基于谷氨酸脱氢酶的工程菌及其实现方法

    公开(公告)号:CN104498419A

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201410705878.5

    申请日:2014-11-27

    CPC classification number: C12N9/0016 C12P13/14 C12Y104/01002

    Abstract: 一种灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)胞内谷氨酸脱氢酶编码基因及其应用。通过将该谷氨酸脱氢酶编码基因构建到表达载体上,并将该重组表达载体导入大肠杆菌进而得到可发酵合成谷氨酸脱氢酶的转基因重组大肠杆菌。本发明克服现有技术中由于谷氨酸脱氢酶多为胞内表达且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足,应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成。此外,本发明通过在重组蛋白添加聚组氨酸标签的方法,方便了后期蛋白的纯化。本发明可为谷氨酸脱氢酶的规模化发酵生产提供一种新方法。

    基于谷氨酸合酶的工程菌及其实现方法

    公开(公告)号:CN104120103A

    公开(公告)日:2014-10-29

    申请号:CN201410373726.X

    申请日:2014-07-31

    Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域的谷氨酸合酶的工程菌及其实现方法,以灰略红链霉菌基因组DNA为模板,与含有酶切位点的引物进行PCR扩增依次得到编码谷氨酸合酶小亚基及大亚基的核苷酸序列;然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1,最终获得重组共表达载体pETDuet‐GG‐GF;之后将该谷氨酸合酶表达载体转化到大肠杆菌表达菌株。本发明针对现有技术存在的由于谷氨酸合酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足,应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成,此外本发明通过在重组蛋白添加聚组氨酸标签的方法,方便了后期蛋白的纯化。

    基于内切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法

    公开(公告)号:CN103881957A

    公开(公告)日:2014-06-25

    申请号:CN201410126921.2

    申请日:2014-03-31

    Abstract: 一种生物工程技术领域的基于内切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法,该内切葡聚糖酶基因克隆自灰色链霉菌(Streptomyces?griseorubens)JSD‐1,将其连接到表达载体上得到重组表达载体,进一步将该重组表达载体导入大肠杆菌并诱导合成内切葡聚糖酶。本发明克服现有技术中的内切葡聚糖酶表达量为胞内酶,应用范围严重受限等不足,应用基因工程菌表达本发明所述的内切葡聚糖酶基因制备内切葡聚糖酶,可为内切葡聚糖酶的规模化发酵生产提供一种新方法。

    秸秆降解生防链霉菌及其应用

    公开(公告)号:CN103555623A

    公开(公告)日:2014-02-05

    申请号:CN201310512364.3

    申请日:2013-10-25

    Abstract: 一种土壤修复技术领域的秸秆降解生防链霉菌及其应用,包括:菌种保藏和菌种活化,其中:菌种保藏采用-20℃低温冷冻保藏法,是微生物孢子处于较低的温度下,以降低其代谢速度从而达到保藏菌种的目的;菌种活化将冷冻保藏状态的菌种接种到YEME液体培养基中,待菌种逐渐适应培养环境进行繁殖,以获得数量足够、活力旺盛的培养物。另外,本发明涉及将链霉菌JSD-1用于生物防治。本发明利用已知的JSD-1菌株所未公开的硝态氮降解转化能力、以及对高温(如70℃)和高浓度硝酸盐(3%)有很强的耐受性,对植物病原(如番茄灰霉病和水稻恶苗病)微生物具有很好的抑制作用等特性,实现秸秆中的“难利用的碳”与设施次生盐渍化土壤中“过量的氮”的原位降解,并在高温堆肥外接菌剂和生物肥料的研制上有很好的应用潜力。

    具有秸秆降解能力的真菌及其在堆肥中的应用

    公开(公告)号:CN103468592A

    公开(公告)日:2013-12-25

    申请号:CN201310443222.6

    申请日:2013-09-25

    CPC classification number: Y02W30/43

    Abstract: 一种生物环保技术领域的具有秸秆降解能力的真菌及其在堆肥中的应用,该秸秆降解真菌JSD-17为草酸青霉(Penicillium oxalicum),保藏编号为CGMCC No.7743;进一步地,将所述秸秆降解真菌用于处理农业废弃物秸秆堆肥发酵。本发明所述草酸青霉不仅具有较强的纤维素酶合成能力,同时还具有秸秆中半纤维素和果胶组分的分解能力;本发明可以合成漆酶(Lac)、木质素过氧化物酶(Lip)和锰过氧化物酶(Mnp),大大加快了对秸秆中木质素组分的降解速度。

    基于田园秸秆废弃物的可移动微生物发酵系统

    公开(公告)号:CN103102193A

    公开(公告)日:2013-05-15

    申请号:CN201310080948.8

    申请日:2013-03-14

    CPC classification number: Y02A40/216 Y02W30/43

    Abstract: 一种农业微生物发酵技术领域的基于田园秸秆废弃物的可移动微生物发酵系统,该装置包括:发酵间、控制间、移动平台和斜面踏板,其中:发酵间和与之相连的控制间固定设置于移动平台的上方;斜面踏板、发酵间和控制间依次排列设置。本发明可人工移动,也可实时实地拆卸,能进行田园分布式秸秆废弃物发酵,节约了人力和原材料输送的成本。本发明结构独特新颖,在更加充分合理地利用田园秸秆废弃物,美化环境,资源循环利用方面具有很强的实用性。

    一种灰略红链霉菌耐高温中性蛋白酶及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN106636041A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201610711601.2

    申请日:2016-08-23

    Abstract: 本发明公开了一种灰略红链霉菌耐高温中性蛋白酶及其编码基因和应用。该蛋白酶基因从灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)克隆得到,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,上述编码的耐高温中性蛋白酶,其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。本发明通过在重组蛋白C端添加聚组氨酸标签(HIS6·Tag),保证了蛋白活性的同时,也便于蛋白酶的纯化。本发明的蛋白酶具有较宽的适用温度和pH范围,特别是在较高温度55℃下能表现出很好的酶活性;且对多种金属离子及酶活性抑制剂(EDTA、DTT、SDS和NaN3)均有较强的耐受能力。

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