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公开(公告)号:CN110229870A
公开(公告)日:2019-09-13
申请号:CN201910270772.X
申请日:2019-04-04
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明公开了一种细胞内miRNA定量方法。所述方法包括如下步骤:(1)离体的细胞经固定后进行细胞核染色;(2)向细胞中加入含有荧光探针的缓冲液,荧光探针与细胞内待检测miRNA发生可逆结合;(3)将细胞置于TIRF显微镜的载物台上进行检测,在明场下记录细胞形态,在宽场荧光记录细胞核位置,在HILO模式下记录单分子荧光强度-时间轨迹;(4)通过信号过滤,获得单分子荧光强度-时间轨迹呈现ON-OFF交替变化的单分子成像图,即为所述细胞内miRNA单分子成像图,经计数即得到细胞内miRNA的数量。本发明提供了一种“原位定量成像”的方式,利用高辨识度的单分子动力学指纹信号,对细胞内miRNA进行单分子定位与精准计数,突破胞内miRNA定量依赖于RNA提取的技术瓶颈。
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公开(公告)号:CN116024309A
公开(公告)日:2023-04-28
申请号:CN202111239968.6
申请日:2021-10-25
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6825 , C12N15/11 , G06N3/00
Abstract: 本发明提供一种信号识别传感元件以及以之为基础构建的响应双链核酸的DNA分子电路。本发明所述信号识别传感元件包含名称为单链核酸输出的一条单链DNA和名称为单链DNA探针的一条单链DNA。本发明的响应双链核酸的DNA分子电路利用核酸外切酶驱动目标双链DNA置换出核酸外切酶模块中的单链核酸输出,游离的单链核酸输出被生物传感器响应。本发明响应双链核酸的DNA分子电路可在37℃的环境下直接响应双链核酸,扩展了DNA分子电路底物库,有效提高了DNA分子电路的响应和处理信息功能。
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