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公开(公告)号：CN103114147B
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201310063844.6
申请日：2013-02-28
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种分析化学核酸适配体筛选技术领域的无固定点靶物质的适配体筛选方法，通过构建随机寡核苷酸文库以及用于PCR扩增的上游引物和下游引物和固定寡核苷酸文库引物，并利用链霉亲和素标记的琼脂糖颗粒固定寡核苷酸文库，最终通过SELEX方法筛选得到可用于克隆测序的PCR产物，经测序后得到与无固定点靶物质特异亲和性结合的适配体。将本方法应用于重金属镉离子适配体的筛选，得到13条能与镉离子高特异性、强亲和力作用的适配体。本发明固定效果好、适用性强且成本低，可用于无固定点靶物质的适配体筛选。
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公开(公告)号：CN103245652A
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201310180780.8
申请日：2013-05-16
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种水质检测技术领域的利用功能核酸形成G-四联体淬灭荧光检测铅离子的方法，通过使用羧基荧光素标记功能核酸，构建铅离子检测体系，当检测体系中加入铅离子后，铅离子促进功能核酸形成G-四联体结构，引起整个体系的荧光信号在520nm左右发生显著变化，且荧光信号变化与铅离子浓度呈现正向关系，然后采用荧光光度计进行荧光光谱扫描得到荧光淬灭率标准曲线；测试时将待测水样与超纯水，即对照样分别和功能核酸母液混合后，对两个混合产物在480nm波长处的荧光淬灭率对照荧光淬灭率标准曲线得到待测水样中的铅离子浓度。本发明克服了现有功能核酸检测铅离子需要引入众多辅助物、涉及复杂的催化反应等缺陷，采用简单操作实现最低检测限为0.77ppb、低成本且高效的水体铅离子检测。
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公开(公告)号：CN103163127A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310072069.0
申请日：2013-03-06
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种利用血红素过氧化物酶催化活性，通过比色法检测水体三价砷的方法，氯化血红素具有辣根过氧化物酶的活性，在过氧化氢的存在下可以催化显色底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)发生氧化还原反应，使溶液发生肉眼可变的颜色变化，核酸适配体的加入可以抑制催化活性，当向溶液中加入三价砷后，催化活性得到恢复，导致整个体系的颜色发生显著变化，且在442nm处的吸光度与三价砷浓度呈现正向关系，因而该方法可用于水体三价砷的检测。本方法提供的检测方法灵敏度高选择性好，最低检测限为1ppb，操作简便且不需要依赖大型仪器设备，可用于饮用水三价砷检测。
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公开(公告)号：CN103114147A
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN201310063844.6
申请日：2013-02-28
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种分析化学核酸适配体筛选技术领域的无固定点靶物质的适配体筛选方法，通过构建随机寡核苷酸文库以及用于PCR扩增的上游引物和下游引物和固定寡核苷酸文库引物，并利用链霉亲和素标记的琼脂糖颗粒固定寡核苷酸文库，最终通过SELEX方法筛选得到可用于克隆测序的PCR产物，经测序后得到与无固定点靶物质特异亲和性结合的适配体。将本方法应用于重金属镉离子适配体的筛选，得到13条能与镉离子高特异性、强亲和力作用的适配体。本发明固定效果好、适用性强且成本低，可用于无固定点靶物质的适配体筛选。
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公开(公告)号：CN103163127B
公开(公告)日：2014-12-31
申请号：CN201310072069.0
申请日：2013-03-06
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种利用血红素过氧化物酶催化活性，通过比色法检测水体三价砷的方法，氯化血红素具有辣根过氧化物酶的活性，在过氧化氢的存在下可以催化显色底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)发生氧化还原反应，使溶液发生肉眼可变的颜色变化，核酸适配体的加入可以抑制催化活性，当向溶液中加入三价砷后，催化活性得到恢复，导致整个体系的颜色发生显著变化，且在442nm处的吸光度与三价砷浓度呈现正向关系，因而该方法可用于水体三价砷的检测。本方法提供的检测方法灵敏度高选择性好，最低检测限为1ppb，操作简便且不需要依赖大型仪器设备，可用于饮用水三价砷检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103387991A
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201310338219.8
申请日：2013-08-05
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/115 , G01N21/31
Abstract: 一种无固定点靶物质的青霉素类抗生素适配体筛选领域的通过改进无固定点靶物质的适配体筛选技术筛选得到青霉素类抗生素适配体及其应用。通过固定寡核苷酸文库，洗脱未固定的核酸，正向筛选时加入青霉素类抗生素的母核6-APA（6-氨基青霉烷酸）与固定的核酸作用，洗脱下能与6-APA结合的核酸分子后，直接PCR扩增后用于下一轮筛选；负向筛选时加入其他抗生素，洗脱除去与青霉素类抗生素非特异性结合的核酸分子。经过多轮次的正、负筛选，得到10条与6-APA高特异性、强亲和力作用的核酸适配体，并选择其中二级结构较稳定的核酸适配体开发应用于检测6-APA的核酸适配体传感器。
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公开(公告)号：CN103196875A
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201310060274.5
申请日：2013-02-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 一种基于纳米金催化的共振散射光谱四环素检测方法，通过构建含有已知四环素浓度的检测体系后，荧光光度计进行共振散射光谱信号扫描得到共振散射信号变化量标准曲线，然后将待测对象与超纯水，即对照样分别加入含有四环素适配体和纳米金的混合液，并通过加入氯化钠溶液进行聚集反应，最后与含有硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠的溶液混合，最后经荧光光度计进行共振散射光谱信号扫描得到共振散射信号变化量标准曲线得到待测对象中的四环素浓度。本发明克服核酸适配体需要修饰及检测线不理想等缺陷，相比现有技术具有灵敏、选择性好、成本低且高效的优点。
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公开(公告)号：CN103305622A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310270187.2
申请日：2013-06-28
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种水质检测技术领域的利用非标记功能核酸形成G-四联体荧光法检测铅的方法，通过功能核酸以及DNA嵌入剂构建铅离子检测体系；当检测体系中没有铅离子时，DNA嵌入剂嵌入到功能核酸中，在535nm处释放出荧光；当检测体系中加入铅离子后，铅离子促进功能核酸形成G-四联体结构，DNA嵌入剂再与G-四联体作用并抑制535nm处的荧光释放，基于释放出的荧光信号与铅离子浓度呈反比，则通过确定荧光信号实现铅离子的定量检测。本发明能够克服现有技术中需要标记功能核酸、涉及复杂的催化反应等缺陷，具有操作简单、灵敏度高、选择性好、成本低且高效的特点。
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公开(公告)号：CN103387991B
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201310338219.8
申请日：2013-08-05
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/115 , G01N21/31
Abstract: 一种无固定点靶物质的青霉素类抗生素适配体筛选领域的通过改进无固定点靶物质的适配体筛选技术筛选得到青霉素类抗生素适配体及其应用。通过固定寡核苷酸文库，洗脱未固定的核酸，正向筛选时加入青霉素类抗生素的母核6-APA（6-氨基青霉烷酸）与固定的核酸作用，洗脱下能与6-APA结合的核酸分子后，直接PCR扩增后用于下一轮筛选；负向筛选时加入其他抗生素，洗脱除去与青霉素类抗生素非特异性结合的核酸分子。经过多轮次的正、负筛选，得到10条与6-APA高特异性、强亲和力作用的核酸适配体，并选择其中二级结构较稳定的核酸适配体开发应用于检测6-APA的核酸适配体传感器。
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公开(公告)号：CN103196875B
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201310060274.5
申请日：2013-02-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 一种基于纳米金催化的共振散射光谱四环素检测方法，通过构建含有已知四环素浓度的检测体系后，荧光光度计进行共振散射光谱信号扫描得到共振散射信号变化量标准曲线，然后将待测对象与超纯水，即对照样分别加入含有四环素适配体和纳米金的混合液，并通过加入氯化钠溶液进行聚集反应，最后与含有硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠的溶液混合，最后经荧光光度计进行共振散射光谱信号扫描得到共振散射信号变化量标准曲线得到待测对象中的四环素浓度。本发明克服核酸适配体需要修饰及检测线不理想等缺陷，相比现有技术具有灵敏、选择性好、成本低且高效的优点。
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