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公开(公告)号:CN105177034A
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201510522274.1
申请日:2015-08-24
Applicant: 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
Abstract: 本发明从Bacillus subtilis CTCC M2009200中克隆出参与2,3-丁二醇合成途径中辅酶循环再生的关键酶基因甘油脱氢酶(gdh)和乙偶姻还原酶(acr)以及调控2,3-丁二醇支路关键酶酶活的调控因子aslR,并将该基因与穿梭表达质粒pMA5-HpaII连接,成功构建了携带基因gdh,acr和aslR基因的穿梭表达质粒pMA5-HpaII-acr-HapII-gdh-PbdhA-alsR,并转入Bacillus subtilis CTCC M2009200中,获得加强gdh,acr和alsR基因表达的重组枯草芽孢杆菌(命名为GAR)。对原始菌以及重组菌GAR进行利用甘油发酵生产2,3-丁二醇实验,结果表明,与原始菌株相比,重组菌2,3-丁二醇产量提高了17.2%,副产物如乙偶姻、乳酸和丁二酸的积累分别降低69.2%、45.2%和47.4%,且发酵周期有所缩短。通过补料流加甘油,发酵48h,发酵液中2,3-丁二醇积累量达到102.6g/L,这是现有技术所不能达到的结果。
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公开(公告)号:CN105154456B
公开(公告)日:2018-05-01
申请号:CN201510524310.8
申请日:2015-08-24
Applicant: 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所
Abstract: 2,3‑丁二醇的合成最后一步是乙偶姻还原酶催化还原乙偶姻合成2,3‑丁二醇,此反应需要还原型辅酶NADH的参与,因此,胞内辅酶NADH水平的高低是影响乙偶姻向2,3‑丁二醇转化程度的一个重要因素。为进一步提高该菌株2,3‑丁二醇合成能力,并减少副产物乙偶姻的积累,发明人将HpaII‑fdh片段插入到基因nox内部,获得片段nox::HpaII‑fdh,并将该片段导入解淀粉芽孢杆菌B10‑127中,通过同源重组原理获得染色体组上基因nox内部被fdh基因插入的重组解淀粉芽孢杆菌(重新命名为N△F)。并对原始菌及重组菌N△F进行2,3‑丁二醇发酵性能检测,结果表明,与原始菌株相比,重组菌2,3‑丁二醇产量提高了18.9%,副产物乙偶姻产量降低70.8%。说明该策略能够提高2,3‑丁二醇产量,降低副产物乙偶姻的积累。
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公开(公告)号:CN105154456A
公开(公告)日:2015-12-16
申请号:CN201510524310.8
申请日:2015-08-24
Applicant: 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所 , 如皋江大食品生物技术研究所有限公司
Abstract: 2,3-丁二醇的合成最后一步是乙偶姻还原酶催化还原乙偶姻合成2,3-丁二醇,此反应需要还原型辅酶NADH的参与,因此,胞内辅酶NADH水平的高低是影响乙偶姻向2,3-丁二醇转化程度的一个重要因素。为进一步提高该菌株2,3-丁二醇合成能力,并减少副产物乙偶姻的积累,发明人将HpaII-fdh片段插入到基因nox内部,获得片段nox::HpaII-fdh,并将该片段导入解淀粉芽孢杆菌B10-127中,通过同源重组原理获得染色体组上基因nox内部被fdh基因插入的重组解淀粉芽孢杆菌(重新命名为N△F)。并对原始菌及重组菌N△F进行2,3-丁二醇发酵性能检测,结果表明,与原始菌株相比,重组菌2,3-丁二醇产量提高了18.9%,副产物乙偶姻产量降低70.8%。说明该策略能够提高2,3-丁二醇产量,降低副产物乙偶姻的积累。
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公开(公告)号:CN112852842B
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202110086152.8
申请日:2021-01-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种交替糖蔗糖酶表达及其制备交替糖的方法,属于酶工程技术领域。构建的毕赤酵母工程菌(Pichia pastoris X33/pPICZa‑ASR),经3L发酵罐高密度发酵,所产交替糖蔗糖酶酶活达到34.5U/mL以上,实现了交替糖蔗糖酶的高效表达。以蔗糖为供体,以其他小分子糖为受体,利用重组工程菌生产的交替糖蔗糖酶催化合成交替糖。本方法实现了交替糖蔗糖酶的高效表达,展现良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN112852842A
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN202110086152.8
申请日:2021-01-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种交替糖蔗糖酶表达及其制备交替糖的方法,属于酶工程技术领域。构建的毕赤酵母工程菌(Pichia pastoris X33/pPICZa‑ASR),经3L发酵罐高密度发酵,所产交替糖蔗糖酶酶活达到34.5U/mL以上,实现了交替糖蔗糖酶的高效表达。以蔗糖为供体,以其他小分子糖为受体,利用重组工程菌生产的交替糖蔗糖酶催化合成交替糖。本方法实现了交替糖蔗糖酶的高效表达,展现良好的工业应用前景。
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