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公开(公告)号：CN113406065A
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110676027.2
申请日：2021-06-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟血清抗体IPMA检测试剂及其制备方法，所述检测试剂中非洲猪瘟病毒选择非洲猪瘟减毒株(HLJ/18‑7GD)，感染细胞选择PK15细胞作为非洲猪瘟减毒株(HLJ/18‑7GD)的接种细胞。检测用抗原是感染细胞的全病毒，检测出的抗体能够较真实地体现抗体本身或接近抗体本身的血清反应，在非洲猪瘟缺乏针对所有毒株有效中和抗体的条件下，IPMA具备成为ASF血清学检测“金标准”的潜在价值。本发明的IPMA检测试剂在检测的敏感性上高于ELISA，特异性和检测时间上与ELISA检测相当，但对仪器设备要求较低，只需借助普通光学显微镜进行观察和判定，同时，IPMA检测结果可长期保存，便于后期实验结果整理与档案调取。
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公开(公告)号：CN113373171A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110579577.2
申请日：2021-05-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种在大肠杆菌内稳定遗传的酵母‑大肠杆菌穿梭质粒及其构建方法。所述的穿梭质粒是基于细菌‑酵母人工染色体，从pGEN‑MCS质粒上通过PCR扩增得到hok‑sok和par元件，然后通过连接将稳定遗传元件hok‑sok和parA构建入细菌‑酵母人工染色体中，进而获得方便克隆长片段DNA、无抗性且在大肠杆菌内稳定遗传的酵母‑大肠杆菌穿梭质粒。优选的，所述的穿梭质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的穿梭质粒载体，不但可实现酵母、细菌内穿梭，可在酵母中通过同源重组进行多片段DNA组装，还可以稳定的在大肠杆菌中复制、遗传，便于进行DNA提取。
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公开(公告)号：CN113350495A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110246641.5
申请日：2021-03-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: A61K39/116 , A61K39/09 , A61K39/102 , A61K39/39 , A61P11/00 , A61P31/04 , C12N15/62 , C12N15/70 , C07K19/00
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌病‑副猪嗜血杆菌病‑猪传染性胸膜肺炎三联亚单位疫苗及其制备方法。本发明三联亚单位疫苗含有猪链球菌抗原蛋白MRP、SLY和EF，副猪嗜血杆菌抗原蛋白AfuA、OppA2、CdtB、OppA，以及胸膜肺炎放线杆菌抗原蛋白ApxI、ApxII和OMP。实验证明，该疫苗能激发小鼠的强烈的免疫反应，对不同血清型的猪链球菌、副猪嗜血杆菌和胸膜肺炎放线杆菌攻毒小鼠均具有良好的交叉保护效果，充分说明本发明中制备的三联亚单位疫苗具有良好的保护效果。因此，本发明的提出为研制高效、广谱、廉价的猪链球菌病‑副猪嗜血杆菌病‑猪传染性胸膜肺炎疫苗奠定了坚实的基础，为猪链球菌病、副猪嗜血杆菌病以及猪传染性胸膜肺炎的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN109321598B
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN201811128501.2
申请日：2018-09-27
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)的反向遗传方法和应用。本发明将辅助质粒和蓝舌病病毒PCR产物分两次转染BHK‑21细胞从而拯救病毒。本发明的蓝舌病病毒反向遗传拯救方法可用于BTV的致病机制研究、免疫机制研究以及重组疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN108359641B
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN201810235163.6
申请日：2018-03-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株稳定表达全猪源抗猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus，PEDV)中和抗体PC10‑IgA的CHO细胞系及其构建方法和应用。所述的细胞系命名为PC10‑IgA‑CHO，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.15293。此外，本发明还提出了一种由所述的CHO细胞系分泌产生的全猪源抗猪流行性腹泻病毒的PC10‑IgA中和抗体，该中和抗体具有中和PEDV病毒的能力，同时可以与感染Vero‑E6细胞的病毒蛋白结合，具有抗PEDV的生物学活性和功能。通过对该细胞系进行培养，可获得大量的具有抗PEDV作用的PC10‑IgA中和抗体，因此，本发明的提出使治疗性抗PEDV IgA抗体大量的获得和使用成为了可能，为PEDV的预防和治疗提供了新的技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113063939A
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN202110244444.X
申请日：2021-03-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明提供了一种传染性支气管炎病毒的双抗夹心ELISA检测试剂盒和检测方法以及应用，属于生物技术领域。为了有效的提高传染性支气管炎病毒检测的灵敏度、特异性和总符合率。本发明一种传染性支气管炎病毒的双抗夹心ELISA检测试剂盒和方法，用纯化的单克隆抗体4F10株作为固相抗体结合在固相载体表面，单克隆抗体6H3株作为酶标抗体，建立一种能够快速检测传染性支气管炎病毒抗原的双抗夹心ELISA方法。该方法简便、特异、敏感、准确率高，能够在实际生产中快速诊断鸡群是否感染鸡传染性支气管炎病毒，为该病的免疫防控提供依据。
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公开(公告)号：CN112501273B
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN202011488629.7
申请日：2020-12-16
Applicant: 暨南大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12N15/85 , C07K16/10
Abstract: 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量马源抗体。该方法保留了轻链重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、效价高、抗体亲和力好、特异性强、实验周期短等优势，为研制传染性疾病及自身免疫性疾病的单克隆抗体的预防与治疗性药物或诊断性抗体提供了一条广阔的途径，同时也为生命科学基础研究获得外源性蛋白的抗体提供了一个更加高效、简单、快速的方法。
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公开(公告)号：CN112941088A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110155985.5
申请日：2021-02-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种与布氏杆菌毒力相关的基因及其在布氏杆菌毒力评价及制备弱毒布氏杆菌中的应用。本发明首先利用蛋白结构域及3D结构预测鉴定到一种与布氏杆菌毒力相关的基因——abcS基因。利用RecA同源重组的方法，以卡那霉素抗性基因作为筛选标记替换abcS基因，构建了布氏杆菌abcS基因缺失株M28ΔabcS。荧光定量PCR试验表明，M28ΔabcS突变株中毒力因子四型分泌系统的表达严重下降。利用Balb/c小鼠持留感染模型评价了布氏杆菌abcS基因对布氏杆菌M28毒力的影响。结果显示：abcS基因缺失显著降低感染时脾脏的肿胀，同时严重影响细菌在小鼠脾脏内复制存活的能力，证实该基因是布氏杆菌M28的毒力相关基因。本发明的提出为布氏杆菌疫苗和药品的研发，提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN112877231A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN201911206844.0
申请日：2019-11-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了具有抑菌和抗氧化活性的乳酸菌及其应用。为了获得安全、具有良好益生特性的菌株，本发明从中国大兴安岭地区的野猪粪便中分离乳酸菌，经16S rDNA鉴定和耐酸、耐胆盐试验初步筛选出了4株候选菌株；本发明进一步通过自凝集和共凝集试验、体外黏附试验、抑菌试验、清除自由基试验和安全性评价，分别检测了4株分离菌株的益生特性和安全性。检测结果表明，GKM5‑30菌株相比于其他的乳酸菌表现出更为优异的黏附能力、凝集能力、抑菌活性及抗氧化能力，具有良好的益生特性和安全性，具备进一步开发益生菌制剂的潜力。
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公开(公告)号：CN112831477A
公开(公告)日：2021-05-25
申请号：CN201911168617.3
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/245 , A61K39/187 , A61K39/12 , A61P31/22 , A61P31/20 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白和猪圆环病毒Cap蛋白的重组伪狂犬病病毒株及其构建方法和用途。本发明通过fosmid基因操纵系统，将PRV TJ株基因组TK和gE/gI基因部分缺失，将Cap与gG(US4)融合，在US9插入E2表达框，拯救表达猪瘟病毒E2蛋白和猪圆环病毒Cap蛋白的重组伪狂犬病病毒株，其在体外的复制和生长动力学与亲本病毒相当，外源基因的插入不影响重组病毒株的遗传稳定性；用该重组伪狂犬病毒株免疫猪，能诱导出较强的PRV特异性体液免疫应答，未显示出任何PRV特异性的临床症状。本发明所构建的重组伪狂犬病病毒株能用于制备预防伪狂犬病、猪瘟病或/和猪圆环病毒所导致疾病疫苗。
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