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公开(公告)号：CN109355308A
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201811480768.8
申请日：2018-12-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种培育具有马铃薯Y病毒属广谱病毒抗性的转基因大豆的方法。该方法是通过基因工程的手段沉默大豆中的eIF4E基因获得具有广谱病毒抗性的转基因大豆；优选通过构建SEQ ID NO.1所示的大豆eIF4E基因干扰片段，将其导入大豆获得具有广谱病毒抗性的转基因大豆。按照该方法能够获得具有马铃薯Y病毒属广谱病毒抗性的转基因大豆，为抗病大豆育种工作具有深远意义。
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公开(公告)号：CN108753801A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810548495.X
申请日：2018-05-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了能够抑制农杆菌生长的大豆花叶病毒序列，并证明了该序列能够用于在农杆菌中直接实现重组克隆的筛选。农杆菌是植物转化系统重要宿主菌，但是构建的重组克隆需要在大肠杆菌中筛选之后转入农杆菌。本发明发现了大豆花叶病毒株系SC15具有抑制农杆菌生长的特性，而株系SC3和SC7没有同样的效果；通过病毒序列截短实验，本发明鉴定出SC15中农杆菌生长抑制相关的序列SC15P；通过利用该序列构建与gateway克隆系统兼容载体并进行LR反应及转化实验，最终本发明实现了利用SC15P直接在农杆菌中进行重组克隆的设想。
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公开(公告)号：CN105296531B
公开(公告)日：2018-08-07
申请号：CN201510741506.2
申请日：2015-11-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了大豆延伸因子家族在抗大豆花叶病毒中的应用。大豆延伸因子GmEF1a和GmEF1b可在通过内质网应激调控大豆抗大豆花叶病毒中应用。SMV复制发生在内质网上,需要GmEF1a和GmEF1b的参与,SMV的聚集引起内质网应激反应,沉默GmEF1a和GmEF1b会降低内质网应激反应,植株表现更抗病。可见沉默延伸因子家族GmEF1a基因和GmEF1b基因可用于构建抗SMV病毒的转基因植株。且由于这两个基因都源于大豆,因此,对转基因大豆的安全性有进步提高。
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公开(公告)号：CN103756975B
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201310653591.8
申请日：2013-12-05
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N7/00 , C12Q1/70 , C12Q1/68 , G01N33/569 , C12R1/94
Abstract: 本发明公开了一种感染烟草的大豆花叶病毒的获得方法及其应用。使用保藏号为CCTCC NO：V201349的大豆花叶病毒分离物侵染本氏烟草获得感染烟草的大豆花叶病毒。按照本发明所述的方法获得感染烟草的大豆花叶病毒在验证抗大豆花叶病毒抗性候选基因中的应用。本发明从众多分离物中筛选获得了能够侵染烟草的大豆花叶病毒，通过将该分离物侵染烟草并通过调查发病症状、南农1138-2回接实验、ELISA以及RT-PCR检测手段进行了证实。该发明获得了感染烟草的大豆花叶病毒，使得在烟草上验证大豆抗SMV候选基因功能成为现实，打破了大豆遗传转化难的限制。
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公开(公告)号：CN113493794B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202110583727.7
申请日：2021-05-27
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/54
Abstract: 本发明公开了一个对大豆花叶病毒具有抗性的基因GmGRX4及其应用。基因GmGRX4的cDNA核甘酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码的蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。利用VIGS使抗病品种科丰1号中的GmGRX4基因沉默后接种SC3株系，抗病品种科丰1号出现花叶症状。而在感病品种南农1138‑2中过表达GmGRX4基因之后，接种SC3株系，南农1138‑2对大豆花叶病毒产生了抗性。证明GmGRX4基因的表达量降低能改变抗性品种的抗病性，GmGRX4基因的表达量提高能使感病品种获得抗性。利用转基因技术在感病品种中导入GmGRX4基因，可改良受体品种对大豆花叶病毒的抗性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113493794A
公开(公告)日：2021-10-12
申请号：CN202110583727.7
申请日：2021-05-27
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/54
Abstract: 本发明公开了一个对大豆花叶病毒具有抗性的基因GmGRX4及其应用。基因GmGRX4的cDNA核甘酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码的蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。利用VIGS使抗病品种科丰1号中的GmGRX4基因沉默后接种SC3株系，抗病品种科丰1号出现花叶症状。而在感病品种南农1138‑2中过表达GmGRX4基因之后，接种SC3株系，南农1138‑2对大豆花叶病毒产生了抗性。证明GmGRX4基因的表达量降低能改变抗性品种的抗病性，GmGRX4基因的表达量提高能使感病品种获得抗性。利用转基因技术在感病品种中导入GmGRX4基因，可改良受体品种对大豆花叶病毒的抗性。
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公开(公告)号：CN111440818A
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN202010095003.3
申请日：2020-02-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了可侵染烟草的大豆花叶病毒侵染性克隆载体和农杆菌菌株及其应用。可侵染烟草的大豆花叶病毒侵染性克隆载体序列如SEQ ID NO.1所示。所述的大豆花叶病毒侵染性克隆载体pCB301-SMV(SC7)在侵染烟草中应用。本发明中，我们选择能够侵染烟草的大豆花叶病毒株系(SC7)构建侵染性克隆载体，转化农杆菌并注射烟草后，成功的在烟草上形成了系统侵染。这将为烟草在大豆花叶病毒研究方面的应用奠定坚实可靠的基础。
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公开(公告)号：CN108753801B
公开(公告)日：2020-05-29
申请号：CN201810548495.X
申请日：2018-05-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了能够抑制农杆菌生长的大豆花叶病毒序列，并证明了该序列能够用于在农杆菌中直接实现重组克隆的筛选。农杆菌是植物转化系统重要宿主菌，但是构建的重组克隆需要在大肠杆菌中筛选之后转入农杆菌。本发明发现了大豆花叶病毒株系SC15具有抑制农杆菌生长的特性，而株系SC3和SC7没有同样的效果；通过病毒序列截短实验，本发明鉴定出SC15中农杆菌生长抑制相关的序列SC15P；通过利用该序列构建与gateway克隆系统兼容载体并进行LR反应及转化实验，最终本发明实现了利用SC15P直接在农杆菌中进行重组克隆的设想。
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公开(公告)号：CN108823226A
公开(公告)日：2018-11-16
申请号：CN201810803679.6
申请日：2018-07-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种中国大豆花叶病毒侵染性克隆载体及其构建方法和应用。本发明通过分段酶切连接的方法将SMV中国株系SC3基因组构建至载体PBR322中，成功构建了SMV全长cDNA侵染性克隆载体，并将报告基因YFP插入到SMV基因组P1和Hc-Pro之间，含报告基因YFP的侵染性克隆载体可以在荧光显微镜下直接观察大豆体内YFP的表达(绿色荧光)，从而确定SMV出现的位置和时间。本发明通过表型分析、RT-PCR和ELISA等多种方法对SC3侵染性克隆载体的侵染活性进行检测，证明该载体在感病大豆品种南农1138-2中具有侵染活性。该载体能够实现在DNA水平上开展RNA病毒SMV的相关研究。
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公开(公告)号：CN105400800B
公开(公告)日：2018-04-03
申请号：CN201510881296.7
申请日：2015-12-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种调控植物开花的大豆E3泛素连接酶基因GmPUB2的应用。调控植物开花的大豆E3泛素连接酶基因GmPUB2在调控植物开花中的应用。将GmPUB2基因通过植物表达载体转入目的植物内获得晚开花植物。将GmPUB2基因通过基因沉默载体转入目的植物内获得早开花植物。将目标基因GmPUB2转入拟南芥。通过与野生型拟南芥相比，证明转基因植株的抽薹及开花时间明显晚于野生型，说明GmPUB2基因有推迟植物开花的作用。利用构建的GmPUB2基因沉默载体，对过表达目标基因GmPUB2的转基因拟南芥进行沉默，证明沉默后的植株开花时间明显早于对照植株。
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