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公开(公告)号：CN104232558A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410462541.6
申请日：2014-09-12
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种基因工程领域的基于外切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和谷胱甘肽标签的引物进行PCR扩增得到编码外切葡聚糖酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，再将获得的连接产物转入大肠杆菌表达菌株内，获得外切葡聚糖酶过表达重组菌株。本发明通过构建外源表达载体，优化蛋白诱导表达的条件和融合标签等方法，实现了外切葡聚糖酶的胞外过表达。
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公开(公告)号：CN104232554A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410462373.0
申请日：2014-09-12
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种基因工程领域的木糖苷酶的工程菌，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和聚组氨酸标签的引物进行PCR扩增得到编码木糖苷酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，再将获得的连接产物转入大肠杆菌表达菌株内，获得木糖苷酶过表达重组菌株。本发明针对现有技术存在的由于木糖苷酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成，此外本发明通过在表达重组蛋白C端添加聚组氨酸标签的方法，提高蛋白活性的同时也保证了纯化后木糖苷酶的纯度；此外，本发明通过载体信号肽实现了目的蛋白的周质空间表达，提高了木糖苷酶的活性。
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公开(公告)号：CN104152392A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410374667.8
申请日：2014-07-31
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域的半纤维素酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA经过全基因合成构建得到的pUC57‐XL载体为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增并对应分别得到编码木聚糖酶的核苷酸序列XL和编码木糖苷酶的核苷酸序列XO；然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1，最终重组共表达载体pETDuet‐XL‐XO；之后将该重组共表达载体转化到大肠杆菌表达菌株内，获得转基因共表达菌株。本发明能够应用基因工程手段实现木聚糖酶和木糖苷酶体外的大量表达合成，最终实现半纤维素的原位快速降解。
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公开(公告)号：CN104140944A
公开(公告)日：2014-11-12
申请号：CN201410373906.8
申请日：2014-07-31
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: Y02A40/12
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域的硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增依次得到编码硝酸盐还原酶催化亚基及电子转移亚基的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1，最终获得重组共表达载体pETDuet‐NB‐NA；之后将该硝酸盐还原酶表达载体转化到大肠杆菌表达菌株。本发明针对现有技术存在的由于硝酸盐还原酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，应用基因工程手段实现硝酸盐还原酶体外的大量表达合成，对于次生盐渍化土壤的快速修复乃至实现精准农业具有重大意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103881958A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201410126924.6
申请日：2014-03-31
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物工程技术领域的基于β‐葡萄糖苷酶的工程菌及其实现方法，该β‐葡萄糖苷酶基因克隆自灰色链霉菌(Streptomyces？griseorubens)JSD‐1，将其连接到表达载体上得到重组表达载体，进一步将该重组表达载体导入大肠杆菌并诱导合成β‐葡萄糖苷酶。本发明克服现有技术中β‐葡萄糖苷酶多为胞内酶且表达量非常低等不足，应用基因工程菌表达本发明所述的β‐葡萄糖苷酶基因制备β‐葡萄糖苷酶，可为工业化发酵生产β‐葡萄糖苷酶提供一种新方法。
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公开(公告)号：CN103868858A
公开(公告)日：2014-06-18
申请号：CN201410074713.2
申请日：2014-03-03
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N21/25
Abstract: 本发明公开了一种确定盐渍土主导盐分光谱响应最佳波段的方法。该方法通过具有特定采样间隔的光谱仪器检测盐渍土样本，得到光谱曲线，以特定的波长将光谱曲线分段，对各波段中的反射率与主导盐分含量做相关性分析，选择相关系数大于设定值的为“初级条带”，对其反射率求平均值，绘制平均值与主导盐分含量的散点图，拟合并选取决定系数最大的波段为“次级条带”；按照原采样间隔，再做相关性分析，根据相关系数确定“三级条带”；对“三级条带”内的反射率求平均值，再做相关性分析，选取相关系数大于设定值，且极显著的波段，即为盐渍土样本的最佳波段。用本发明的方法确定的最佳波段具有数目少、范围窄、基于全波段、较精确等优点。
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公开(公告)号：CN103245652A
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201310180780.8
申请日：2013-05-16
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种水质检测技术领域的利用功能核酸形成G-四联体淬灭荧光检测铅离子的方法，通过使用羧基荧光素标记功能核酸，构建铅离子检测体系，当检测体系中加入铅离子后，铅离子促进功能核酸形成G-四联体结构，引起整个体系的荧光信号在520nm左右发生显著变化，且荧光信号变化与铅离子浓度呈现正向关系，然后采用荧光光度计进行荧光光谱扫描得到荧光淬灭率标准曲线；测试时将待测水样与超纯水，即对照样分别和功能核酸母液混合后，对两个混合产物在480nm波长处的荧光淬灭率对照荧光淬灭率标准曲线得到待测水样中的铅离子浓度。本发明克服了现有功能核酸检测铅离子需要引入众多辅助物、涉及复杂的催化反应等缺陷，采用简单操作实现最低检测限为0.77ppb、低成本且高效的水体铅离子检测。
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公开(公告)号：CN103163127A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310072069.0
申请日：2013-03-06
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种利用血红素过氧化物酶催化活性，通过比色法检测水体三价砷的方法，氯化血红素具有辣根过氧化物酶的活性，在过氧化氢的存在下可以催化显色底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)发生氧化还原反应，使溶液发生肉眼可变的颜色变化，核酸适配体的加入可以抑制催化活性，当向溶液中加入三价砷后，催化活性得到恢复，导致整个体系的颜色发生显著变化，且在442nm处的吸光度与三价砷浓度呈现正向关系，因而该方法可用于水体三价砷的检测。本方法提供的检测方法灵敏度高选择性好，最低检测限为1ppb，操作简便且不需要依赖大型仪器设备，可用于饮用水三价砷检测。
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公开(公告)号：CN103160504A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310066183.2
申请日：2013-03-01
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种食品安全技术领域的用于重金属铅的快速检测的核酸荧光探针及其检测方法，通过对比探针中加入其它五种金属离子Zn2+、Cd2+、Cu2+、Mg2+、Mn2+在260nm处的荧光强度，得到所述探针对于铅离子的特异性结果，并通过荧光强度变化实现Pb2+的定性检测；通过对探针中加入已知浓度的Pb2+，并且在260nm处扫描荧光强度，从而构建出Pb2+浓度与荧光强度之间检测体系及其线性关系曲线；随后将待测样品在260nm处扫描出的荧光强度值带入线性关系曲线，从而得到Pb2+的浓度并实现定量检测。本发明检测过程简单快速，为是否需要进行后续的精准检测提供依据，为加强我国环境和食品安全控制和监督提供技术支撑。
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