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公开(公告)号:CN116286679B
公开(公告)日:2023-08-01
申请号:CN202310514420.0
申请日:2023-05-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一株经分离得到的猪流行性腹泻病毒变异株及其应用。属于生物技术领域。本发明发明人采集辽宁某猪场腹泻仔猪的小肠,将阳性病料接种Vero E6细胞分离病毒并继代,期间进行2次噬斑克隆,并通过RT‑PCR、间接免疫荧光试验和透射电镜鉴定,最终证实成功分离纯化得到一株猪流行性腹泻病毒变异株,命名为LNct2a,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC No.45224。将本发明分离的PEDV变异株LNct2a株制成灭活疫苗免疫仔猪后,免疫原性和安全性皆十分良好,可产生较高的中和抗体,最高可达1000倍以上。本发明的提出为猪流行性腹泻的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN114487396A
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202111565323.1
申请日:2021-12-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577 , G01N33/532 , G01N33/58 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了用于检测猪圆环病毒2型的红色乳胶微球免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括PVC底板,以及在PVC底板上从左到右依次组装的结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述的结合垫上涂覆有红色乳胶微球偶联的抗猪圆环病毒2型单克隆抗体7C7,所述的硝酸纤维素膜上设有包被抗猪圆环病毒2型单克隆抗体9H4的检测线以及包被山羊抗鼠IgG的质控线。本发明中标记抗体和捕获抗体是挑选的最为广谱性的单抗,故对三种基因型的PCV2都具有较好的检测敏感性,与其他的病毒均无交叉反应。因此,本发明成功筛选出PCV2的广谱性单抗且成功建立了检测PCV2抗原的红色乳胶微球免疫层析试纸条,为后续的PCV2流行病学调查和净化提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN114487396B
公开(公告)日:2024-11-12
申请号:CN202111565323.1
申请日:2021-12-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577 , G01N33/532 , G01N33/58 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了用于检测猪圆环病毒2型的红色乳胶微球免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括PVC底板,以及在PVC底板上从左到右依次组装的结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述的结合垫上涂覆有红色乳胶微球偶联的抗猪圆环病毒2型单克隆抗体7C7,所述的硝酸纤维素膜上设有包被抗猪圆环病毒2型单克隆抗体9H4的检测线以及包被山羊抗鼠IgG的质控线。本发明中标记抗体和捕获抗体是挑选的最为广谱性的单抗,故对三种基因型的PCV2都具有较好的检测敏感性,与其他的病毒均无交叉反应。因此,本发明成功筛选出PCV2的广谱性单抗且成功建立了检测PCV2抗原的红色乳胶微球免疫层析试纸条,为后续的PCV2流行病学调查和净化提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN110124026B
公开(公告)日:2023-06-20
申请号:CN201910353467.7
申请日:2019-04-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及一种多价免疫原性组合物,其包含猪圆环病毒2型(PCV2)抗原和猪鼻支原体抗原,该组合物能够抵抗猪圆环病毒2型和猪鼻支原体的攻击,不管是临床病理还是解剖病理免疫组与健康对照组无显著差异,而攻毒对照组却出现了显著的临床病理和解剖病理。并且猪鼻支原体能够促进猪圆环病毒2型抗体的滴度,为猪圆环病毒相关疾病的综合防控起到了促进作用。
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公开(公告)号:CN110124026A
公开(公告)日:2019-08-16
申请号:CN201910353467.7
申请日:2019-04-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及一种多价免疫原性组合物,其包含猪圆环病毒2型(PCV2)抗原和猪鼻支原体抗原,该组合物能够抵抗猪圆环病毒2型和猪鼻支原体的攻击,不管是临床病理还是解剖病理免疫组与健康对照组无显著差异,而攻毒对照组却出现了显著的临床病理和解剖病理。并且猪鼻支原体能够促进猪圆环病毒2型抗体的滴度,为猪圆环病毒相关疾病的综合防控起到了促进作用。
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公开(公告)号:CN114958918B
公开(公告)日:2023-08-25
申请号:CN202210728853.1
申请日:2022-06-24
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12Q1/66 , C12N15/113
Abstract: 本发明提供了一种基于猪NLRP6基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体,属于基因工程技术领域,将NLRP6基因启动子连接到pGL3‑Basic质粒中,得到双荧光素酶报告基因载体;所述NLRP6基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。本发明明确了NLRP6基因启动子在NLRP6基因中的具体位置,将NLRP6基因启动子连接到pGL3‑Basic质粒中,得到双荧光素酶报告基因载体具有转录活性。
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公开(公告)号:CN112680421B
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202110136987.X
申请日:2021-02-01
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一株具有广谱性中和猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.13840的杂交瘤细胞分泌产生。所述的单克隆抗体具有广谱性,能够有效中和PEDV‑LNCT2、PEDV‑LNSY和PEDV‑Hjms等G2基因亚型毒株,使其失去感染细胞的能力,也能够中和CV777毒株(G1基因亚型)。鉴于该单克隆抗体的生物学特性以及所具有的广谱性中和PEDV毒株的能力,该单克隆抗体可用于建立一系列包括阻断ELISA、捕获ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和胶体金试纸条等方法在内的PEDV诊断方法,具备广阔的应用价值和研究价值。
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公开(公告)号:CN113981148A
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202111367488.8
申请日:2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6848 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及生物技术技术领域,具体涉及一种鉴别RV感染以及鉴定病毒基因型的方法及其应用。所述的方法包括:引物设计、病毒核酸提取、病毒核酸反转录、PCR扩增和测序分析。本发明提供的优点:操作简单、检测周期短、费用低且检测敏感性高。有效确定轮状病毒感染以及病毒基因型。方法效率高、重复性好且对于新的基因型可以覆盖。能快速、准确鉴定轮状病毒VP4基因型。
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公开(公告)号:CN108359641B
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN201810235163.6
申请日:2018-03-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株稳定表达全猪源抗猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)中和抗体PC10‑IgA的CHO细胞系及其构建方法和应用。所述的细胞系命名为PC10‑IgA‑CHO,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其菌种保藏编号为:CGMCC No.15293。此外,本发明还提出了一种由所述的CHO细胞系分泌产生的全猪源抗猪流行性腹泻病毒的PC10‑IgA中和抗体,该中和抗体具有中和PEDV病毒的能力,同时可以与感染Vero‑E6细胞的病毒蛋白结合,具有抗PEDV的生物学活性和功能。通过对该细胞系进行培养,可获得大量的具有抗PEDV作用的PC10‑IgA中和抗体,因此,本发明的提出使治疗性抗PEDV IgA抗体大量的获得和使用成为了可能,为PEDV的预防和治疗提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN112680421A
公开(公告)日:2021-04-20
申请号:CN202110136987.X
申请日:2021-02-01
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一株具有广谱性中和猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.13840的杂交瘤细胞分泌产生。所述的单克隆抗体具有广谱性,能够有效中和PEDV‑LNCT2、PEDV‑LNSY和PEDV‑Hjms等G2基因亚型毒株,使其失去感染细胞的能力,也能够中和CV777毒株(G1基因亚型)。鉴于该单克隆抗体的生物学特性以及所具有的广谱性中和PEDV毒株的能力,该单克隆抗体可用于建立一系列包括阻断ELISA、捕获ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和胶体金试纸条等方法在内的PEDV诊断方法,具备广阔的应用价值和研究价值。
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