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公开(公告)号：CN104152393A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410374669.7
申请日：2014-07-31
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: Y02A40/12
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域的亚硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增依次得到编码亚硝酸盐还原酶大亚基及亚硝酸盐还原酶小亚基的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1，最终获得重组共表达载体pETDuet‐NC‐ND；之后将该亚硝酸盐还原酶表达载体转化到大肠杆菌表达菌株。本发明针对现有技术存在的由于亚硝酸盐还原酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，能够应用基因工程手段实现亚硝酸盐还原酶体外的大量表达合成，对于次生盐渍化土壤的快速修复乃至实现精准农业具有重大意义。
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公开(公告)号：CN103725654A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201310674679.8
申请日：2013-12-11
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: C12N9/0044
Abstract: 一种生物技术领域的巨大芽孢杆菌同化硝酸还原酶和亚硝酸还原酶基因及应用，包括编码同化硝酸盐还原酶Nas的催化亚基nasC（Seq ID No.1）以及编码同化亚酸盐还原酶NiR的大亚基nasD（Seq ID No.2）。本发明通过从巨大芽孢杆菌NCT-2中提取得到总RNA后进行cDNA合成，得到cDNA模板后经荧光定量PCR实现功能表达；并进一步用于进行土壤中过多硝酸盐的去除研究。
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公开(公告)号：CN103525739A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201310512371.3
申请日：2013-10-25
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种土壤修复技术领域的硝酸盐同化细菌及其在修复设施次生盐渍化土壤中的应用，通过硝酸盐同化细菌NCT-2以土壤中硝态氮作为氮源，并将其同化为其它形态的无机氮或细胞组分，从而实现对硝态氮的降解转化、降低土壤中硝态氮含量并对土壤进行修复。该硝酸盐同化细菌NCT-2为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，该硝酸盐同化细菌NCT-2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.4698。本发明对环境中硝态氮有很强的同化转化能力，对环境适应性强；此外，还具有溶磷能力。因此该菌在修复设施栽培次生盐渍化土壤和制备微生物肥料上有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN103468618A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201310439733.0
申请日：2013-09-25
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: Y02W30/43
Abstract: 一种生物环保技术领域的具有解磷能力的纤维素降解细菌及其应用，该纤维素降解细菌JSD-12为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)，保藏编号为CGMCC No.7923，保藏日期为2013年7月15日。该细菌不仅对纤维素具有较强的降解能力，同时还对秸秆中半纤维素和果胶组分有一定的分解能力；该细菌繁殖迅速并且可耐受60℃以上的高温，可制成高温堆肥的添加菌剂；此外该菌还具有解磷能力，可供生产菌肥。
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公开(公告)号：CN103217415B
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201310076998.9
申请日：2013-03-11
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N21/78
Abstract: 一种食品安全技术领域的利用核酸适配体修饰纳米金粒子的三聚氰胺检测方法，通过构建含有已知三聚氰胺浓度的检测体系后，采用紫外分光光度计分别测定其在640nm和520nm处的吸光值之比并制作标准曲线；然后将经过前处理的待测对象加入含有三聚氰胺适配体、纳米金以及PDDA的混合液中；最后经测定其在640nm和520nm处的吸光值之比，通过对照标准曲线得到待测对象中的三聚氰胺的浓度。本发明操作简便，反应快速可视，检测限可达到4.3ppb。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104120103A
公开(公告)日：2014-10-29
申请号：CN201410373726.X
申请日：2014-07-31
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域的谷氨酸合酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增依次得到编码谷氨酸合酶小亚基及大亚基的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1，最终获得重组共表达载体pETDuet‐GG‐GF；之后将该谷氨酸合酶表达载体转化到大肠杆菌表达菌株。本发明针对现有技术存在的由于谷氨酸合酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成，此外本发明通过在重组蛋白添加聚组氨酸标签的方法，方便了后期蛋白的纯化。
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公开(公告)号：CN103614395A
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201310566256.4
申请日：2013-11-13
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种基因工程技术领域的基于巨大芽孢杆菌的亚硝酸盐还原酶大亚基外源表达方法，通过将测序得到的亚硝酸盐还原酶大亚基的基因序列通过引物序列扩增并连接到大肠杆菌表达载体中，从而获得重组表达载体，并进一步将重组表达载体导入大肠杆菌中，筛选到含有目的基因的转基因重组菌。本发明克服现有技术中由于亚硝酸盐还原酶大亚基基因序列在天然的巨大芽孢杆菌中表达量非常低，严重限制使用效果，应用基因工程菌表达本发明所述的亚硝酸盐还原酶大亚基基因序列，实现极大的提高该基因的表达量。
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公开(公告)号：CN103571866A
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201310566278.0
申请日：2013-11-13
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种基因工程技术领域的巨大芽孢杆菌硝酸盐还原酶催化-电子转移亚基共表达载体，首先测定巨大芽孢杆菌全基因组序列作为模板，根据设计出的PCR引物扩增出含有酶切位点硝酸盐还原酶催化亚基(Bm-Nas B)和电子转移亚基(Bm-Nas C)的基因序列，并依次连接到共表达载体pETDuet-1上，通过菌落PCR技术挑选含有目的基因片段的大肠杆菌DH5α的阳性克隆。本发明克服现有技术中由于硝酸盐还原酶电子转移亚基基因序列在天然的巨大芽孢杆菌中表达量非常低，严重限制使用效果，实现极大的提高该基因的表达量。
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公开(公告)号：CN103555623A
公开(公告)日：2014-02-05
申请号：CN201310512364.3
申请日：2013-10-25
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种土壤修复技术领域的秸秆降解生防链霉菌及其应用，包括：菌种保藏和菌种活化，其中：菌种保藏采用-20℃低温冷冻保藏法，是微生物孢子处于较低的温度下，以降低其代谢速度从而达到保藏菌种的目的；菌种活化将冷冻保藏状态的菌种接种到YEME液体培养基中，待菌种逐渐适应培养环境进行繁殖，以获得数量足够、活力旺盛的培养物。另外，本发明涉及将链霉菌JSD-1用于生物防治。本发明利用已知的JSD-1菌株所未公开的硝态氮降解转化能力、以及对高温(如70℃)和高浓度硝酸盐(3%)有很强的耐受性，对植物病原(如番茄灰霉病和水稻恶苗病)微生物具有很好的抑制作用等特性，实现秸秆中的“难利用的碳”与设施次生盐渍化土壤中“过量的氮”的原位降解，并在高温堆肥外接菌剂和生物肥料的研制上有很好的应用潜力。
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公开(公告)号：CN103468592A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201310443222.6
申请日：2013-09-25
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: Y02W30/43
Abstract: 一种生物环保技术领域的具有秸秆降解能力的真菌及其在堆肥中的应用，该秸秆降解真菌JSD-17为草酸青霉(Penicillium oxalicum)，保藏编号为CGMCC No.7743；进一步地，将所述秸秆降解真菌用于处理农业废弃物秸秆堆肥发酵。本发明所述草酸青霉不仅具有较强的纤维素酶合成能力，同时还具有秸秆中半纤维素和果胶组分的分解能力；本发明可以合成漆酶(Lac)、木质素过氧化物酶(Lip)和锰过氧化物酶(Mnp)，大大加快了对秸秆中木质素组分的降解速度。
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