一种高度特异性的单分子荧光检测方法

    公开(公告)号:CN110208226A

    公开(公告)日:2019-09-06

    申请号:CN201910299030.X

    申请日:2019-04-15

    Abstract: 本发明公开了一种高度特异性的单分子荧光检测方法。所述单分子检测方法包括如下步骤:(1)将两条识别探针与待检测的目标物结合,形成复合物;(2)将捕获探针固定于玻片上,并加入复合物,捕获探针与一条识别探针结合;(3)向玻片上加入带荧光标记的信号探针,信号探针与两条识别探针动态结合;(4)将玻片置于显微镜载物台上进行监测,利用电子增强型相机记录单分子荧光时间影像序列,筛选得到荧光强度-时间轨迹呈现ON-OFF交替变化且荧光的ton和toff相对较短的单分子点即为目标物。本发明能够在单分子水平直接指认目标物分子,高度可信的区分目标物与非目标物,可以大幅度提高单分子荧光检测的灵敏度、特异性和重复性。

    肿瘤特异性酶响应的光动力治疗纳米材料及其制备与应用

    公开(公告)号:CN115998862A

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202111225875.8

    申请日:2021-10-21

    Abstract: 本发明提供一种肿瘤特异性酶响应的光动力治疗纳米材料,由金属有机框架材料、名为a链的单链DNA和名为b链的单链DNA构成;所述金属有机框架材料为表面含有丰富的不饱和金属配位点的纳米粒子;所述b链含有与a链的反向互补区域,所述反向互补区域内修饰有淬灭基团并含有脱嘌呤嘧啶位点,所述脱嘌呤嘧啶位点切除后将从所述反向互补区域游离出修饰有淬灭基团的短链;所述a链5’端修饰有磷酸基团,所述a链和所述b链反向互补结合为双链DNA,并通过磷酸基团和金属有机框架材料中的不饱和金属配位点的相互作用固定于所述金属有机框架材料的表面。本发明的纳米材料实现了对肿瘤细胞的特异性光动力治疗。

    用于单碱基突变特异性检测的差异化反应路径探针组合物及相应的检测方法

    公开(公告)号:CN119932168A

    公开(公告)日:2025-05-06

    申请号:CN202311451350.5

    申请日:2023-11-02

    Abstract: 本发明公开了用于单碱基突变特异性检测的探针组合物及相应的检测方法。本发明的检测方法利用差异化反应路径探针组合物和λExo实现野生型目标物和突变型目标物运行不同反应路径,从而产生指纹型荧光信号,这种指纹型荧光信号与野生型目标物和突变型目标物核酸序列严格对应,高度可信地区分野生型目标物、突变型目标物与非目标序列。本发明还将设计的单碱基突变特异性检测探针组合物与机器学习算法程序结合,将获得的指纹型荧光信号数据输入到机器学习算法中从而得到更可靠的检测结果。本发明能够直接指认未知样品,并在20min内得到检测结果,通过机器学习算法程序确认是否含有目标分子,大幅度提高了检测的准确率和检测效率。

    一种用于抗肿瘤药物递送的核酸纳米管及其应用

    公开(公告)号:CN116445473A

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202210012929.0

    申请日:2022-01-06

    Abstract: 本发明公开了一种核酸纳米管。本发明的核酸纳米管在特定位点含有尿嘧啶碱基,利用癌细胞细胞质中UDG酶和APE1酶活性显著高于正常细胞特性,使尿嘧啶在UDG酶的催化下发生反应,形成AP site,而后在APE1酶的作用下AP site被切割导致DNA单链的断裂、单体上位点的断裂,最终导致整个核酸纳米管解体。具有高度精准性,可将抗癌药物靶向递送到肿瘤细胞中,有效杀伤肿瘤细胞并且避免对正常细胞的伤害。该纳米载体安全无毒、载药量高,并能实时监控,与传统的核酸纳米管相比具有更广泛的应用前景。

    一种响应双链核酸的DNA分子电路及其使用方法

    公开(公告)号:CN116024309A

    公开(公告)日:2023-04-28

    申请号:CN202111239968.6

    申请日:2021-10-25

    Abstract: 本发明提供一种信号识别传感元件以及以之为基础构建的响应双链核酸的DNA分子电路。本发明所述信号识别传感元件包含名称为单链核酸输出的一条单链DNA和名称为单链DNA探针的一条单链DNA。本发明的响应双链核酸的DNA分子电路利用核酸外切酶驱动目标双链DNA置换出核酸外切酶模块中的单链核酸输出,游离的单链核酸输出被生物传感器响应。本发明响应双链核酸的DNA分子电路可在37℃的环境下直接响应双链核酸,扩展了DNA分子电路底物库,有效提高了DNA分子电路的响应和处理信息功能。

    一种可重复利用的核酸荧光探针及相应的核酸检测方法

    公开(公告)号:CN112921120B

    公开(公告)日:2022-07-05

    申请号:CN202110223658.9

    申请日:2021-03-01

    Abstract: 本发明公开了一种可重复利用的核酸荧光探针,包含荧光探针、淬灭探针以及含有与目标物结合区域的DNA。核酸荧光探针荧光基团初始为未激活状态,目标物能通过链置换结合到核酸荧光探针的目标物结合的区域将其变构为与核酸外切酶有较高亲和性的底物复合物,此时荧光基团被激活;核酸外切酶切割底物复合物后导致目标物降解,核酸荧光探针通过重新杂交回到初始未激活状态,实现自动重置,从而达到可重复使用的效果。本发明的探针系统可以重复使用至少5次,可以在均质溶液中运行,有效节约试剂成本,为短时间内需应对大量临床样本的核酸检测场景提供解决方案。本发明中的方法将在核酸检测和其他类型的液体活检中广泛应用。

    一种单碱基突变检测方法
    18.
    发明公开

    公开(公告)号:CN106755460A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710014617.2

    申请日:2017-01-10

    Abstract: 本发明涉及一种核酸短暂杂交与磁分离相结合的单碱基突变检测方法,其包括以下步骤:A,根据目标基因设计捕获探针与信号探针;B,将与捕获探针偶联的磁球配置成磁球溶液,加入信号探针和待测样本进行核酸杂交;C,核酸杂交结束后进行磁分离,然后将磁球重悬于低金属离子的溶液中;D,再次进行磁分离,对获得上清液进行检测,判断待检样本中是否存在单碱基突变;其中,所述捕获探针与目标基因的非突变部分完全互补;所述信号探针与目标基因的突变型基因完全互补,与目标基因的野生型基因形成单碱基错配。该检测方法快速,能用于低丰度突变检测。

    一种核酸检测系统及其在检测DNA突变中的应用

    公开(公告)号:CN116732140A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202210201735.5

    申请日:2022-03-02

    Abstract: 本发明公开了一种核酸检测系统及其在检测DNA突变中的应用。本发明公开的核酸检测系统由Cas12a、crRNA与A、B、C、E、F和G六条单链DNA组成;A由A1、A2、A3、A4连接得到,A3与待测DNA在所述crRNA的引导下被所述Cas12a切割得到的粘性末端反向互补;B与A4反向互补;C由C1、C2连接得到,C1与A2反向互补;E由E1、E2连接,E1与A3的5′端的4个核苷酸反向互补,E2与C1序列完全相同或部分相同;F的序列与C2反向互补、3′末端标记荧光淬灭基团;G的序列与A1反向互补、5′末端标记荧光基团。本发明的系统可以达到检测单个拷贝的灵敏度和1%的区分度(突变型/野生型)。

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