a-Engam22，转化BL21宿主菌后诱导表达。表达产物能被鸡康复血清所识别，显示重组蛋白有免疫原性。该基因构建的重组真核表达质粒pcDNA3.1-Engam22免疫雏鸡，能诱导产生体液免疫与细胞免疫，显示该基因能用于鸡球虫基因工程疫苗的研制。

公开(公告)号：CN104561047A

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201410795026.X

申请日：2014-12-18

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陶建平 ,  刘丹丹 ,  曹李琴 ,  朱玉兰 ,  许金俊

IPC: C12N15/30 ,  C07K14/455 ,  C12N15/70 ,  A61K48/00 ,  A61K39/012 ,  A61P33/02

Abstract: 本发明属于基因工程疫苗领域，具体涉及一种鸡毒害艾美耳球虫配子体抗原基因、表达及其表达产物的应用。该基因的开放阅读框大小为1473bp，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。选取编码酪氨酸-丝氨酸和脯氨酸与甲硫氨酸特殊结构域并富含抗原表位的基因片段，构建原核表达载体pET28a(+)-Engam59，转化BL21宿主菌后诱导表达。表达产物能被鸡康复血清识别，显示重组蛋白有免疫原性。用该基因片段构建的重组真核表达质粒pcDNA3.1-Engam59免疫小鼠制备的血清，能与pET28a(+)-Engam59的表达产物特异性结合，显示该基因能用于鸡球虫基因工程疫苗的研制。

公开(公告)号：CN102925584B

公开(公告)日：2013-12-11

申请号：CN201210494834.3

申请日：2012-11-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 许金俊 ,  曲昌宝 ,  陶建平 ,  刘聪 ,  刘丹丹 ,  曹李琴 ,  侯照峰 ,  宿世杰 ,  郭平 ,  李聪 ,  张祖航

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测火鸡组织滴虫的试剂盒。本发明含有10×等温反应缓冲液、BstDNA聚合酶8000U/mL、l0mMdNTP、25mMMgCl2、200µM内引物、200µM内引物2、l00µM外引物1、100µM外引物2、5M甜菜碱和去离子水的反应液A、反应液B（1000X的荧光染料SYBRGreenⅠ）。通过对鸡肝脏组织样品中DNA提取、火鸡组织滴虫的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测，从而检测出火鸡组织滴虫。解决了现有技术时间长、工作量大、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单，适于现场快速检测。