基于L-精氨酸改良的细胞内一氧化氮含量变化的检测方法

    公开(公告)号:CN103954571B

    公开(公告)日:2016-03-16

    申请号:CN201410182084.5

    申请日:2014-05-02

    Inventor: 陆伟 周培 钟玲盈

    Abstract: 一种基于L‐精氨酸改良的细胞内一氧化氮NO合成量变化的检测方法,通过将培养后的细胞置于暴露液后,经裂解处理后通过一氧化氮检测试剂盒检测细胞吸光度,并进一步折算得到细胞内NO的合成量的变化。本发明灵敏度高、选择性好、操作简便快捷、不依赖大型仪器设备。

    基于一氧化氮合成酶NOS的重金属铜细胞毒性的检测方法

    公开(公告)号:CN105018586B

    公开(公告)日:2018-01-30

    申请号:CN201410183066.9

    申请日:2014-05-02

    Inventor: 周培 陆伟 钟玲盈

    Abstract: 一种重金属毒性技术领域的基于一氧化氮合成酶NOS的重金属铜细胞毒性的检测方法,利用重金属铜可以通过取代NOS二聚体中的锌离子和钙离子,使NOS二聚体解聚,NO合成量下降,NOS的mRNA表达出现反馈性的上调;另一方面,NOS二聚体的解聚伴随着NOS的单体数量上升,细胞内活性氧含量上升,细胞翻译起始因子磷酸化,蛋白合成停止,最终导致细胞凋亡的毒性机制,将一氧化氮合成酶NOS用于重金属铜细胞毒性的检测,为重金属污染的生物安全性评估和治疗重金属中毒及其相关疾病的防治提供新的解决方案。

    基于一氧化氮合成酶NOS的重金属铜细胞毒性的检测方法

    公开(公告)号:CN105018586A

    公开(公告)日:2015-11-04

    申请号:CN201410183066.9

    申请日:2014-05-02

    Inventor: 周培 陆伟 钟玲盈

    Abstract: 一种重金属毒性技术领域的基于一氧化氮合成酶NOS的重金属铜细胞毒性的检测方法,利用重金属铜可以通过取代NOS二聚体中的锌离子和钙离子,使NOS二聚体解聚,NO合成量下降,NOS的mRNA表达出现反馈性的上调;另一方面,NOS二聚体的解聚伴随着NOS的单体数量上升,细胞内活性氧含量上升,细胞翻译起始因子磷酸化,蛋白合成停止,最终导致细胞凋亡的毒性机制,将一氧化氮合成酶NOS用于重金属铜细胞毒性的检测,为重金属污染的生物安全性评估和治疗重金属中毒及其相关疾病的防治提供新的解决方案。

    快速评价内分泌干扰物作用机制及其复合效应的方法

    公开(公告)号:CN103266172A

    公开(公告)日:2013-08-28

    申请号:CN201310180386.4

    申请日:2013-05-15

    Abstract: 一种快速评价内分泌干扰物作用机制及其复合效应的方法,包括以下步骤:人乳腺癌MCF-7细胞的培养;实时荧光定量PCR获得待测内分泌干扰物剂量-效应曲线;将待测内分泌干扰物混合形成不同浓度配比的暴露液,细胞持续暴露24h;暴露结束后,实时荧光定量PCR进行基因转录水平上分析;收集数据进行析因方差分析,绘制边际轮廓图,对待测内分泌干扰物作用机制及其复合效应进行评价;其中的待测内分泌干扰物为17β-雌二醇和o,p'-DDT。本发明基于数据统计分析,用人乳腺癌MCF-7细胞中雌激素目标基因评价内分泌干扰物的复合效应,方法简单、快速、灵敏,是一种快速评价内分泌干扰物作用机制及其复合效应的新方法。

    快速评价雌激素与抗雌激素复合效应的方法

    公开(公告)号:CN103243068A

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201310153409.2

    申请日:2013-04-27

    Abstract: 本发明涉及一种快速评价雌激素与抗雌激素复合效应的方法,该方法包括以下步骤:斑马鱼胚胎的获取;将雌激素与不同浓度的抗雌激素进行混合形成不同配比的暴露液,再将所述斑马鱼胚胎放入所述暴露液中,持续暴露96h,水温维持在26±1℃,光周期为白天16h和夜间8h,暴露液每24h换80%,并记录斑马鱼胚胎的孵化率、畸形率及孵化时间,暴露结束后,收集幼鱼保存备用;在胚胎发育形态学水平和/或基因转录水平上评价复合效应。用斑马鱼胚胎来评价雌激素与抗雌激素复合效应的方法简单、快速、客观,仅需96h,是一种快速评价雌激素与抗雌激素间复合效应的新方法。

    无固定点靶物质的适配体筛选方法

    公开(公告)号:CN103114147B

    公开(公告)日:2015-09-23

    申请号:CN201310063844.6

    申请日:2013-02-28

    Abstract: 一种分析化学核酸适配体筛选技术领域的无固定点靶物质的适配体筛选方法,通过构建随机寡核苷酸文库以及用于PCR扩增的上游引物和下游引物和固定寡核苷酸文库引物,并利用链霉亲和素标记的琼脂糖颗粒固定寡核苷酸文库,最终通过SELEX方法筛选得到可用于克隆测序的PCR产物,经测序后得到与无固定点靶物质特异亲和性结合的适配体。将本方法应用于重金属镉离子适配体的筛选,得到13条能与镉离子高特异性、强亲和力作用的适配体。本发明固定效果好、适用性强且成本低,可用于无固定点靶物质的适配体筛选。

    基于L-精氨酸改良的细胞内一氧化氮含量变化的检测方法

    公开(公告)号:CN103954571A

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201410182084.5

    申请日:2014-05-02

    Inventor: 陆伟 周培 钟玲盈

    Abstract: 一种基于L-精氨酸改良的细胞内一氧化氮NO合成量变化的检测方法,通过将培养后的细胞置于暴露液后,经裂解处理后通过一氧化氮检测试剂盒检测细胞吸光度,并进一步折算得到细胞内NO的合成量的变化。本发明灵敏度高、选择性好、操作简便快捷、不依赖大型仪器设备。

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