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公开(公告)号：CN119673268A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411770133.7
申请日：2024-12-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术和酶工程技术领域，涉及一种提高醛酮还原酶底物特异性的分子改造方法，是通过组建醛酮还原酶AKR13B3的底物文库和分析动力学参数；对构建醛酮还原酶AKR13B3和辅酶NADPH以及底物3‑keto‑DON的复合结构进行loop结构分析以及氨基酸序列比对来确定突变位点，筛选底物特异性增加的突变体；本发明通过对AKR13B3底物结合袋的入口环区域的几何形状进行了设计，以改变底物偏好性，实现该酶对特定底物的催化活性增加；此外，本发明为设计具有良好底物特异性的醛酮还原酶提供了一个可行的方案，为开发高效酶制剂提供了巨大的希望。
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公开(公告)号：CN110592125B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN201910940788.7
申请日：2019-09-30
Applicant: 南京农业大学 , 南京福斯弗瑞生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及一种食品级降解乙醇的枯草杆菌重组菌的构建方法，属于生物技术领域。乙醇经乙醇脱氢和乙醛脱氢酶的作用下可以转化为对人体相对无毒的乙酸。本发明公开的重组枯草杆菌的构建方法，通过双交换同源重组的方法将两个酶基因的表达盒整合至枯草杆菌的基因组上，实现了乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的胞内共表达，且满足食品级重组微生物的要求。该重组枯草杆菌可以在低pH条件下降解乙醇，可作为口服制剂“帮助”人体代谢部分酒精，起到解酒护肝的作用，在解酒保健品领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN112301139B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202011284156.9
申请日：2020-11-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种检测大肠杆菌O157:H7的特异性靶点、引物、检测方法及应用。本发明的新型靶点，与常规检测靶点相比具有较好的特异性，降低了检测中假阳性的产生；本发明中采用Eva Green第三代饱和荧光染料，该染料具有较高的荧光信号值，提高了检测的灵敏度。同时，该染料即使在高浓度使用时，也为表现出PCR的抑制效果，大幅了检测时熔解曲线的分辨率，进而改善了本发明的检测准确性；检测方法便捷，方便观察，且无需繁琐的电泳操作，检测时间缩短在12h以内；检测过程不涉及抗体，检测成本低，可满足一般实验室的检测需求。
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公开(公告)号：CN114712485B
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202210111873.4
申请日：2022-01-27
Applicant: 南京农业大学 , 南京福斯弗瑞生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种脂肽surfactin在预防或缓解Ⅱ型糖尿病方面的应用，属于食品微生物领域。该surfactin来源于保藏编号为CGMCC No:6249的解淀粉芽孢杆菌fmb50(Bacillus amyloliquefaciens fmb50)。其一级结构式为：其中n＝12‑14。该surfactin能够有效降低Ⅱ型糖尿病小鼠的空腹血糖，增加口服葡萄糖耐受，调节肝脏中糖代谢和脂质代谢的平衡；另外，surfactin也具有优化肠道菌群结构的能力，具有良好的益生功能。可以在预防或缓解Ⅱ型糖尿病引起的脂肪肝方面的应用，改善Ⅱ型糖尿病引起的肝脏中的糖代谢紊乱或改善Ⅱ型糖尿病引起的肠道菌群紊乱。
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公开(公告)号：CN116210766A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202211368136.9
申请日：2022-11-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高酸奶黏度和益生活性的方法，利用植物乳杆菌发酵酸奶，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌cyaA超量表达菌株。该菌株通过一种新的CRP类似物与cAMP形成复合物激活植物乳杆菌胞外多糖合成，提高植物乳杆菌胞外多糖的产量，增加酸奶黏度。将植物乳杆菌发酵的碳源设定为麦芽糖。本发明通过分析多糖生物合成簇，鉴定与启动子结合的转录调节因子，以阐明了麦芽糖增加EPS产量的调节机制，并将其用于改善酸奶的质地，在不使用或者大大降低使用添加剂的情况下，提高了酸奶的黏度和益生活性，降低了生产成本，简化了生产工艺，提高了发酵乳的安全性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116179585A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202211373171.X
申请日：2022-11-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/74 , C12N15/31 , C12N1/21 , C07K14/335 , C12R1/25
Abstract: 本发明公开了一种提高植物乳杆菌环境胁迫耐受性的方法，包括敲除转录抑制因子LsrR的步骤，通过构建转录抑制因子LsrR的敲除质粒并将其导入植物乳杆菌中，实现敲除转录抑制因子LsrR，所述环境胁迫为恶劣温度条件、酸碱条件以及胆盐条件中的一种或者几种。本发明鉴定了植物乳杆菌中的转录调控因子并阐明调控多糖合成的调控机制。将基因组数据挖掘与共沉淀共沉淀分析相结合，以确定植物乳杆菌特有的调节蛋白。使用电泳迁移率变动分析(EMSA)来评估该调节剂与启动子DNA的结合以催化多糖合成，并探讨了植物乳杆菌对胆汁盐、冻干、温度、pH和AI‑2的反应机制。提供了一株环境胁迫耐受增强的植物乳杆菌，具体为植物乳杆菌lsrR敲除菌株，增强了植物乳杆菌对环境胁迫的耐受。
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公开(公告)号：CN109182313B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN201811168269.5
申请日：2018-10-08
Applicant: 南京福斯弗瑞生物科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种纳豆激酶、其表达载体的构建及生产方法。它是以纳豆芽孢杆菌（Bacillus natto）基因组数据为模板，扩增纳豆激酶基因，通过自主复制性质粒和整合型质粒的方法在地衣芽孢杆菌中表达。本发明还对表达框的启动子和信号肽进行选择，得到一种能够在地衣芽孢杆菌中高效分泌表达的重组菌株，并且实现了在50L发酵罐中的小试生产，产品活力达到15000FU/g。
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公开(公告)号：CN114574382A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210049748.5
申请日：2022-01-17
Applicant: 南京农业大学 , 南京福斯弗瑞生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一株具有预防或缓解高尿酸血症的鼠李糖乳杆菌fmb14及应用，属于食品微生物领域。从甘肃省张掖市农家自制酸奶中筛选出的鼠李糖乳杆菌fmb14，在模拟胃肠道环境中的存活率达到58.0％，而对肠道细胞的黏附率为50.0％。所述鼠李糖乳杆菌fmb14在体外对肌苷的降解率达到36.4％。灌胃所述鼠李糖乳杆菌fmb14悬液能显著改善高肌苷饮食引起的小鼠尿酸水平增加，将高尿酸模型小鼠血清尿酸水平由179.1μmol/L降低至113.2μmol/L，同时降低小鼠全身炎症程度，修复高尿酸血症引起的肠道菌群紊乱。本发明的鼠李糖乳杆菌fmb14可用于制备预防或缓解高尿酸血症及其相关症状发生的药物或功能性食品，具有非常广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN109265525B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN201811021326.7
申请日：2018-09-03
Applicant: 南京福斯弗瑞生物科技有限公司 , 南京农业大学
IPC: C07K14/335 , C12N15/31 , C12N15/70 , C07K1/113 , A23C3/08 , A23L3/3526 , A23L29/00
Abstract: 本发明公开了瑞士乳杆菌素及其表达载体的构建与应用。它是以嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus NX2‑6）基因组测序数据为基础，通过生物信息学的方法得到瑞士乳杆菌素的基因，并且在大肠杆菌中异源表达。本发明通过对瑞士乳杆菌素复性的缓冲液及参数的选择，实现了瑞士乳杆菌素NX267和NX371的高效表达和复性。本发明还利用复性后的瑞士乳杆菌素控制人工污染牛奶中的微生物的数量，在25℃条件下，可显著降低牛奶中微生物的数量，为瑞士乳杆菌素作为绿色食品添加剂奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109097316B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN201811024408.7
申请日：2018-09-04
Applicant: 南京农业大学 , 南京福斯弗瑞生物科技有限公司
Abstract: 本发明通过过表达degU基因提高抗真菌肽bacillomycin D产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以CGMCC No.0943枯草芽孢杆菌fmbJ为出发菌株，以大肠杆菌‑枯草芽孢杆菌穿梭克隆载体pCBS为骨架构建一个基因过表达载体pCBS‑LPDegUR，利用同源重组原理，通过双交换过程在淀粉酶位点敲入枯草芽孢杆菌fmbJ基因组DegU基因的方法构建了一株高产bacillomycin D菌株fmbJdegU。经过高效液相色谱分析，确定过表达DegU基因的菌株产bacillomycin D的能力大幅度提高。
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