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公开(公告)号：CN118546923A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202310166351.9
申请日：2023-02-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9的产琥珀酸放线杆菌的碱基编辑器构建方法及应用，属于基因工程领域。本发明提供的产琥珀酸放线杆菌碱基编辑器可用于产琥珀酸放线杆菌DNA水平特定位点的特异性突变。本发明构建的胞嘧啶碱基编辑器CBE和腺嘌呤碱基编辑器ABE，分别成功介导C·G‑‑T·A和A·T‑‑G·C。碱基编辑器CBE是由rAPOBEC1、nCas9(D10A)和UGI融合蛋白1表达元件和sgRNA表达元件组成的质粒；碱基编辑器ABE是由TadA8e和nCas9(D10A)融合蛋白2表达元件和sgRNA表达元件组成的质粒；且碱基编辑器上都含有温度敏感复制启动蛋白pSG5Rep。本发明开发的适用于产琥珀酸放线杆菌的碱基编辑器，操作简单，转化效率高，具有一定的应用价值。
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公开(公告)号：CN118480580A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410555370.5
申请日：2024-05-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种多酶级联反应催化合成茉莉酮的方法，属于合成生物技术领域。本发明的级联反应涉及大豆脂氧合酶、拟南芥来源的丙二烯氧化物合酶和丙二烯氧化物环化酶、棉铃虫来源的谷胱甘肽转移酶、以及酿酒酵母；通过这些酶的级联反应将底物α‑亚麻酸转化为异‑12氧代植物二烯酸，继而由酿酒酵母转化生成茉莉酮，实现了生物催化合成茉莉酮。该方法区别于传统的从植物中萃取以及化学合成，有效扩展了茉莉酮的获取方式。
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公开(公告)号：CN118064398A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202410164570.8
申请日：2024-02-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种异丁香酚氧甲基转移酶突变体及其全细胞催化合成橙皮素二氢查耳酮的方法，属于生物技术领域。本发明人通过理性设计，对IeOMT进行定点突变，实现了3‑羟基根皮素在C3’‑OH或C4’‑OH的选择性甲基化，并且利用全细胞催化制得138mg/L橙皮素二氢查尔酮，为利用酶法催化合成橙皮素二氢查尔酮奠定基础。
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公开(公告)号：CN112920280B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202110436308.0
申请日：2021-04-22
Applicant: 江南大学
IPC: C07K19/00 , C12N9/58 , C12N9/64 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12G1/022 , C12R1/84 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种酸性蛋白酶高效表达的方法及其应用，属于基因工程领域。本发明提供的重组毕赤酵母P.pastorisGS115/pPIC9K‑en‑αSP‑acidprotea表达酶活达到5395U/mL，较含有原始α‑信号肽的对照菌株产酶酶活提高了109％，本发明的酸性蛋白在pH1‑5范围内，该酶能够维持其60％以上的酶活力、20～40℃处理30min剩余酶活在80％以上，可适用于食品、饲料或酿造等行业。根据本发明的技术方案可以实现利用基因工程手段生产适合工业应用的酸性蛋白酶。
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公开(公告)号：CN112126614B
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202011064833.6
申请日：2020-09-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用全细胞转化制备覆盆子酮的方法，属于基因工程技术领域。本发明以共表达苄基丙酮还原酶和葡萄糖脱氢酶基因的重组工程菌作为生物催化剂，以对羟基亚苄基丙酮为底物，利用有透性的微生物全细胞自循环NADPH供体系统合成覆盆子酮，在50mL体系中，45℃下反应1小时，覆盆子酮浓度可高达9.4g·L‑1。本发明克服了化学合成高污染、非生物来源和生物发酵法低产量低、生产效率低等缺陷，提供了一种利用生物法高效合成覆盆子酮的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112481140B
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202011539615.3
申请日：2020-12-23
Applicant: 江南大学 , 无锡新和源发酵技术研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物固态发酵生产茉莉酸的方法，属于生物技术领域。Lasiodiplodia.sp在接种到含麦粒的固态发酵培养基中，静置发酵6‑15天可以产生4128mg/Kg麦粒的茉莉酸。该方法为微生物发酵生产茉莉酸的放大提供了可行性。
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公开(公告)号：CN111172058B
公开(公告)日：2021-09-03
申请号：CN201911314974.6
申请日：2019-12-19
Applicant: 江南大学 , 无锡施瑞水产科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一株解淀粉芽孢杆菌及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一株降解含氮化合物能力强的解淀粉芽孢杆菌B4；经解淀粉芽孢杆菌B4处理20h，氨氮去除测试培养基(NM)中氨氮的降解率就高达92.32％；经解淀粉芽孢杆菌B4处理20h，反硝化培养基(DM)中亚硝酸盐氮的降解率就高达100％。本发明通过将解淀粉芽孢杆菌B4进行高密度发酵，制备得到了主要成分为富含芽孢的解淀粉芽孢杆菌B4的水体净化剂；此水体净化剂净化水体的能力强、可适应不同氨氮浓度的水体环境且可提高水生动物养殖的成活率；经此水体净化剂处理24h，初始氨氮浓度分别为1、10、20mg/L的水体中的氨氮就几乎被完全去除。
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公开(公告)号：CN113234764A
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202110546485.4
申请日：2021-05-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种γ‑聚谷氨酸的异源表达方法，是一种从糖质原料一步法发酵合成不同D/L单体比的γ–PGA的生产工艺，以一株高产L‑Glu的C.glutamicum F343为底盘表达来自于地衣芽孢杆菌的γ–PGA合成酶的基因簇capBCA，合成了以L‑Glu为主(98.06)的γ–PGA。再通过外源添加不同浓度的D‑Glu，合成了γ–D‑PGA占比为2％‑33％的γ–PGA。结果显示，在48h时γ‑PGA的产量达到最高为5.33g/L。此外本发明对产自F343重组菌的γ‑聚谷氨酸的分子量进行了测定，结果显示，其重均分子量是产自地衣芽孢杆菌的天然γ‑聚谷氨酸的重均分子量的1.16倍。本发明成功地构建了聚谷氨酸的外源合成途径，节省了原料和过程控制成本，提高了经济效益，具有很好的工业应用价值和前景。
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公开(公告)号：CN112852842A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110086152.8
申请日：2021-01-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种交替糖蔗糖酶表达及其制备交替糖的方法，属于酶工程技术领域。构建的毕赤酵母工程菌(Pichia pastoris X33/pPICZa‑ASR)，经3L发酵罐高密度发酵，所产交替糖蔗糖酶酶活达到34.5U/mL以上，实现了交替糖蔗糖酶的高效表达。以蔗糖为供体，以其他小分子糖为受体，利用重组工程菌生产的交替糖蔗糖酶催化合成交替糖。本方法实现了交替糖蔗糖酶的高效表达，展现良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN112626048A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011519196.7
申请日：2020-12-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐热植酸酶突变体及其应用，属于酶工程领域。通过随机突变的方法对来源于大肠杆菌Escherichia coli植酸酶基因appA进行改造，多轮筛选得到一种突变体蛋白，其氨基酸序列为SEQ ID NO:3。本发明筛选得到的植酸酶突变体appA‑M最适pH为4.5，最适温度为65℃，在90℃处理10min后保留30％的酶活。与野生酶相比，植酸酶突变体appA‑M的热稳定性得到显著提高。所述植酸酶突变体可以广泛应用于猪禽饲料中，从而有利于减少饲料制粒过程中酶活力的损失，降低饲料成本，同时还能降低磷排放对环境的污染。
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